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Ulinastatin (Uristatin; Uristatin)

别名: 乌司他丁; 乌司他丁标准品(JP)
目录号: V34700 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
乌司他丁 (Uristatin) 是一种胰蛋白酶和丝氨酸蛋白酶抑制剂。
Ulinastatin (Uristatin; Uristatin) CAS号: 80449-31-6
产品类别: Apoptosis
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
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产品描述
乌利司他汀（Uristatin）是一种胰蛋白酶和丝氨酸蛋白酶抑制剂。乌利司他汀是多种胰蛋白酶、糜蛋白酶和胰腺蛋白酶的主要蛋白结合抑制剂。乌利司他汀具有神经保护、抗炎、抗凋亡和抗氧化作用。
乌利司他汀（UTI）是一种从人尿中分离得到的胰蛋白酶抑制剂，由143个氨基酸组成，相对分子质量约为67 kDa。它是一种广谱水解酶蛋白抑制剂，可以抑制多种酶，例如胰蛋白酶、糜蛋白酶和胰腺蛋白酶。乌利司他汀具有抗炎、抗凋亡、酶活性调节、血液凝固调节和免疫调节作用。临床上，它用于治疗胰腺炎、全身多器官功能障碍综合征、循环衰竭和中毒性休克，并在包括脓毒性肝损伤、肝炎、肝纤维化、伴有肝功能衰竭的自身免疫性肝病以及肝脏缺血再灌注损伤在内的肝脏疾病中显示出治疗潜力[1]。乌司他丁是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂，具有抗炎特性，用于治疗胰腺炎、脓毒症和脓毒性休克。它能调节脂多糖（LPS）诱导的脓毒症，并能预防急性肺损伤（ALI）[2]。
生物活性&实验参考方法
靶点
Toll-like receptor 4 (TLR4) – Ulinastatin attenuates TLR4 expression and downstream NF-κB pathway activation [2].
Myeloid differentiation primary response gene 8 (MyD88) – involved in the TLR4/NF-κB pathway [1].
Nuclear factor kappa-B (NF-κB) – Ulinastatin reduces NF-κB activation [1][2].
Tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), interleukin-6 (IL-6), interleukin-1β (IL-1β), interleukin-2 (IL-2) – Ulinastatin reduces their production/release [1][2].
Bax, Bcl-2, caspase-3 – Ulinastatin up-regulates Bcl-2, down-regulates Bax and caspase-3, reducing the Bax/Bcl-2 ratio [1].
Endogenous proteases (trypsin, chymotrypsin, elastase) – inhibited by Ulinastatin [1].
Heparanase – activity reduced by Ulinastatin [1].
Coagulation factors (thrombin, thrombin-antithrombin complex, P-selectin) – Ulinastatin inhibits excessive thrombin conversion and reduces TAT complex and P-selectin [1].
T regulatory cells (Tregs, CD4+CD25+), CD3+, CD4+, CD8+ lymphocytes – Ulinastatin increases CD3+/CD4+ ratio, decreases CD8+ percentage, and reduces Treg percentage [1].
