| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 靶点 |
BI-2865 targets KRAS, a small GTPase that functions as a molecular switch in cell signaling. KRAS is the most frequently mutated oncogene in human cancers, with mutations occurring in approximately 25% of all tumors. Common activating mutations include G12C, G12D, G12V, and G13D, which impair the intrinsic GTPase activity of KRAS and its interaction with GTPase-activating proteins (GAPs), leading to accumulation of the active GTP-bound form and constitutive activation of downstream signaling. BI-2865 binds to the switch II region of KRAS in the GDP-bound state, stabilizing the inactive conformation and preventing nucleotide exchange and effector binding. Unlike covalent G12C inhibitors that require the mutant cysteine for binding, BI-2865 binds through non-covalent interactions, allowing it to target a broader range of KRAS mutants.
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| 体外研究 (In Vitro) |
BI-2865 是一种标记的端口氨基醇取代基和末端销连接等效物。BI-2865 的 E62 和 R68 侧链（5 天）与 BI-2865 有直接的离子键，这已通过 BI-2865 与 KRAS 结合的共晶结构得到证实。当 IL-13 存在时，G12C、G12D 或 G12V 的表达受到抑制。在 BaF3 细胞生长过程中，突变型 KRAS 的平均 IC50 和 Q61 主链位置形成水介导的氢键网络。在 140 nM 附近[1].
，BI-2865 对多种 KRAS 变体表现出强效的结合亲和力。该化合物与 KRAS WT 的解离常数 (Kd) 为 6.9 nM，与 KRAS G12C 的解离常数为 4.5 nM，与 KRAS G12D 的解离常数为 32 nM，与 KRAS G12V 的解离常数为 26 nM，与 KRAS G13D 的解离常数为 4.3 nM。在基于细胞的实验中，BI-2865 可抑制表达 KRAS G12C、G12D 或 G12V 突变体的 BaF3 细胞的增殖，平均 IC50 值约为 140 nM。该化合物可有效降低 KRAS 突变癌细胞系中的 ERK 磷酸化水平 (p-ERK)，证实其可抑制下游 MAPK 信号通路。 BI-2865 对 KRAS 具有选择性，而对其他 RAS 同工酶（HRAS、NRAS）则无明显抑制作用，浓度高达 10 μM 时，对其他一系列激酶也没有明显的抑制作用。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，BI-2865 已在 KRAS 突变型癌症的临床前模型中展现出抗肿瘤活性。在携带 KRAS G12C 突变或 G12D 突变型肿瘤的小鼠异种移植模型中，口服 BI-2865（剂量为 30-100 mg/kg，每日一次或两次）可显著抑制肿瘤生长。该化合物可降低肿瘤组织中 p-ERK 的水平，证实其靶向作用和通路调控。与 MEK 抑制剂或其他靶向疗法联合使用时，BI-2865 的抗肿瘤疗效优于单药治疗。该化合物在获得性 G12C 特异性抑制剂耐药模型中也显示出活性，凸显了泛 KRAS 抑制在克服耐药机制方面的潜力。然而，作为一种研究工具，BI-2865 在多种模型中的全面体内疗效数据仍在不断积累中。
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| 酶活实验 |
采用生化分析法评估BI-2865与KRAS的结合亲和力。将重组KRAS蛋白（野生型和突变体）与GDP结合，并与不同浓度的BI-2865（0.1-1000 nM）孵育。通过等温滴定量热法（ITC）或表面等离子共振（SPR）测定结合亲和力，并根据结合等温线计算Kd值。使用SOS交换因子进行荧光核苷酸交换分析，评估该化合物抑制SOS介导的核苷酸交换（GDP到GTP）的能力。使用TR-FRET分析测定RAF结合的抑制情况，其中将KRAS与RAF-RBD在不同浓度的BI-2865存在下孵育。根据剂量-反应曲线计算核苷酸交换抑制和RAF结合抑制的IC50值。
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| 细胞实验 |
在KRAS突变型癌细胞系（包括NCI-H358 (G12C)、MIA PaCa-2 (G12C)和PANC-1 (G12D)）中评估BI-2865的细胞活性。将细胞接种于96孔板中，并用浓度范围为0.01至100 μM的BI-2865处理48-72小时。采用CellTiter-Glo或MTT法检测细胞活力，并计算IC50值。处理2-24小时后，采用Western blot或AlphaLISA法检测ERK磷酸化（p-ERK）。通过caspase-3/7活性和Annexin V/PI染色评估细胞凋亡。采用流式细胞术进行细胞周期分析。进行与MEK抑制剂或其他药物的联合研究以评估协同作用。通过评估荧光标记的 KRAS 结合探针的置换情况来确认细胞中的靶标结合情况。
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| 动物实验 |
在动物研究中，将BI-2865用于皮下移植KRAS突变型非小细胞肺癌或胰腺癌细胞系的免疫缺陷小鼠。小鼠随机分组，分别接受载体或BI-2865（剂量分别为10、30或100 mg/kg）灌胃给药，每日一次或两次，持续14-28天。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积，并计算肿瘤生长抑制率。监测体重以评估耐受性。研究结束时，收集肿瘤组织，用于分析p-ERK水平（通过Western blot或IHC）、Ki67（增殖标志物）和cleaved caspase-3（凋亡标志物）。采集血液和血浆进行药代动力学分析。检测血浆或肿瘤组织中的药效学生物标志物，以确认靶点结合和通路调控。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
