目的：免疫抑制剂霉酚酸酯（MMF）诱导的核苷酸耗竭已被证明具有神经保护作用。目前尚不清楚核苷酸耗竭是直接抵消神经元死亡，还是抑制小胶质细胞或星形胶质细胞的激活，从而产生间接的神经保护作用。
方法：通过免疫细胞化学、定量形态计量学和elisa分析MMF对分离的小胶质细胞、星形胶质细胞/小胶质细胞共培养物和分离的海马神经元的影响。
结果：我们发现：（i）MMF抑制脂多糖诱导的小胶质细胞分泌白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α和一氧化氮；（ii）MMF抑制脂多糖诱导的星形胶质细胞产生肿瘤坏死因子-α，但不抑制一氧化氮；（iii）MMF强烈抑制小胶质细胞和星形胶质细胞的增殖；（iv）MMF不能保护分离的海马神经元免受兴奋性毒性损伤；（v）鸟苷处理后，MMF对神经胶质细胞的作用被逆转。
结论：MMF诱导的核苷酸耗竭抑制了小胶质细胞和星形胶质细胞的活化。MMF诱导的补救途径酶肌苷单磷酸脱氢酶的抑制抑制了小胶质细胞和星形胶质细胞的增殖。先前观察到的MMF治疗后的神经保护作用似乎是间接介导的，使该化合物成为治疗急性中枢神经系统病变的一种有趣的免疫抑制剂[2]。

背景：T淋巴细胞诱导成纤维细胞转化为肌成纤维细胞，这是纤维形成的主要介质。肌苷5'-单磷酸脱氢酶抑制剂霉酚酸酯（MMF）和抗CD25单克隆抗体达利珠单抗（DCZ）已被报道可抑制T淋巴细胞的增殖。
目的：评价MMF和DCZ对博莱霉素（BLM）诱导的硬皮病早期的预防作用。
方法：本研究涉及五组Balb/c小鼠（每组n=10）。其中四组小鼠皮下注射BLM[100μg/天，溶于100μL磷酸盐缓冲盐水（PBS）]4周；其余（对照组）仅接受100μL PBS。三个BLM治疗组也接受了腹腔注射MMF50或150mg/kg/天，或SC DCZ 100μg/周。在第四周结束时，杀死所有小鼠，并采集血液和组织样本进行进一步分析。
结果：在BLM治疗组中，炎症细胞浸润、α-平滑肌肌动蛋白阳性（α-SMA+）成纤维细胞计数、组织羟脯氨酸含量和皮肤厚度均有所增加。皮肤纤维化在组织病理学上表现突出。在BLM治疗的小鼠中，也给予MMF或DCZ，炎症细胞浸润、组织羟脯氨酸含量和皮肤厚度降低。在MMF组中，α-SMA+成纤维细胞计数也有所下降。
结论：在BLM诱导的皮肤纤维化模型中，MMF和DCZ治疗可预防皮肤纤维化的发展。需要进一步的研究来评估靶向T淋巴细胞是否能有效解决人类硬皮病中预先存在的纤维化。[3]

小胶质细胞和星形胶质细胞凋亡和增殖分析[2]
用Mycophenolate Mofetil/MMF处理或在培养基中孵育的小胶质细胞或星形胶质细胞用于确定Mycophenolate Mofetil/MMF可能的毒性浓度范围。通过活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的免疫细胞化学显示凋亡细胞。在星形胶质细胞/小胶质细胞共培养中对小胶质细胞进行增殖研究，因为只有在星形胶质胶质细胞存在的情况下才能获得显著的小胶质细胞增殖。单独用LPS或巨噬细胞集落刺激因子刺激分离的小胶质细胞没有诱导显著的增殖活性（数据未显示）。分析小胶质细胞增殖的溴脱氧尿苷（BrdU；0.01 mM）加入培养基中16 h固定前。 胎牛血清（1-10%）或促肾上腺皮质激素释放因子（CRF，10 µM）用于48 h用于刺激分离的星形胶质细胞培养物中的增殖，并加入BrdU（0.01 mM）16 h固定前。增殖指数计算为增殖细胞占细胞总数的百分比。

动物和实验方案[3]
本实验采用50只6周龄、体重20-25克的SPF级雌性Balb/c小鼠。剃除小鼠下背部特定区域的毛发，用于皮下注射。对照组小鼠每天在剃毛后的背部皮肤皮下注射100 μL磷酸盐缓冲液（PBS）。为诱导真皮纤维化，其余四组小鼠在剃毛后的背部皮肤皮下注射100 μg博来霉素（BLM），该溶液溶于100 μL PBS中，并经0.2 μm滤膜过滤除菌。其中两组接受 BLM 治疗的小鼠分别腹腔注射 50 或 150 mg/kg/天的 MMF，分别溶于 100 μL 和 300 μL 含有 0.4% Tween 80 和 0.9% 苯甲醇的生理盐水中；第三组接受 BLM 治疗的小鼠每周皮下注射一次 DCZ 100 μg (100 μL)。

