| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Anoctamin 1 (ANO1)/TMEM16A, a calcium-activated chloride channel (CaCC) (inhibitor; IC₅₀ = 77 ± 1.1 nM in FRT-ANO1 cells by short-circuit current analysis; IC₅₀ < 3 μM in initial fluorescence-based screen) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
在利用稳定表达人ANO1的Fischer大鼠甲状腺（FRT）细胞和基于YFP的卤化物传感器对54,400种化合物进行基于细胞的高通量筛选后，Ani9被鉴定为一种强效的ANO1抑制剂。它能完全阻断ANO1通道活性，IC₅₀ < 3 μM。[1]
在表达人ANO1的FRT细胞中，短路电流分析表明，Ani9以剂量依赖的方式抑制ATP刺激的ANO1氯离子电流，IC₅₀为77 ± 1.1 nM。这比已知的抑制剂T16Ainh-A01（IC₅₀ = 1.39 μM）和MONNA（IC₅₀ = 1.95 μM）的效力高出18倍以上。 [1] 在FRT-ANO1细胞中进行的全细胞膜片钳分析证实，Ani9以剂量依赖的方式抑制ATP诱导的ANO1氯离子电流。在50 nM、100 nM和1 μM浓度下，其分别抑制了52.0 ± 3.7%、95.4 ± 0.5%和98.7 ± 0.5%的电流。[1] Ani9不影响FRT细胞中ATP诱导的细胞内钙离子浓度升高，表明其抑制作用并非由于钙信号传导的破坏。[1] Ani9（浓度高达30 μM）对FRT细胞中的CFTR氯离子通道活性或T84细胞中的ENaC钠离子通道活性均无影响。[1] Ani9对体积调节阴离子通道（VRAC）的抑制作用极小。在 1 μM 的浓度下（该浓度几乎完全抑制 ANO1），Ani9 在基于 YFP 的检测中仅抑制了 VRAC 活性 13.5 ± 1.1%。全细胞膜片钳实验证实了这一点，1 μM 的 Ani9 对低渗诱导的 VRAC 电流没有显著影响。相比之下，T16Ainh-A01 和 MONNA 则强烈抑制了 VRAC。[1] 关键的是，Ani9 对 ANO1 的选择性远高于 ANO2。在 1 μM 的浓度下，Ani9 几乎完全抑制了 ANO1，但在基于 YFP 和短路电流的检测中，它对 ANO2 通道活性均无影响。即使在 10 μM 的浓度下，它对 ANO2 的抑制也仅为 10 ± 1.6%。相比之下，T16Ainh-A01 和 MONNA 则能有效抑制 ANO1 和 ANO2。 [1] Ani9 能有效抑制癌细胞系（PC3 前列腺癌、Capan-1 胰腺癌）和 IL-4 处理的原代人鼻上皮细胞 (NHNE) 中的内源性 CaCC 活性。Ani9 对 NHNE 细胞中内源性 CaCC 的抑制 IC₅₀ 值约为 110 nM。[1] 研究发现，Ani9 对 ANO1 的抑制作用是可逆的，因为洗脱后其抑制作用显著减弱。[1] |
| 细胞实验 |
基于YFP的卤化物内流检测：使用稳定共表达人ANO1（或ANO2）和卤化物敏感型YFP的FRT细胞。将细胞与测试化合物预孵育10-20分钟。在含碘溶液中，用ATP（100 μM）激活ANO1/2。使用荧光酶标仪测量YFP荧光猝灭速率，该速率对应于碘化物通过通道的内流。IC₅₀值由剂量反应曲线计算得出。该检测方法也用于评估LN215细胞中的VRAC活性。[1]
Ussing室短路电流（Isc）测量：在透性支持物上培养表达ANO1或ANO2的FRT细胞。对于内源性CaCC的研究，使用PC3、Capan-1或IL-4处理的原代NHNE细胞。将细胞安装于 Ussing 室中。用两性霉素 B 透化基底外侧膜（针对 FRT 细胞）后，施加跨上皮氯离子梯度。将测试化合物加入顶端和基底外侧浴液中。通过在顶端加入 ATP 或 Eact 激活 ANO1/2 或 CaCCs。测量由此产生的顶端膜电流。该方法也用于评估 CFTR 和 ENaC 的活性。[1] 全细胞膜片钳记录：对 FRT-ANO1 细胞进行常规全细胞膜片钳记录，以直接测量 ANO1 氯离子电流。通过 -100 mV 至 +100 mV 的电压阶跃诱发电流。通过加入 ATP 或使用高浓度 Ca²⁺ 的移液管溶液激活 ANO1。评估了 Ani9 对这些电流的影响。该方法也用于验证 LN215 细胞中 VRAC 的抑制作用。 [1] 细胞内钙离子浓度测定：将FRT细胞用钙敏感染料Fluo-4 NW进行标记。用Ani9预孵育后，使用荧光酶标仪测量ATP刺激后的荧光变化，以评估其对钙信号传导的影响。[1] 蛋白质印迹：将来自不同细胞系（FRT、FRT-ANO1、PC3、Capan-1、NHNE）的蛋白裂解物进行SDS-PAGE电泳分离，并用抗ANO1抗体进行检测，以确认ANO1蛋白的表达。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Ani9 [2-(4-氯-2-甲基苯氧基)-N-[(2-甲氧基苯基)亚甲基氨基]-乙酰胺] 是一种新型、高效且高选择性的小分子抑制剂，可抑制钙激活氯离子通道 ANO1/TMEM16A。它是通过高通量筛选和后续表征发现的。[1]
ANO1 参与多种生理和病理过程，包括体液分泌、平滑肌收缩、伤害感受和癌症进展。像 Ani9 这样高效且选择性强的抑制剂是研究 ANO1 功能的宝贵药理学工具，并有望成为治疗癌症、高血压、疼痛、腹泻和哮喘等疾病的候选药物。[1] 与之前的 ANO1 抑制剂（例如 T16Ainh-A01、MONNA）相比，Ani9 的一个关键优势在于其对 ANO1 通道的选择性远高于与其密切相关的 ANO2 通道。此外，在完全抑制ANO1的浓度下，它对其他离子通道（如CFTR、ENaC和VRAC）的脱靶效应也极小。[1] |
| 分子式 |
C17H17CLN2O3
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|---|---|
| 分子量 |
332.784
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| 精确质量 |
332.092
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| CAS号 |
356102-14-2
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| PubChem CID |
9556542
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.563
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| LogP |
4.47
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| tPSA |
59.9
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
23
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| 分子复杂度/Complexity |
405
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC1=C(C=CC(=C1)Cl)OCC(=O)N/N=C/C2=CC=CC=C2OC
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| InChi Key |
KDALDZRKOBJXIE-VXLYETTFSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H17ClN2O3/c1-12-9-14(18)7-8-15(12)23-11-17(21)20-19-10-13-5-3-4-6-16(13)22-2/h3-10H,11H2,1-2H3,(H,20,21)/b19-10+
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| 化学名 |
2-(4-chloro-2-methylphenoxy)-N-[(E)-(2-methoxyphenyl)methylideneamino]acetamide
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| 别名 |
Ani9 Ani 9 Ani-9
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 125 mg/mL (~375.62 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.0050 mL | 15.0249 mL | 30.0499 mL | |
| 5 mM | 0.6010 mL | 3.0050 mL | 6.0100 mL | |
| 10 mM | 0.3005 mL | 1.5025 mL | 3.0050 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
ANO1-IN-5
Cobiprostone
CBIQ
TMEM16A modulator-1
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COA
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