体外研究 (In Vitro)
在LPS刺激的BEAS-2B细胞中，尿司他丁（500–5000 U；24小时）可显著降低TLR4表达和NF-κB活化[1]。在LPS刺激的人肺上皮BEAS-2B细胞（10 μL，10 μg LPS溶于100 μL PBS）中，LPS刺激前1小时和刺激后6小时分别用尿司他丁（10 μL、50 μL或100 μL，100,000 U溶于2 mL）处理，可显著降低TLR4、p-65和NF-κB的蛋白水平，且呈剂量依赖性，Western blot检测结果显示。中等剂量（50 μL）效果最佳。 乌利司他汀 还显著降低了培养基中促炎细胞因子 IL-2、TNF-α、IL-1β 和 IL-6 的分泌，该结果通过 ELISA 检测得出 [2]。
在转染 pPICZA-TLR4 质粒以过表达 TLR4 的 BEAS-2B 细胞中，乌利司他汀 (50 μL) 对 LPS 诱导的炎症反应的保护作用被消除：TLR4 mRNA 和蛋白水平、p-65 和 NF-κB 蛋白水平以及细胞因子水平（IL-2、TNF-α、IL-1β、IL-6）不再受到 乌利司他汀 的抑制 [2]。
乌利司他汀 上调 Bcl-2 并下调 Bax，导致 Bax/Bcl-2 比值降低，细胞色素 c 释放减少，在多种模型中，乌司他丁可降低 caspase-3 的激活和细胞凋亡反应[1]。
乌司他丁 可抑制内源性蛋白酶（胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶），并增加中性蛋白酶的活性，从而增强胶原酶的活性[1]。
乌司他丁 可减少 ARDS 模型中的内皮糖萼破坏、硫酸乙酰肝素生成和肝素酶活性[1]。
乌司他丁 可减少凝血酶-抗凝血酶 (TAT) 复合物和 P-选择素，从而抑制血液凝固[1]。
乌司他丁 可增加 CD3+ 和 CD4+ 淋巴细胞的比例，并减少 CD8+ 淋巴细胞，从而增加 CD4+/CD8+ 比值，同时降低 CD4+CD25+ 调节性 T 淋巴细胞 (Tregs) 的百分比[1]。
体内研究 (In Vivo)
暴露于 LPS 诱导的急性肺损伤 (ALI) 的动物，用乌林司他丁 (10000 U/kg；静脉注射；两次) 可得到显著保护；通过降低肺湿/干重比、ALI评分、总细胞数、中性粒细胞数、巨噬细胞数、髓过氧化物酶活性和丙二醛含量——这些因素与肺组织学损伤相关[1]——实现了这一目标。
在LPS诱导的急性肺损伤（ALI）小鼠模型（雄性C57BL/6小鼠，8-10周龄，18-22 g）中，在气管内滴注LPS（5 mg/kg）前1小时和后6小时静脉注射乌司他丁（10,000 U/kg）显著提高了72小时存活率（LPS+UTI组存活率约为50%，而LPS组约为20%）[2]。
乌司他丁治疗显著降低了肺湿/干重比和肺损伤评分（组织学评估：肺泡充血、出血、与单独使用LPS相比，乌司他丁可显著降低中性粒细胞浸润和肺泡壁厚度[2]。
乌司他丁显著降低了LPS诱导的ALI小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中的总细胞数、中性粒细胞数和巨噬细胞数[2]。
乌司他丁显著降低了LPS诱导的ALI小鼠肺组织中的髓过氧化物酶（MPO）活性和丙二醛（MDA）含量[2]。
乌司他丁通过RT-qPCR检测，降低了肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-2、VCAM-1、ICAM-1、MCP-1和COX-2的mRNA表达[2]。
乌司他丁减弱了LPS诱导的TLR4 mRNA和蛋白表达，以及小鼠肺组织中 p-65 和 NF-κB 蛋白水平 [2]。
在脓毒症肝损伤模型中，乌司他丁 降低了 TNF-α 含量并增加了 IL-10 含量，从而减轻了脓毒症损伤 [1]。
在肝脏缺血再灌注损伤模型中，乌司他丁 提高了 SOD 活性，降低了 MDA 和 TNF-α 浓度，抑制了促凋亡基因 BAX 和 caspase-3，并促进了抗凋亡基因 Bcl-2 的表达 [1]。
在肝纤维化研究中，与杂合敲除小鼠相比，纯合乌司他丁 敲除小鼠的透明质酸 (HA) 和 TGF-β 水平显著升高，肝纤维化程度更重，表明乌司他丁 可减少 HA 和 TGF-β 的产生并减缓肝纤维化 [1]。
在在自身免疫性肝病伴肝衰竭中，乌利司他汀降低了IL-6和IL-8水平[1]。
在急性肝衰竭模型中，乌利司他汀降低了AST、ALT、MDA、iNOS、TNF-α和caspase-3水平，同时提高了SOD和GSH-Px水平[1]。
