| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Spinach2 RNA aptamer [1][2]
DFHBI-2T does not target specific proteins or enzymes. Instead, its target is specific RNA aptamer sequences (e.g., Spinach2). The probe remains non-fluorescent until it binds to these RNA stem-loop structures, whereupon the restriction of molecular rotation and exclusion of solvent activate its fluorescence. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
当与Spinach2结合时，与DFHBI相比，DFHBI-2T 的激发峰显著红移了53 nm（从447 nm至500 nm），发射峰红移了22 nm（从501 nm至523 nm）。由于量子产率的降低，整体亮度有所下降。 [1]
Spinach2-DFHBI-2T 复合物的光物理性质为：最大吸收波长为460 nm，最大激发波长为500 nm，最大发射波长为523 nm，消光系数为29,000 M⁻¹ cm⁻¹，量子产率为0.12，亮度为22（相对于Spinach2-DFHBI），解离常数（Kd）约为1,300 nM（1.2 μM）。 [1] 游离的DFHBI-2T荧光染料（未与Spinach2结合）的光物理性质为：最大吸收波长为460 nm，最大发射波长为515 nm，消光系数为34,800 M⁻¹ cm⁻¹，荧光量子产率为0.0012。 [1] 在体外，将基于Spinach2的S-腺苷甲硫氨酸（SAM）传感器（由Spinach2和SAM适配体组成）与DFHBI-2T一起孵育，产生了SAM依赖性的、发射波长为523 nm的荧光。 [1] 通过黄色发射通道可观察到的荧光是由 spinach2 成像 DFHBI-2T[2] 产生的。 在无细胞体系或细胞裂解液中，DFHBI-2T 本身背景荧光极低。当与 Spinach2 RNA 适配体结合时，DFHBI-2T 发出明亮的绿色荧光。利用 Spinach2 成像 DFHBI-2T 产生的荧光可通过黄色发射通道检测，其荧光强度足以在体外模拟系统中进行实时RNA定量分析。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在表达(CGG)₆₀-Spinach2的COS7细胞中，当培养基更换为含有20 μM DFHBI-2T的培养基时，使用GFP滤光片组成像时荧光显著减弱，但使用YFP滤光片组时可轻易检测到荧光。这表明使用DFHBI-2T对Spinach2成像可产生在黄色发射通道中可检测到的荧光。 [1]
DFHBI-2T 具有良好的膜通透性，能够穿过活细胞膜进入细胞质。在表达特定RNA适配体（如 Spinach2）的活细胞中，DFHBI-2T 能够进入细胞并与目标RNA结合，从而实现对RNA的实时动态成像，可用于追踪RNA在细胞内的定位和转运。 |
| 酶活实验 |
Spinach2-DFHBI-2T复合物的光谱采集：在过量Spinach2（5 μM）存在下，将1 μM DFHBI-2T置于结合缓冲液（40 mM HEPES，pH 7.4，125 mM KCl，10 mM MgCl₂）中，收集激发和发射光谱。激发光谱在发射最大波长处收集，发射光谱在激发最大波长处收集。 [1]
通常将纯化的 Spinach2 RNA（通过体外转录获得）与 DFHBI-2T 在缓冲液中混合孵育。 RNA 折叠：将 RNA 在折叠缓冲液（含 K+ 和 Mg2+）中加热后缓慢冷却，使其形成正确的适配体结构。 染色：加入 DFHBI-2T 工作液（通常使用 DMSO 配制，终浓度通常为 1-10 µM）。 检测：在室温下避光孵育 5-30 分钟后，使用荧光酶标仪或荧光分光光度计在 500 nm 激发/523 nm 发射处读取荧光值。若无特定实验记录，通常设含 RNA 组和不含 RNA 的空白对照组。 |
| 细胞实验 |
使用DFHBI-2T对Spinach2融合RNA进行活细胞成像：将表达(CGG)₆₀-Spinach2的COS7细胞在含有DFHBI或DFHBI-2T的培养基中培养。使用GFP和YFP两种滤光片组对细胞进行成像。比例尺为10 μm。 [1]
细胞培养：将表达目标 RNA 适配体（如 Spinach2）的细胞系接种于共聚焦培养皿或 96 孔板中。 染色：去除细胞培养基，加入含有 DFHBI-2T 的新鲜培养基（建议浓度 1-5 µM，具体需预实验滴定），通常在 37°C 孵育 15-30 分钟。 洗涤与成像：用预温的 PBS 洗涤细胞 2-3 次以去除多余的探针，随后在共聚焦显微镜下使用 FITC 通道（对应 500/523 nm）进行活细胞成像。实验中需设置未转染适配体的阴性对照组。 |
| 动物实验 |
基于其作用机制，一般实验流程如下：
模型准备：使用移植了表达 RNA 适配体（如 Spinach2）的肿瘤细胞的小鼠模型，或通过尾静脉注射编码适配体的病毒载体。 给药：通常在肿瘤局部注射或通过尾静脉 systemic 给药。DFHBI-2T 通常溶于 DMSO 后用生理盐水稀释，或使用包含表面活性剂的配伍溶剂（如 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween 80 + 45% Saline）。 成像：给药后，在活体成像系统中使用适合 GFP 的滤光片进行荧光成像。 |
| 参考文献 |
| 分子式 |
C12H7F5N2O2
|
|---|---|
| 分子量 |
306.188200235367
|
| 精确质量 |
306.04
|
| CAS号 |
1539318-40-5
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| 相关CAS号 |
DFHBI-1T;1539318-36-9
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| PubChem CID |
129080921
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| LogP |
2.5
|
| tPSA |
52.9
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
1
|
| 重原子数目 |
21
|
| 分子复杂度/Complexity |
490
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
C1(C(F)(F)F)=N/C(=C\C2=CC(F)=C(O)C(F)=C2)/C(=O)N1C
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| InChi Key |
CGFZNPPTJGGWPN-YWEYNIOJSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C12H7F5N2O2/c1-19-10(21)8(18-11(19)12(15,16)17)4-5-2-6(13)9(20)7(14)3-5/h2-4,20H,1H3/b8-4-
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| 化学名 |
(5Z)-5-[(3,5-difluoro-4-hydroxyphenyl)methylidene]-3-methyl-2-(trifluoromethyl)imidazol-4-one
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| 别名 |
DFHBI-2T; DFHBI 2T; 1539318-40-5; (5Z)-5-[(3,5-difluoro-4-hydroxyphenyl)methylidene]-3-methyl-2-(trifluoromethyl)imidazol-4-one; SCHEMBL18797644; CGFZNPPTJGGWPN-YWEYNIOJSA-N;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~100 mg/mL (326.6 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.2659 mL | 16.3297 mL | 32.6595 mL | |
| 5 mM | 0.6532 mL | 3.2659 mL | 6.5319 mL | |
| 10 mM | 0.3266 mL | 1.6330 mL | 3.2659 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Hydroxystilbamidine diisethionate
MeCY5-NHS ester
6-TAMRA free acid
7-tert-Butylfascaplysin
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