Arecoline 中文名称: 槟榔碱

目录号: V6652 纯度: ≥98%

COA 产品数据产品说明书 SDS

槟榔碱是一种天然存在的生物碱，是烟碱和毒蕈碱乙酰胆碱受体的部分激动剂。

Arecoline CAS号: 63-75-2
产品类别: AChR Receptor

产品仅用于科学研究，不针对患者销售

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Nature 2025, 643(8070):192-200.

Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Science Adv 2025, 11(33):eadr5199.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

Immunity 2024,57:2651-2668.e12.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

产品描述
生物活性&实验参考方法
化学信息
溶解度数据
计算器
临床试验信息
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产品描述

槟榔碱是一种天然存在的生物碱，是烟碱和毒蕈碱乙酰胆碱受体的部分激动剂。槟榔碱具有刺激、警醒、抗焦虑（抗焦虑）和抗寄生虫作用。槟榔碱还可以诱发氧化应激。

生物活性&实验参考方法

体外研究 (In Vitro)	在不改变 p21/Cip1 表达的情况下，槟榔碱会导致 HaCaT 细胞中活性氧的产生和细胞周期停滞在 G1/G0 期。较高的槟榔碱浓度会促进上皮细胞死亡，但原因是氧化损伤而不是细胞凋亡。当暴露于槟榔碱时，应激反应基因 hemeoxygenase-1、铁蛋白轻链、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基和谷胱甘肽还原酶的表达均上调[1]。
参考文献	[1]. Regulation of oxidative-stress responsive genes by arecoline in human keratinocytes. J Periodontal Res. 2009 Oct;44(5):673-82. [2]. The pharmacology, toxicology and potential applications of arecoline: a review. Pharm Biol. 2016 Nov;54(11):2753-2760. [3]. DARK Classics in Chemical Neuroscience: Arecoline. ACS Chem Neurosci. 2019 May 15;10(5):2176-2185. [4]. Arecoline induces TNF-alpha production and Zonula Occludens-1 redistribution in mouse Sertoli TM4 cells. J Biomed Sci. 2014 Sep 9;21(1):93.
其他信息	槟榔碱是一种四氢吡啶类化合物，其结构为1,2,5,6-四氢吡啶，1位连接一个甲基，3位连接一个甲氧羰基。它是槟榔中发现的一种生物碱，可作为毒蕈碱型乙酰胆碱受体的激动剂。它既是毒蕈碱受体激动剂，也是其代谢产物。它是一种四氢吡啶类化合物，也是一种烯酸酯、吡啶类生物碱和甲酯。槟榔碱是从槟榔（Areca catechu，一种棕榈树的果实）中提取的一种生物碱。它是毒蕈碱型和烟碱型乙酰胆碱受体的激动剂。它以各种盐的形式用作神经节兴奋剂、拟副交感神经药和驱虫药，尤其是在兽医学中。在太平洋岛屿，槟榔碱曾被用作兴奋剂。据报道，槟榔碱存在于槟榔树（Areca catechu）和蒌叶（Piper betle）中，并有相关数据。槟榔碱存在于坚果中。槟榔碱是从槟榔子中分离出来的。槟榔碱是一种天然生物碱，存在于槟榔树（Areca catechu）的果实——槟榔子中。它是一种油状液体，可溶于水、醇类和乙醚。由于其具有毒蕈碱受体激动剂和烟碱受体激动剂的特性，槟榔碱已被证明可以改善健康志愿者的学习能力。由于认知能力下降是阿尔茨海默病的一个标志性特征，因此有人提出将槟榔碱作为一种延缓这一过程的治疗方法。静脉注射槟榔碱确实可以轻微改善阿尔茨海默病患者的语言和空间记忆，但由于槟榔碱可能具有致癌性，因此它并非治疗这种退行性疾病的首选药物。槟榔碱已被证实具有促细胞凋亡、兴奋和类固醇生成功能（A7876、A7878、A7879）。槟榔碱属于生物碱及其衍生物家族。这些天然化合物主要含有碱性氮原子。该家族还包括一些具有中性甚至弱酸性性质的相关化合物。一些结构相似的合成化合物也被归类为生物碱。除碳、氢和氮外，生物碱还可能含有氧、硫，以及较少见的其他元素，例如氯、溴和磷。槟榔碱是从槟榔（Areca catechu，一种棕榈树的果实）中提取的一种生物碱。它是毒蕈碱型和烟碱型乙酰胆碱受体的激动剂。它以各种盐的形式用作神经节兴奋剂、拟副交感神经药和驱虫药，尤其是在兽医学中。在太平洋岛屿上，它曾被用作兴奋剂。

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

精确质量	155.095
CAS号	63-75-2
相关CAS号	Arecoline hydrobromide;300-08-3;Arecoline hydrochloride;61-94-9
PubChem CID	2230
外观&性状	Light yellow to brown liquid
密度	1.059g/cm3
沸点	209ºC at 760mmHg
熔点	< 25 °C
闪点	81.1ºC
折射率	1.483
LogP	0.359
tPSA	29.54
氢键供体(HBD)数目	0
氢键受体(HBA)数目	3
可旋转键数目(RBC)	2
重原子数目	11
分子复杂度/Complexity	187
定义原子立体中心数目	0
InChi Key	HJJPJSXJAXAIPN-UHFFFAOYSA-N
InChi Code	InChI=1S/C8H13NO2/c1-9-5-3-4-7(6-9)8(10)11-2/h4H,3,5-6H2,1-2H3
化学名	methyl 1-methyl-3,6-dihydro-2H-pyridine-5-carboxylate
HS Tariff Code	2934.99.9001
存储方式	Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意：本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件	Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)	H2O : ~250 mg/mL (~1610.93 mM)
溶解度 (体内实验)	注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。注射用配方 (IP/IV/IM/SC等) 注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline) 生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。注射用配方 2:* DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More 注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。注射用配方 5:* 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline) 注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline) 注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline) 注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil) 注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 口服配方口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More 口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 口服配方 6: 做成粉末与食物混合注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