酶活实验
使用商业试剂盒测定肺匀浆中的髓过氧化物酶 (MPO) 活性。收集肺组织，在磷酸钾缓冲液（pH 6.0）中匀浆，并在 4°C 下以 500×g 离心 15 分钟。然后，将 10 μL 上清液转移至含有 0.17 mg/mL 3,3'-二甲氧基联苯胺和 0.0005% H₂O₂ 的缓冲液中。分析每个样品中的总蛋白含量。乌司他丁治疗显著降低了 LPS 诱导的 MPO 活性 [2]。使用商业测定试剂盒，按照制造商的说明测定肺匀浆中的丙二醛 (MDA) 含量。乌司他丁显著降低了 LPS 诱导的 MDA 含量 [2]。
细胞实验
Western Blot 分析[1]
细胞类型： 人肺上皮细胞 BEAS-2B
测试浓度： 500 U、2500 U、5000 U
孵育时间： 24 小时
实验结果： LPS 刺激的 BEAS-2B 细胞中 TLR4 表达和 NF-κB 活化显著减弱。
人肺上皮细胞 BEAS-2B 在添加了 10% 胎牛血清、100 U/mL 青霉素和 100 U/mL 链霉素的 RPMI-1640 培养基中，于 5% CO2 气氛下培养。对于乌司他汀处理，在LPS刺激（10 μL PBS中含10 μg LPS）前1小时和刺激后6小时，分别用乌司他汀（10 μL、50 μL或100 μL，浓度为100,000 U，溶于2 mL PBS）处理细胞。24小时后，收集细胞进行分析。采用MTT法测定细胞活力。在测试剂量下，乌司他汀未显示细胞毒性[2]。
蛋白质印迹分析：收集细胞后裂解，并使用蛋白提取试剂盒提取蛋白。用5%脱脂奶粉TBST溶液封闭2小时后，将膜与TLR4、p-65和NF-κB的一抗于4℃孵育过夜，然后与HRP标记的二抗孵育。采用增强化学发光法显色。乌利司他汀以剂量依赖的方式降低TLR4、p-65和NF-κB蛋白水平[2]。
RT-qPCR：使用TRIzol试剂从细胞中分离总RNA，进行逆转录，并使用M-MLV Platinum RT-qPCR试剂盒进行实时定量PCR。使用的引物针对TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-2、VCAM-1、ICAM-1、MCP-1、COX-2、TLR4和β-actin。乌利司他汀降低了这些炎症介质的mRNA表达[2]。
ELISA：使用细胞因子特异性ELISA试剂盒检测培养基中IL-2、TNF-α、IL-1β和IL-6的水平。总量以活细胞沉淀物中的总蛋白量进行标准化。 乌利司他汀显著降低了这些细胞因子水平[2]。
TLR4基因转染：使用Lipofectamine Plus试剂将pPICZA-TLR4质粒DNA转染至BEAS-2B细胞，以上调TLR4表达。转染24小时后，用LPS处理细胞，并加入或不加入乌利司他汀（50 μL）。TLR4过表达消除了乌利司他汀对TLR4/NF-κB信号通路和细胞因子产生的保护作用[2]。
动物实验
动物/疾病模型：雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄，18-22 g）[1]
剂量：10000 U/kg
给药途径：静脉注射；两次（LPS处理前1小时和处理后6小时）
实验结果：显著保护动物免受LPS诱导的急性肺损伤。
雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄，18-22 g）饲养于受控条件下（24±1°C，相对湿度40-80%，12小时光照/黑暗循环），可自由摄取食物和水。通过气管内滴注LPS（5 mg/kg，溶于50 μL磷酸盐缓冲液）诱导ALI模型。在LPS处理前1小时和处理后6小时，经尾静脉静脉注射乌司他丁（10,000 U/kg）。假手术组仅注射生理盐水。监测小鼠存活72小时。为进行组织学和生化分析，在LPS处理后24小时，用乙醚麻醉处死小鼠[2]。
肺湿重/干重比：解剖后立即取出肺组织，称重（湿重），在60℃恒温烘箱中干燥，再次称重（干重）。计算该比值[2]。
组织学评估：将肺组织固定于4%多聚甲醛溶液中，石蜡包埋，切片，并用苏木精-伊红（H&E）染色。病理学家根据肺泡充血、出血、中性粒细胞浸润和肺泡壁增厚/透明膜形成情况，采用 4 分制评分标准（0=无损伤，4=弥漫性损伤）对肺损伤进行盲法评分。肺损伤评分取每只动物四个切片的平均值[2]。
支气管肺泡灌洗液 (BALF) 采集：将冰冷的 PBS 灌注肺部两次，然后通过气管插管抽取。采用血细胞计数器测定白细胞总数[2]。
