Lacto-N-neotetraose (LNnT)

别名: 乳糖-N-四糖;乳-N-新四糖;乳-N-新四糖(2型链);乳糖-N-新四糖
目录号: V51883 纯度: ≥98%
乳-N-新四糖 (LNnT) 是一种内源性产生的代谢物。
Lacto-N-neotetraose (LNnT) CAS号: 13007-32-4
产品类别: Apoptosis
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
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产品描述
乳糖-N-新四糖 (LNnT) 是一种内源性代谢产物。乳糖-N-新四糖可抑制未成熟上皮细胞中 TNF-α 诱导的 IL-8 分泌。乳糖-N-新四糖具有抗炎作用,并可能促进伤口愈合。
乳糖-N-新四糖 (LNnT; CAS 13007-32-4) 是一种存在于人乳中的人乳低聚糖 (HMO)。它是一种由葡萄糖、半乳糖和 N-乙酰氨基葡萄糖组成的四糖。LNnT 是一种内源性代谢产物,可抑制未成熟上皮细胞中 TNF-α 诱导的 IL-8 分泌,具有抗炎活性,并能促进伤口闭合。其分子式为 C26H45NO21,分子量为 707.63 g/mol。
生物活性&实验参考方法
靶点
Endogenous Metabolite[1], TNFR1[2].
Lacto-N-neotetraose targets inflammatory pathways in epithelial cells. It inhibits TNF-α induced IL-8 secretion in immature epithelial cells, demonstrating anti-inflammatory activity. LNnT also aids in wound healing. As a human milk oligosaccharide, it plays a role in modulating the infant gut microbiome and immune development. Oral supplementation of LNnT is used in infant formula to mimic the beneficial effects of breast milk.
体外研究 (In Vitro)
T84细胞暴露于5 mg/mL乳糖-N-新四糖24小时后会分泌IL-8[2]。在FHs 74 Int细胞中,乳糖-N-新四糖(5 mg/mL,24 h)可使TNF-α诱导的IL-8分泌减少38%[2]。乳糖-N-新四糖与肿瘤坏死因子受体1 (TNFR1) 的解离常数(Kd)为900 ± 660 nM[2]。乳糖-N-新四糖(5 mg/mL,24 h)通过使TNFR1胞外结构域脱落,从而减轻TNF-α在FHs 74 Int细胞中引起的炎症[2]。体外实验表明,乳糖-N-新四糖可抑制TNF-α诱导的未成熟上皮细胞IL-8分泌。它具有抗炎活性,并能促进伤口愈合。作为一种内源性代谢产物,LNnT 可调节上皮细胞的炎症反应。这些体外活性支持其在炎症、伤口愈合和上皮细胞生物学研究中的应用。
体内研究 (In Vivo)
在肺炎兔的肺部,乳糖-N-新四糖(100 μM,气管内给药24小时)可降低肺炎链球菌的数量[3]。术后第七天,皮内注射100/200 μg乳糖-N-新四糖可促进伤口愈合[4]。乳糖-N-新四糖的体内数据来源于其作为膳食补充剂的研究。口服补充乳糖-N-新四糖已被研究其对婴儿肠道菌群和免疫发育的影响。它具有抗炎作用并有助于伤口愈合。然而,目前文献中尚未详细列出已发表的动物模型体内疗效研究。乳糖-N-新四糖主要用作研究人乳寡糖及其生物学功能的工具。
酶活实验
乳糖-N-新四糖(LNnT)的体外抗炎活性测定在未成熟的上皮细胞中进行。细胞在有或无不同浓度LNnT的情况下用TNF-α处理,并通过ELISA检测IL-8的分泌。伤口愈合实验采用划痕法在单层上皮细胞中进行,在LNnT存在的情况下测量伤口愈合速率。细胞活力采用标准方法进行评估。
细胞实验
在未成熟的上皮细胞中进行乳糖-N-新四糖(LNnT)的细胞学检测。用不同浓度的LNnT处理细胞,并通过ELISA或qPCR检测IL-8和其他细胞因子的水平来评估炎症反应。采用划痕实验评估伤口愈合情况,测量伤口愈合速度随时间的变化。使用MTT等标准检测方法测量细胞增殖和活力。
动物实验
动物/疾病模型: 兔肺炎模型[3]
剂量: 100 μM
给药途径: 气管内给药,持续 24 小时
实验结果: 攻击后 48 小时,肺部细菌载量减少了约 2 个对数级。消除了对照组动物在 48 小时时可见的广泛的右肺中叶水肿病变。