吸收、分布和排泄
吗替麦考酚酯在小肠内迅速吸收。口服后60至90分钟，其活性代谢物麦考酚酯（MPA）的血药浓度达到峰值。一项对12名健康受试者进行的药代动力学研究表明，口服吗替麦考酚酯的平均生物利用度为94%。在健康志愿者中，吗替麦考酚酯的血药浓度峰值（Cmax）为24.5 (±9.5) μg/mL。肾移植患者移植后5天，Cmax为12.0 (±3.82) μg/mL，移植后3个月增至24.1 (±12.1) μg/mL。健康志愿者单次给药后的AUC值为63.9 (±16.2) μg•h/mL，肾移植后5天和3个月的AUC值分别为40.8 (±11.4) μg•h/mL和65.3 (±35.4) μg•h/mL。食物不影响吗替麦考酚酯的吸收。少量药物以MPA的形式经尿液排出（不足1%）。一项药代动力学研究表明，口服吗替麦考酚酯后，93%经尿液排出，6%经粪便排出。大约 87% 的给药剂量以无活性代谢物 MPAG 的形式经尿液排出。
吗替麦考酚酯的分布容积为 3.6 (±1.5) 至 4.0 (±1.2) L/kg。
口服吗替麦考酚酯的血浆清除率为 193 mL/min，静脉注射后为 177 (±31) mL/min。
口服后吸收迅速且广泛。
在 12 名健康志愿者中，口服吗替麦考酚酯相对于静脉注射吗替麦考酚酯的平均绝对生物利用度（基于 MPA AUC）为 94%。在接受多次吗替麦考酚酯治疗的肾移植患者中，MPA 的血浆浓度-时间曲线下面积 (AUC) 似乎呈剂量比例增加，每日剂量最高可达 3 g。
蛋白结合：与血浆白蛋白的结合率高（在肾移植稳定期患者通常观察到的浓度范围内，MPA 与血浆白蛋白的结合率为 97%）。当麦考酚酸葡萄糖醛酸苷 (MPAG) 浓度较高时（例如，在肾功能受损或移植肾功能延迟恢复的患者中），由于 MPA 和 MPAG 竞争结合位点，MPA 的结合率可能会降低。
在 12 名健康志愿者中，静脉注射和口服 MPA 后，MPA 的平均（±标准差）表观分布容积分别约为 3.6 (±1.5) 和 4.0 (±1.2) L/kg。在临床相关浓度下，MPA 与血浆白蛋白的结合率为 97%。在肾移植稳定期患者通常观察到的MPAG浓度范围内，MPAG与血浆白蛋白的结合率为82%；然而，在较高的MPAG浓度下（见于肾功能受损或肾移植功能延迟恢复的患者），由于MPAG与MPA竞争蛋白结合位点，MPA的结合率可能会降低。平均血血浆放射性浓度比约为0.6，表明MPA和MPAG不会广泛分布到血液的细胞成分中。
有关霉酚酸酯（共9种）的更多吸收、分布和排泄（完整）数据，请访问HSDB记录页面。

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代谢/代谢物
口服和静脉注射后，霉酚酸酯均经肝羧酸酯酶1和2完全代谢为活性母体药物霉酚酸（MPA）。随后，它经葡萄糖醛酸转移酶代谢，生成无活性的MPA酚葡萄糖醛酸苷（MPAG）。该葡萄糖醛酸苷代谢物非常重要，因为它随后通过肠肝循环转化为MPA。未在肠道代谢的吗替麦考酚酯（MMF）经门静脉进入肝脏，并在肝细胞内转化为具有药理活性的MPA。N-(2-羧甲基)-吗啉、N-(2-羟乙基)-吗啉及其N-氧化物部分是MMF在肠道中经肝羧酸酯酶2活性代谢产生的其他代谢产物。肝脏中的UGT1A9和UGT2B7是MPA代谢的主要酶，此外还有其他UGT酶参与MPA的代谢。霉酚酸 (MPA) 的四种主要代谢产物是：7-O-MPA-β-葡糖醛酸苷 (MPAG，无活性)、由尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶 (UGT) 产生的 MPA 酰基葡糖醛酸苷 (AcMPAG)、由 UGT 产生的 7-O-MPA 葡萄糖苷，以及少量由 CYP3A4/5 和 CYP2C8 酶产生的 6-O-去甲基-MPA (DM-MPA)。
口服和静脉注射后，霉酚酸酯完全代谢为活性代谢产物 MPA（霉酚酸）。口服给药后，MPA 的代谢发生在首过阶段。MPA 主要通过葡糖醛酸转移酶代谢，生成无药理活性的 MPA 酚葡糖醛酸苷 (MPAG)。在体内，MPAG 通过肠肝循环转化为 MPA。健康受试者口服吗替麦考酚酯后，尿液中还可检测到以下2-羟乙基吗啉部分的代谢产物：N-(2-羧甲基)-吗啉、N-(2-羟乙基)-吗啉和N-(2-羟乙基)-吗啉的N-氧化物。