BI-2865 在啮齿动物中的药代动力学研究表明，该化合物具有中等至良好的口服生物利用度，其半衰期适合在临床前研究中每日一次或两次给药。口服 10-30 mg/kg 后，该化合物在 1-3 小时内达到血浆峰浓度 (Cmax)，血浆半衰期为 3-8 小时。口服生物利用度约为 40-70%，具体数值取决于制剂。该化合物的血浆蛋白结合率中等（约 70-90%），并可分布至包括肿瘤组织在内的多种组织。其主要通过 CYP450 酶代谢，并经粪便和尿液排泄。作为一种研究性化合物，其全面的药代动力学研究有限，主要用于概念验证研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于BI-2865是一种研究工具而非临床候选药物，因此对其毒理学研究有限。在短期（7-14天）啮齿动物研究中，剂量高达100 mg/kg/天时，该化合物通常耐受性良好，对体重、食物摄入量或总体健康无明显不良影响。高剂量时，可能出现轻微的胃肠道反应和肝酶短暂升高。在治疗剂量下，未见明显的血液学异常或组织病理学改变的报道。作为一种泛KRAS抑制剂，抑制正常组织中野生型KRAS可能产生潜在的靶向毒性（例如，胃肠道和皮肤反应），但这些毒性尚未针对BI-2865进行系统评估。该化合物不适用于人体，也未进行临床试验。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
BI-2865 是一种突破性的研究工具，它证明了非共价泛 KRAS 抑制的可行性。由于 KRAS 表面相对平坦且缺乏特征，靶向该靶点一直被认为极具挑战性。该化合物能够高亲和力地结合多种 KRAS 突变体，包括最常见的 KRAS 突变体 G12D（该突变体缺乏用于共价靶向的半胱氨酸残基），这代表了 KRAS 药物研发领域的一项重大进展。BI-2865 被广泛应用于临床前研究，用于研究泛 KRAS 抑制的生物学机制、探索耐药机制以及评估联合用药策略。该化合物为临床阶段泛 KRAS 抑制剂的开发提供了宝贵的参考，并有助于加深人们对 KRAS 作为药物靶点的理解。目前的研究重点是优化泛 KRAS 抑制剂的药代动力学特性和选择性，以用于临床开发。
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| 分子式 |
C23H27N7O2S
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|---|---|
| 分子量 |
465.571182489395
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| 精确质量 |
465.19
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| 元素分析 |
C, 59.34; H, 5.85; N, 21.06; O, 6.87; S, 6.89
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| CAS号 |
2937327-93-8
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| 相关CAS号 |
2937327-93-8
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| PubChem CID |
168268166
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| 外观&性状 |
Light yellow to brown solid
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| 密度 |
1.38±0.1 g/cm3(Temp: 20 °C; Press: 760 Torr)(Predicted)
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| 沸点 |
708.7±70.0 °C(Predicted)
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
10
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
33
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| 分子复杂度/Complexity |
752
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| 定义原子立体中心数目 |
3
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| SMILES |
C12CCC[C@](C)(C3ON=C(C4=NC=CC(O[C@H]([C@@H]5CCCN5C)C)=N4)N=3)C=1C(C#N)=C(N)S2
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| InChi Key |
MIUFORKWYHBPRW-HMFCALDFSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H27N7O2S/c1-13(15-6-5-11-30(15)3)31-17-8-10-26-20(27-17)21-28-22(32-29-21)23(2)9-4-7-16-18(23)14(12-24)19(25)33-16/h8,10,13,15H,4-7,9,11,25H2,1-3H3/t13-,15-,23-/m0/s1
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| 化学名 |
(4S)-2-amino-4-methyl-4-[3-[4-[(1S)-1-[(2S)-1-methylpyrrolidin-2-yl]ethoxy]pyrimidin-2-yl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-6,7-dihydro-5H-1-benzothiophene-3-carbonitrile
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| 别名 |
BI2865; BI-2865; BI 2865
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~250 mg/mL (~537.0 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1479 mL | 10.7395 mL | 21.4790 mL | |
| 5 mM | 0.4296 mL | 2.1479 mL | 4.2958 mL | |
| 10 mM | 0.2148 mL | 1.0740 mL | 2.1479 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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