动物/疾病模型: 对称性全层皮肤创伤小鼠
剂量: 100、200 μg
给药途径: 皮内注射,分别于术后第 3、7、14 和 21 天给药。
实验结果:显示更好的愈合评分、毛囊形成和更低的表皮厚度指数(H&E染色)。
乳糖-N-新四糖(LNnT)的体内研究是在动物模型或临床研究中进行的,评估口服补充剂的效果。LNnT作为膳食补充剂口服给药。通过测量炎症标志物、肠道微生物群组成和免疫功能来评估其疗效。伤口愈合情况可在伤口模型中进行评估。然而,现有文献中并未详细描述LNnT的具体体内研究方案。该化合物目前仅用作研究工具。
药代性质 (ADME/PK)
公开资料中关于乳糖-N-新四糖的药代动力学数据报道较少。该化合物的分子量为707.63 g/mol,分子式为C26H45NO21,CAS号为13007-32-4。作为一种寡糖,其口服生物利用度预计有限,但可被肠道菌群代谢。目前文献中尚无关于该化合物的详细药代动力学参数,例如半衰期。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
公开资料中关于乳糖-N-新四糖(LNnT)的毒性数据有限。作为一种人乳低聚糖,它通常被认为对人体食用安全。然而,与所有研究化合物一样,LNnT 仅供研究用途,不得用于人体治疗。要进行全面的毒性评估,需要进行标准的体外细胞毒性试验和体内耐受性研究。
参考文献

[1]. CRISPRi-Guided Multiplexed Fine-Tuning of Metabolic Flux for Enhanced Lacto- N-neotetraose Production in Bacillus subtilis. J Agric Food Chem. 2020 Feb 26;68(8):2477-2484.

[2]. The Human Milk Oligosaccharides 3-FL, Lacto-N-Neotetraose, and LDFT Attenuate Tumor Necrosis Factor-α Induced Inflammation in Fetal Intestinal Epithelial Cells In Vitro through Shedding or Interacting with Tumor Necrosis Factor Rece.

[3]. Oligosaccharides interfere with the establishment and progression of experimental pneumococcal pneumonia. J Infect Dis. 1997 Sep;176(3):704-12.

[4]. The in vivo effect of Lacto-N-neotetraose (LNnT) on the expression of type 2 immune response involved genes in the wound healing process. Sci Rep. 2020 Jan 22;10(1):997.

其他信息
乳糖-N-新四糖(LNnT;CAS 13007-32-4)是一种人乳低聚糖,由葡萄糖、半乳糖和N-乙酰氨基葡萄糖组成。它能抑制TNF-α诱导的IL-8分泌,具有抗炎活性,并能促进伤口愈合。LNnT的分子式为C26H45NO21,分子量为707.63 g/mol。它被用于炎症、伤口愈合和人乳低聚糖的研究。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C26H45NO21
分子量
707.63
精确质量
707.248
CAS号
13007-32-4
PubChem CID
121853
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.72g/cm3
沸点
1173.6ºC at 760mmHg
闪点
663.6ºC
蒸汽压
0mmHg at 25°C
折射率
1.668
tPSA
356.7
氢键供体(HBD)数目
14
氢键受体(HBA)数目
21
可旋转键数目(RBC)
15
重原子数目
48
分子复杂度/Complexity
1010
定义原子立体中心数目
19
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O : 125 mg/mL (176.65 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.4132 mL 7.0658 mL 14.1317 mL
5 mM 0.2826 mL 1.4132 mL 2.8263 mL
10 mM 0.1413 mL 0.7066 mL 1.4132 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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