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生物半衰期
吗替麦考酚酯口服后的平均表观半衰期为17.9 (±6.5) 小时，静脉给药后为16.6 (±5.8) 小时。
麦考酚酸 (MPA)：平均表观半衰期：口服后约17.9小时，静脉给药后约16.6小时。
MPA口服后的平均（±SD）表观半衰期和血浆清除率分别为17.9 (±6.5) 小时和193 (±48) mL/min。静脉给药后，其吸收时间为 16.6 (±5.8) 小时，流速为 177 (±31) mL/min。

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药代动力学特性[2]
吗替麦考酚酯口服后吸收良好，并迅速转化为活性代谢物麦考酚酸。血浆浓度-时间曲线下面积 (AUC) 通常与剂量成正比；然而，不同患者的 AUC 值存在一定差异。肾移植稳定期患者（移植后 >3 个月）的麦考酚酸 AUC 和血浆峰浓度 (Cmax) 比移植后早期患者高约 50%。
麦考酚酸主要以麦考酚酸葡萄糖醛酸苷的形式经尿液排泄（约 87%）；6% 经粪便排泄。口服后，霉酚酸的平均表观半衰期和血浆清除率分别为 17.9 小时和 11.6 L/h。
单次给药后，肾功能不全患者的霉酚酸及其葡萄糖醛酸苷代谢物的 AUC 高于肾功能正常患者。然而，单次给药后，霉酚酸酯的药代动力学在肝硬化患者中未发生改变。儿童数据有限，但霉酚酸的 AUC 和 Cmax 似乎随年龄增长而升高。

蛋白结合
霉酚酸（霉酚酸酯的代谢产物）的蛋白结合率为97%，主要与白蛋白结合。其非活性代谢产物MPAG在正常治疗浓度下与血浆白蛋白的结合率为82%。由于肾功能损害等多种原因导致MPAG浓度升高时，由于竞争性结合，MPA的蛋白结合率可能会降低。

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霉酚酸酯（霉酚酸的吗啉乙酯）通过抑制肌苷单磷酸脱氢酶来抑制嘌呤从头合成。其选择性淋巴细胞抗增殖作用涉及T细胞和B细胞，可阻止抗体的形成。霉酚酸酯单独使用具有免疫抑制作用，但最常与其他免疫抑制剂联合使用。吗替麦考酚酯联合环孢素和糖皮质激素已在涉及近1500例肾移植受者的大型随机临床试验中进行了研究。这些试验表明，与安慰剂或硫唑嘌呤相比，吗替麦考酚酯在降低治疗失败率和急性排斥反应发生率方面显著更有效。此外，吗替麦考酚酯可能有助于降低慢性排斥反应的发生率。吗替麦考酚酯的耐受性相对较好。最常见的不良反应是胃肠道不耐受；也观察到血液学异常。吗替麦考酚酯的可逆性细胞抑制作用允许调整剂量或停药，从而避免严重毒性或免疫系统过度抑制。巨细胞病毒组织侵袭性疾病和恶性肿瘤的发生是需要通过长期随访研究进行评估的问题。
吗替麦考酚酯不会引起其他市售免疫抑制剂常见的副作用，例如肾毒性、肝毒性、高血压、神经系统紊乱、电解质紊乱、皮肤疾病、高血糖、高尿酸血症、高胆固醇血症、血脂异常和骨结构丢失。
根据初步信息，吗替麦考酚酯用于预防尸体肾移植排斥反应的获益风险比已证实为正值。其他类型器官移植的研究数据令人鼓舞，但数量有限，尚不足以得出明确结论。需要进行长期随访研究来证实这些观察结果。尽管吗替麦考酚酯价格昂贵，但其在降低排斥反应、治疗失败率及相关费用方面的益处表明，它很可能具有成本效益。[1]

