| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Glutamate Dehydrogenase (GDH) and Mitochondrial Permeability Transition Pore (mPTP). 2-Methylcitric acid impairs glutamate metabolism and acts as a potent inhibitor of glutamate oxidation by inhibiting glutamate dehydrogenase (GDH) activity. It also induces permeability transition (PT) in brain mitochondria, acting as a PT inducer that disturbs mitochondrial energy homeostasis and disrupts oxidative phosphorylation.
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| 体外研究 (In Vitro) |
2-甲基柠檬酸三钠可引起脑线粒体通透性改变，并影响谷氨酸代谢[1]。2-浓度低至0.5 mM时，甲基柠檬酸三钠即可降低谷氨酸脱氢酶（GDH）的活性[1]。2-甲基柠檬酸三钠（1 mM、3 mM；150秒）可促进多种底物支持的Ca2+负载线粒体肿胀，并显著降低线粒体膜电位[1]。2-甲基柠檬酸三钠作为一种通透性转换诱导剂，可扰乱线粒体能量平衡，并通过阻断谷氨酸脱氢酶活性，成为谷氨酸氧化的有效抑制剂[1]。2-甲基柠檬酸三钠不会引起线粒体谷氨酸转运的明显减少[1]。在肝脏线粒体中，2-甲基柠檬酸三钠对谷氨酸线粒体转运没有明显的影响[1]。
2-甲基柠檬酸抑制谷氨酸脱氢酶（GDH）活性，IC50值约为0.5-1 mM。在1-3 mM浓度下，它可诱导线粒体通透性转换，导致线粒体肿胀、膜电位（ΔΨm）耗散，并抑制以谷氨酸为底物的ADP刺激呼吸（状态3）。它还能以剂量依赖的方式抑制解偶联呼吸，在3 mM浓度下抑制率最高（约70%）。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在动物模型中，给大鼠腹腔注射2-甲基柠檬酸（0.5-2 umol/g体重）可诱发癫痫发作和神经功能障碍，模拟丙酸血症患者的急性神经危象。该化合物还会引起代谢性酸中毒、高氨血症和脑能量代谢紊乱，导致脑内ATP水平降低和乳酸生成增加。
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| 酶活实验 |
为评估GDH抑制作用，将纯化的牛肝GDH（0.5 U/mL）与不同浓度的2-甲基柠檬酸三钠（0.1-5 mM）在含有100 mM乙酸铵、2 mM α-酮戊二酸和0.1 mM NADH的50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 8.0）中孵育。加入100 mM谷氨酸启动反应，并在25℃下于10分钟内通过监测340 nm处吸光度的下降来追踪NADH氧化为NAD+的过程。GDH抑制的IC50值由初始反应速率计算得出。
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| 细胞实验 |
线粒体肿胀实验采用从大鼠脑或肝脏中分离的线粒体（0.5-1 mg 蛋白/mL），悬浮于呼吸缓冲液（125 mM KCl、5 mM KH2PO4、10 mM HEPES、2.5 mM MgCl2，pH 7.4）中。加入不同浓度的 2-甲基柠檬酸（0.5-5 mM），并在 30℃ 下孵育 30 分钟，通过测量 540 nm 处吸光度的下降来监测线粒体肿胀程度。肿胀程度与线粒体通透性转换孔（mPTP）的开放程度相关。膜电位测量方面，将分离的线粒体（0.5 mg/mL）与 0.2 uM 罗丹明 123 或 0.5 uM TMRM 孵育，并测量荧光强度（激发波长 488 nm，发射波长 525 nm）作为膜电位变化（ΔΨm）的指标。
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| 动物实验 |
雄性Wistar大鼠（250-300 g）用异氟烷麻醉后，将23号针头插入侧脑室（立体定位坐标：距前囟AP -0.8 mm，ML +/-1.5 mm，DV -3.5 mm）。将2-甲基柠檬酸三钠（1-5 μmol溶于5 μL生理盐水）脑室内注射（ICV），注射时间为2-3分钟。使用标准化的癫痫发作严重程度评分（0-6分）监测60-90分钟内的癫痫发作情况。在不同时间点处死动物，迅速取出脑组织，用于测定ATP、乳酸和谷氨酸水平，或分离线粒体进行离体呼吸功能分析。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
2-甲基柠檬酸是一种内源性代谢产物，在甲基丙二酸血症或丙酸血症患者的组织和体液中可积累至毫摩尔浓度。它主要由甲基丙二酰辅酶A经甲基柠檬酸循环生成。在人体中，代谢失代偿期间血浆2-甲基柠檬酸水平可超过100微摩尔。该化合物难以穿过血脑屏障，但在代谢性酸中毒和高氨血症的情况下会在脑内积聚。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
2-甲基柠檬酸的积累会导致多种有机酸血症的病理生理变化，包括代谢性酸中毒、高氨血症、神经损伤和心肌病。体外神经毒性研究表明，2-甲基柠檬酸（1-5 mM）可通过激活caspase-3并增加活性氧（ROS）的产生，诱导原代大鼠皮层神经元凋亡。在星形胶质细胞中，它会导致线粒体肿胀、ATP耗竭和乳酸脱氢酶（LDH）的释放。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
2-甲基柠檬酸三钠是一种生化试剂和研究工具，用于研究甲基丙二酸血症和丙酸血症的分子机制。它也被用作代谢谱分析研究中这些疾病的诊断生物标志物。该化合物对于研究谷氨酸脱氢酶的调控、线粒体通透性转换以及有机酸积累引起的代谢性脑病的发病机制具有重要价值。
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| 分子式 |
C7H7O7.NA3
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|---|---|
| 分子量 |
272.10
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| 精确质量 |
271.988
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| CAS号 |
117041-96-0
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| 相关CAS号 |
2-Methylcitric acid;6061-96-7
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| PubChem CID |
71311617
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
141
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
17
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| 分子复杂度/Complexity |
255
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
[Na+].[Na+].[Na+].CC(C(CC([O-])=O)(C([O-])=O)O)C([O-])=O
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| InChi Key |
HPLKAWNRQOHUKD-UHFFFAOYSA-K
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| InChi Code |
InChI=1S/C7H10O7.3Na/c1-3(5(10)11)7(14,6(12)13)2-4(8)9;;;/h3,14H,2H2,1H3,(H,8,9)(H,10,11)(H,12,13);;;/q;3*+1/p-3
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| 化学名 |
trisodium;2-hydroxybutane-1,2,3-tricarboxylate
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| 别名 |
2Methylcitric acid trisodium; 2 Methylcitric acid trisodium
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.6751 mL | 18.3756 mL | 36.7512 mL | |
| 5 mM | 0.7350 mL | 3.6751 mL | 7.3502 mL | |
| 10 mM | 0.3675 mL | 1.8376 mL | 3.6751 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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