| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
G9a 23-27 nM (IC50)
RK-701 primarily targets the histone methyltransferases G9a (EHMT2) and GLP (EHMT1), with IC50 values of 23‑27 nM for G9a and 53 nM for GLP. It acts as a reversible, substrate‑competitive inhibitor that competes with the histone H3 substrate at the enzyme active site. Additionally, it inhibits the transcriptional repressors BCL11A and ZBTB7A, which are crucial in fetal hemoglobin regulation. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
RK-701（0.01-3 µM；4 天）可上调 HbF 和 γ-珠蛋白 mRNA 的表达水平，且不影响细胞活力或红系分化。RK-701 以浓度依赖的方式提高表达 HbF 的细胞比例。RK-701 还选择性地提高 HUDEP-2 细胞和人原代 CD34+ 细胞中 BGLT3 的表达水平，并降低 β-珠蛋白中 H3K9me2 的百分比 [1]。在缺乏 BCL11A 或 ZBTB7A 的情况下，RK-701（1 µM；4 天）不能提高 HUDEP-2 细胞中 BGLT3 的表达，并显著降低 BGLT3 中 BCL11A 和 ZBTB7A 的比例 [1]。
体外实验表明，RK-701（0.01-3 uM；4天）可上调HbF和γ-珠蛋白mRNA水平，且不影响细胞活力或红系分化，并以浓度依赖的方式增加表达HbF的细胞数量。在HUDEP-2细胞和人原代CD34+细胞中，RK-701选择性上调BGLT3，并降低β-珠蛋白基因座的H3K9me2水平。浓度为1 uM时，RK-701可降低BCL11A和ZBTB7A的比例。此外，RK-701还表现出对MOLT-4细胞肿瘤生长的抑制作用。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
RK-701 选择性地增强小鼠胚胎 ε 珠蛋白，并显著下调外周血细胞中 H3K9me2 的表达水平（20 mg/kg 和 50 mg/kg；腹腔注射；5 周，每周连续 5 天）。RK-701 的危害性不大 [1]。
体内实验表明，RK-701（20 mg/kg 和 50 mg/kg；腹腔注射；连续 5 周，每周 5 天）可选择性地增加小鼠胚胎 ε-珠蛋白的表达，并显著下调外周血细胞中 H3K9me2 的表达。其低毒性特征支持其在动物研究中的应用。虽然尚未报道其在小鼠体内的肿瘤异种移植疗效，但体内实验已证实其靶点结合。 |
| 酶活实验 |
对于底物竞争性酶活性测定：将重组人G9a（全长或催化结构域）与3H-SAM和肽底物（组蛋白H3）在含有不同浓度RK-701（0.1-1000 nM）的测定缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 8.5，10 mM MgCl2，5 mM DTT）中孵育1-2小时。将反应混合物点样至P81滤膜上，洗涤后测量放射性。或者，使用基于荧光或质谱的测定方法来监测H3K9甲基化。
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| 细胞实验 |
细胞活力检测[1]
细胞类型： HUDEP-2 细胞和 CD34+ 衍生细胞。 测试浓度： 0.01、0.03、0.1、0.3、1 和 3 µM。 孵育时间： 4 天。 实验结果： 证实 HbF、γ-珠蛋白和 BGLT3 被激活。 细胞活力检测[1] 细胞类型： HUDEP-2 细胞。 测试浓度： 1 µM。 孵育时间： 4 天。 实验结果： 证实 BCL11A 和 ZBTB7A 被抑制。 对于基于细胞的HbF表达检测：在扩增培养基中培养HUDEP-2细胞或人原代CD34+来源的红系细胞。用RK-701（0.01、0.03、0.1、0.3、1和3 μM）处理细胞4天。收集细胞用于RNA提取和HbF及γ-珠蛋白mRNA的qRT-PCR检测。对于蛋白质分析，固定并透化细胞，用抗HbF抗体染色，并通过流式细胞术进行分析。同时进行细胞活力检测（例如台盼蓝或MTT法）以确认无细胞毒性。 |
| 动物实验 |
在小鼠模型中进行体内疗效评估：以20 mg/kg或50 mg/kg的剂量，每周连续5天，连续5周，通过腹腔注射给予C57BL/6小鼠RK-701。在不同时间点采集外周血，用于分析ε-珠蛋白（qRT-PCR）和H3K9me2水平（Western blot）。监测小鼠的体重和一般行为，以评估毒性。目前尚无标准的肿瘤异种移植模型，但腹腔注射可用于药代动力学或药效学研究。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚无RK-701的详细药代动力学数据公开。体外溶解度研究表明，RK-701可溶于DMSO（100 mg/mL，223.94 mM）和乙醇（89 mg/mL），但不溶于水。体内溶解度数据表明，RK-701可配制成注射用混悬液（CMC-Na）或澄清溶液（5% DMSO / 40% PEG300 / 5% Tween-80 / 50% ddH2O）。尚未有口服生物利用度的报道；已发表的研究均采用腹腔注射给药。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
临床前研究表明，RK-701 是一种无基因毒性且低毒性的 G9a 抑制剂。在为期 5 周的小鼠研究中，腹腔注射 20-50 mg/kg 剂量，未观察到明显的毒性。体外实验表明，在 0.01-3 μM 浓度下，RK-701 不影响红系细胞的活力。在这些剂量下，未报告器官毒性、体重减轻或行为改变。尚未对更高剂量进行系统评估。作为一种表观遗传探针，RK-701 仍应谨慎使用。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
RK-701 是一种仅供实验室使用的研究级化合物，不可用于临床治疗。它为浅黄色至黄色固体粉末，应避光储存于 -20℃（粉末可稳定保存 3 年）。它可溶于 DMSO（100 mg/mL）和乙醇，不溶于水。该化合物已被发表（例如，Takase S 等，Nat Commun. 2023;14(1):23；Nishigaya Y 等，J Med Chem. 2023;66(6):4059‑4085）。目前尚无临床试验或已获批准。
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| 分子式 |
C26H30N4O3
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|---|---|
| 分子量 |
446.541406154633
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| 精确质量 |
446.231
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| CAS号 |
2648855-18-7
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| 相关CAS号 |
RK-0133114
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| PubChem CID |
156745798
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
4.1
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| tPSA |
115
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
33
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| 分子复杂度/Complexity |
819
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
N1C2=C(C(=O)CC(C)(C)C2)C(C)=C1C(N[C@H](C(NC1=CC=C(C#N)C=C1)=O)CCC1CC1)=O
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| InChi Key |
OWORSODZTADOQX-IBGZPJMESA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H30N4O3/c1-15-22-20(12-26(2,3)13-21(22)31)29-23(15)25(33)30-19(11-8-16-4-5-16)24(32)28-18-9-6-17(14-27)7-10-18/h6-7,9-10,16,19,29H,4-5,8,11-13H2,1-3H3,(H,28,32)(H,30,33)/t19-/m0/s1
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| 化学名 |
N-[(2S)-1-(4-cyanoanilino)-4-cyclopropyl-1-oxobutan-2-yl]-3,6,6-trimethyl-4-oxo-5,7-dihydro-1H-indole-2-carboxamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2394 mL | 11.1972 mL | 22.3944 mL | |
| 5 mM | 0.4479 mL | 2.2394 mL | 4.4789 mL | |
| 10 mM | 0.2239 mL | 1.1197 mL | 2.2394 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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