溶解度 (体外实验)

H2O : ~250 mg/mL (~1610.93 mM)

溶解度 (体内实验)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)

注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方

口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

临床试验信息

NCT Number	Recruitment	interventions	Conditions	Sponsor/Collaborators	Start Date	Phases
NCT00174109	UNKNOWN STATUS		Oral Cancer	National Taiwan University Hospital	2005-08
NCT01919567	UNKNOWN STATUS		Carcinogenesis Oral Cancer	National Taiwan University Hospital	2011-11
NCT02942745	COMPLETED	Behavioral: Betel Nut Cessation Social Support Behavioral: Betel Nut Cessation Booklet	Betel Nut Chewer Tobacco Cessation	University of Guam	2016-08	Not Applicable
NCT05782166	NOT YET RECRUITING	Behavioral: Betel Quid Educational Booklet Behavioral: Betel Quid Cessation Intervention Module	Betel Nut Chewer Tobacco Cessation	University of Malaya	2024-01-02	Not Applicable
NCT03010761	TERMINATED	Drug: escitalopram Drug: Moclobemide Drug: Placebo - Cap	Addiction	China Medical University Hospital	2016-01-14	Phase 2

生物数据图片

Arecoline decreased membrane expression of ZO-1 in confluent TM4 cells. These were treated with indicated arecoline concentration for 6 hours. (A) Morphology of confluent TM4 treated with (right panel) or without (left panel) 400 μM of arecoline were visualized. Treated cells (right panel) displayed flat and spread morphology compared to controls (left panel). (B) ZO-1 protein expression detected by immunofluorescent assay was visualized by fluorescent microscope. Arecoline-treated cells were manifested lower ZO-1 signal than controls. (C) Insoluble and soluble fractions of cell lysates were prepared for Z0-1 detection by Western blot. (D) Inhibitory effect of arecoline on insoluble ZO-1 is plotted on bar graph. Signals of insoluble ZO-1 were quantified by densitometry analysis and expressed as average percentage of respective control cells from three independent experiments to rate arecoline’s inhibitory effect (*P < 0.05 versus 0 μM controls). (E) The amounts of ZO-1 mRNA were determined using RT-qPCR. Results depict mean ± SD of three independent experiments. *P < 0.05 compared with cells incubated without arecoline treatment (0 μM).[4]. Kuo TM, et, al. Arecoline induces TNF-alpha production and Zonula Occludens-1 redistribution in mouse Sertoli TM4 cells. J Biomed Sci. 2014 Sep 9;21(1):93.

Arecoline activates ERK1/2 MAPKs and increases TNF-alpha production. (A) Protein signal of phospho-ERK1/2, ERK1/2, phospho-JNK, phospho-IkappaB-alpha, phospho-PP2A, phospho-STAT1 and GAPDH in arecoline (400 μM) treated cells were detected by Western blot. Arecoline induces phosphorylation of ERK1/2 MAPKs. These same membranes were stripped and re-detected by antibodies of total ERK1/2 and GAPDH. Results shown represent three independent experiments. (B) (C) No obvious cell death in arecoline-treated TM4 cells treated with indicated arecoline concentration, cytotoxicity or viability gauged by released LDH activity detection kit after 6 hours (B) or MTS Assay after 6, 12 and 24 hours of treatment (C). Data express percentage of control cells (*P < 0.05 versus 0 μM control group). (D) (E) Arecoline induced TNF-alpha mRNA .[4]. Kuo TM, et, al. Arecoline induces TNF-alpha production and Zonula Occludens-1 redistribution in mouse Sertoli TM4 cells. J Biomed Sci. 2014 Sep 9;21(1):93.

Activation of ERK1/2 MAPKs is important for TNF-alpha induction and ZO-1 protein redistribution by arecoline in TM4 cells. (A) PD98059 pretreatment inhibited ERK1/2 activation. Cells were stimulated with or without 400 μM of arecoline for 10 minutes after pretreatment with 10 μM PD98059 for 1 hour, levels of ERK1/2 and phospho-ERK1/2 determined by Western blot. Results shown represent three independent experiments. (B) (C) PD98059 pretreatment inhibited arecoline-induced increase in mRNA (B) and soluble protein (C) of TNF-alpha. Cells were treated with or without arecoline for 6 hours after PD98059 pretreatment. Levels of mRNA and soluble protein of TNF-alpha were measured by RT-qPCR and ELISA respectively. Results depict mean ± SD of three independent experiments. *P < 0.05 compared with cells incubated without arecoline treatment (mock control). (D) PD98059 pretreatment rescued arecoline-induced protein redistribution of ZO-1. Levels of insoluble or soluble ZO-1 were determinate by Western blot. Results represent three independent experiments. [4]. Kuo TM, et, al. Arecoline induces TNF-alpha production and Zonula Occludens-1 redistribution in mouse Sertoli TM4 cells. J Biomed Sci. 2014 Sep 9;21(1):93.