在脓毒症肝损伤小鼠模型中，给予乌司他丁，并分析肝组织中TNF-α和IL-10的水平[1]。
在肝脏缺血再灌注损伤模型中，将乌司他丁与右美托咪定联合使用，或加入乳酸林格氏液中浸泡肝脏[1]。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
极少数情况下，静脉注射高剂量乌司他丁可能引起不良反应，例如头晕、注射部位疼痛、白细胞计数下降、恶心、呕吐，甚至过敏反应。这些不良反应通常持续时间较短，严重反应发生率极低。在合理剂量下，乌司他丁对大多数患者而言通常耐受性良好且安全[1]。
在一项针对健康中国志愿者的随机、双盲、安慰剂对照、递增剂量研究中，静脉输注2小时后，高剂量乌司他丁通常安全且耐受性良好[1]。
参考文献

[1]. Research progress of ulinastatin in the treatment of liver diseases. Int J Clin Exp Pathol. 2020 Nov 1;13(11):2720-2726.

[2]. Ulinastatin Protects Against LPS-Induced Acute Lung Injury By Attenuating TLR4/NF-κB Pathway Activation and Reducing Inflammatory Mediators. Shock. 2018 Nov;50(5):595-605.
其他信息
乌司他丁可用于治疗脓毒性肝损伤、肝缺血再灌注损伤、肝炎、肝纤维化、伴有肝功能衰竭的自身免疫性肝病、急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征、胰腺炎、脓毒症、脓毒性休克、全身炎症反应综合征、急性循环衰竭和脑水肿[1][2]。
乌司他丁通过多种机制发挥作用：通过抑制TLR4/NF-κB通路减少炎症因子（TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-2）的产生；通过上调Bcl-2和下调Bax/caspase-3来抑制细胞凋亡；调节多种酶活性（抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、肝素酶；激活中性蛋白酶）。乌司他汀通过调节血液凝固（减少凝血酶-抗凝血酶复合物和P-选择素）和免疫调节（增加CD4+/CD8+比值，减少Treg细胞）发挥作用[1][2]。
乌司他汀可提高LPS诱导的ALI小鼠的存活率（72小时时从约20%提高到约50%）[2]。
乌司他汀可缩短患者的机械通气时间、ICU住院时间和死亡率[1]。
乌司他汀对LPS诱导的ALI的保护作用是通过减弱TLR4/NF-κB通路激活实现的[2]。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C13H16O3
分子量
220.264344215393
精确质量
220.109
CAS号
80449-31-6
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.2±0.1 g/cm3
沸点
331.5±42.0 °C at 760 mmHg
闪点
171.0±16.8 °C
蒸汽压
0.0±0.7 mmHg at 25°C
折射率
1.549
LogP
2.87
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O : ~10 mg/mL
DMSO : ~1 mg/mL
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 4.5401 mL 22.7004 mL 45.4009 mL
5 mM 0.9080 mL 4.5401 mL 9.0802 mL
10 mM 0.4540 mL 2.2700 mL 4.5401 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
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计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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