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耐受性[2]
吗替麦考酚酯相关的不良事件发生率似乎与剂量相关：2 g/天的耐受性通常优于 3 g/天。最常见的不良事件包括胃肠道不良事件（腹泻、呕吐）、血液和淋巴系统不良事件（白细胞减少症、贫血）以及感染性不良事件（脓毒症、机会性感染）。与接受硫唑嘌呤治疗的患者相比，接受吗替麦考酚酯治疗的患者腹泻和脓毒症（最常见的是巨细胞病毒血症）的发生率略高。与硫唑嘌呤治疗相比，接受 3 g/天吗替麦考酚酯治疗的患者中出现白细胞减少症的比例也有所增加。吗替麦考酚酯相关的恶性肿瘤总体风险与硫唑嘌呤相似。

[1]. Effect of the inosine 5'-monophosphate dehydrogenase inhibitor BMS-566419 on rat cardiac allograft rejection. Int Immunopharmacol, 2010. 10(1): p. 91-7.

[2]. Inhibition of microglial and astrocytic inflammatory responses by the immunosuppressant mycophenolate mofetil. Neuropathol Appl Neurobiol, 2010. 36(7): p. 598-611.

[3]. Mycophenolate mofetil and daclizumab targeting T lymphocytes in bleomycin-induced experimental scleroderma. Clin Exp Dermatol, 2012. 37(1): p. 48-54.

霉酚酸是一种源自匍匐青霉及其近缘种的化合物。它通过抑制肌苷单磷酸脱氢酶（IMP脱氢酶）来阻断嘌呤核苷酸的从头合成。霉酚酸对免疫系统具有选择性作用，可抑制T细胞和淋巴细胞的增殖以及B细胞产生抗体。它还可能抑制白细胞向炎症部位的募集。
另见：霉酚酸（具有活性部分）；霉酚酸酯（其盐形式）。

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总之，我们的结果表明，霉酚酸酯：(i)抑制小胶质细胞分泌TNF-α、IL-1β和NO；(ii)抑制星形胶质细胞分泌TNF-α；(iii)抑制小胶质细胞和星形胶质细胞的增殖； (iv) 对培养的、兴奋性毒性损伤的海马神经元没有直接的神经保护作用；(v) 通过抑制胶质细胞 IMPDH 发挥作用。鉴于 MMF 在多种中枢神经系统疾病中的应用已取得令人鼓舞的动物实验和开放标签临床试验结果，MMF 似乎有望成为进一步研究急性脑和脊髓疾病治疗的候选药物。[2]MMF 和 DCZ 均靶向 T 淋巴细胞，可抑制炎症活动，从而预防博来霉素 (BLM) 诱导的小鼠硬皮病模型早期皮肤纤维化的发展。然而，MMF 在抑制成纤维细胞活化方面比 DCZ 更有效，且具有更显著的抗纤维化作用。这些结果支持以下假设：T 淋巴细胞在硬皮病的发病机制中发挥重要作用，并且在疾病早期阶段抑制 T 淋巴细胞可能是治疗人类硬皮病的有效策略。然而，单独针对 T 淋巴细胞可能不是治疗硬皮病的充分方法。[3]

C23H32CLNO7

469.96

469.187

C, 58.78; H, 6.86; Cl, 7.54; N, 2.98; O, 23.83

116680-01-4

Mycophenolate Mofetil;128794-94-5

6441022

White to off-white solid powder

1.222g/cm3

637.6ºC at 760mmHg

339.4ºC

7.51E-17mmHg at 25°C

1.557

3.263

94.53

2

8

10

32

646

0

O=C(OCCN1CCOCC1)CC/C(C)=C/CC2=C(O)C3=C(COC3=O)C(C)=C2OC.[H]Cl

OWLCGJBUTJXNOF-HDNKIUSMSA-N

InChI=1S/C23H31NO7.ClH/c1-15(5-7-19(25)30-13-10-24-8-11-29-12-9-24)4-6-17-21(26)20-18(14-31-23(20)27)16(2)22(17)28-3;/h4,26H,5-14H2,1-3H3;1H/b15-4+;

2-morpholin-4-ylethyl (E)-6-(4-hydroxy-6-methoxy-7-methyl-3-oxo-1H-2-benzofuran-5-yl)-4-methylhex-4-enoate;hydrochloride

Mycophenolate mofetil hydrochloride; 116680-01-4; Mycophenolate mofetil HCl; UNII-UXH81S8ZVB; UXH81S8ZVB; RS 61443-190; 2-(4-Morpholinyl)ethyl ester (E)-6-(1,3-dihydro-4-hydroxy-6-methoxy-7-methyl-3-oxo-5-isobenzofuranyl)-4-methyl-4-hexenoic acid, hydrochloride; 2-Morpholinoethyl (E)-6-(4-hydroxy-6-methoxy-7-methyl-3-oxo-5-phthalanyl)-4-methyl-4-hexenoate hydrochloride;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。