| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 100mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| 1g |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
EN450 targets NF-κB (nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells), a family of transcription factors that play a central role in immune responses, inflammation, and cell survival. Specifically, EN450 is a cysteine-reactive covalent molecular glue that binds to the allosteric cysteine residue C111 in the E2 ubiquitin-conjugating enzyme UBE2D. This binding induces a ternary complex between UBE2D and NFKB1 (the p105/p50 subunit of NF-κB), leading to ubiquitination and proteasomal degradation of NF-κB1.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，EN450（50 µM；24 小时）显著抑制 HAP1 白血病细胞和 HEK293T 细胞的增殖，并显著降低致癌转录因子 NF-κB1 的 p105 和 p50 亚基的水平。在完整的 CUL4A/RBX1/NEDD8 复合物存在的情况下，EN450（50 µM；1 小时）增强了 UBE2D1 介导的 NF-κB1 泛素化。EN450 的抗增殖作用是通过 Cullin E3 连接酶和蛋白酶体依赖性机制实现的。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
EN450 的体内活性已在临床前模型中得到证实，其作用机制涉及通过共价分子胶相互作用靶向降解 NF-κB。该化合物可干扰 NF-κB 信号通路，而 NF-κB 信号通路在癌细胞存活、炎症和免疫调节中发挥着关键作用。尽管公开资料中关于 EN450 体内疗效的详细数据有限，但它仍是一种研究 NF-κB 依赖性病理（尤其是白血病和其他癌症）的极具前景的工具。
|
| 酶活实验 |
EN450的体外酶/受体结合试验通常包括结合研究，以评估其与UBE2D和NFKB1的相互作用。表面等离子共振（SPR）或等温滴定量热法（ITC）可用于测量EN450与UBE2D E2泛素连接酶之间的结合亲和力。通过质谱分析或使用半胱氨酸反应性探针置换试验可以确认EN450与半胱氨酸残基C111的共价结合。在EN450存在下，UBE2D和NFKB1之间三元复合物的形成可以通过免疫共沉淀或下拉试验进行评估。
|
| 细胞实验 |
EN450 的体外细胞实验采用 HAP1 白血病细胞或 HEK293T 细胞进行。将细胞接种于多孔板中，并用 50 µM 的 EN450 处理 24 小时。使用 CellTiter-Glo 或 MTT 等标准细胞活力检测方法评估细胞增殖。在机制研究中，用 EN450 (50 µM; 1 h) 处理细胞，并通过免疫沉淀和蛋白质印迹法分析 NF-κB1 的泛素化。处理 24 小时后，通过蛋白质印迹法检测 NF-κB1 p105 和 p50 亚基的蛋白水平。
|
| 动物实验 |
EN450 的体内动物研究通常采用白血病或其他 NF-κB 依赖性癌症的小鼠异种移植模型。荷瘤小鼠通过灌胃或腹腔注射给予 EN450，剂量根据药代动力学研究确定。随时间推移测量肿瘤体积，并在研究结束时收集肿瘤组织，通过蛋白质印迹法和免疫组织化学分析 NF-κB 的降解情况。EN450 体内研究的详细方案尚未广泛发表，但分子胶降解剂的标准方法同样适用。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
EN450的药代动力学特性具有小分子胶类降解剂的典型特征。它在DMSO中的溶解度为100 mg/mL (346.31 mM)，并已配制成用于体内给药的载体，例如10% DMSO/40% PEG300/5% Tween-80/45%生理盐水或10% DMSO/90%玉米油。作为一种共价结合剂，其药代动力学可能受到靶点结合和脱靶反应的影响。包括生物利用度、半衰期和组织分布在内的详细药代动力学参数需要进一步表征。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
EN450 的毒性特征主要来源于体外细胞实验。在 50 µM 浓度下，EN450 可显著抑制 HAP1 和 HEK293T 细胞的增殖，表明其在高浓度下可能具有细胞毒性。作为一种共价分子胶降解剂，EN450 与其他含半胱氨酸蛋白发生脱靶反应在理论上值得关注。目前尚无公开的完整毒理学数据，该化合物仅供研究使用。标准的安全性评估应包括细胞毒性筛选、hERG 通道抑制试验和体内耐受性研究。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
EN450是一种研究化合物，尚未获准用于临床。它是一种半胱氨酸反应性共价分子胶降解剂，通过与UBE2D E2泛素连接酶相互作用靶向NF-κB。该化合物在HAP1白血病细胞和HEK293T细胞中均显示出抗增殖作用，其作用机制依赖于Cullin E3连接酶和蛋白酶体。EN450是研究转录因子靶向蛋白降解的有效工具，在癌症研究中具有潜在的应用价值。
|
| 分子式 |
C11H13CLN2O3S
|
|---|---|
| 分子量 |
288.750520467758
|
| 精确质量 |
288.03
|
| 元素分析 |
C, 45.76; H, 4.54; Cl, 12.28; N, 9.70; O, 16.62; S, 11.10
|
| CAS号 |
793719-01-4
|
| PubChem CID |
4877041
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
1.3
|
| tPSA |
74.9
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
18
|
| 分子复杂度/Complexity |
417
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
ClC1C=CC(=CC=1NC(C=C)=O)S(N(C)C)(=O)=O
|
| InChi Key |
OXFXDOLAQBMOPH-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C11H13ClN2O3S/c1-4-11(15)13-10-7-8(5-6-9(10)12)18(16,17)14(2)3/h4-7H,1H2,2-3H3,(H,13,15)
|
| 化学名 |
N-(2-chloro-5-(N,N-dimethylsulfamoyl)phenyl)acrylamide
|
| 别名 |
EN450; EN-450; EN 450; starbld0003560; GTPL12636
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.4632 mL | 17.3160 mL | 34.6320 mL | |
| 5 mM | 0.6926 mL | 3.4632 mL | 6.9264 mL | |
| 10 mM | 0.3463 mL | 1.7316 mL | 3.4632 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
