Balixafortide (POL6326)   中文名称: 巴利福肽

CXCR4 ( IC50 < 10 nM )
C-X-C chemokine receptor type 4 (CXCR4) - antagonist [1]

贝那沙福肽显著降低淋巴瘤细胞系Jurkat（IC50 < 400 nM）和Namalwa（IC50 < 200 nM）中的pERK/pAKT信号通路活性。在MDA-MB-231乳腺癌细胞（IC50 < 20 nM）、Namalwa和Jurkat细胞（IC50 < 10 nM）中，贝那沙福肽有效抑制SDF-1依赖性趋化作用（表1）[1]。

巴利沙福肽的优化设计充分考虑了平衡的血浆蛋白结合率、提高的血浆和微粒体稳定性以及良好的小鼠吸收、分布、代谢和排泄 (ADME) 特性[1]。

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造血干细胞和祖细胞 (HSPC) 的动员：在健康男性志愿者中，单次静脉输注巴利沙福肽 (500-2500 μg/kg) 可迅速将 CD34+ HSPC 动员至外周血，且呈剂量依赖性。当剂量 ≥1500 μg/kg 时，动员峰值达到 38.2 ± 2.8 个 CD34+ 细胞/μL（平均值 ± 标准误）。动员反应与个体对粒细胞集落刺激因子 (G-CSF) 的反应密切相关。[1]
HSPC 动员动力学：在 500 μg/kg 剂量下，动员峰值出现在输注后 1 小时。在高剂量（≥1000 μg/kg）下，输注结束后约 4 小时观察到峰值。在剂量 ≥1000 μg/kg 时，循环 CD34+ 细胞在 24 小时仍高于基线水平。[1]
动员的造血干细胞功能活性：balixafortide 动员的 CD34+ 细胞的克隆形成能力低于 G-CSF 动员的细胞，balixafortide 动员的 CD34+ 细胞每 5.9 ± 0.5 个细胞产生 1 个 CFU-C，而 G-CSF 动员的 CD34+ 细胞每 3.2 ± 0.2 个细胞产生 1 个 CFU-C。[1]
成熟白细胞的动员：balixafortide 可诱导剂量依赖性的短暂性混合型白细胞增多症。在 1500-2500 μg/kg 的剂量下，白细胞计数达到 25.3 ± 1.4 × 10³/μL。其谱系分布与 G-CSF 不同，B 细胞的相对数量和绝对数量均较高，而中性粒细胞和单核细胞的数量较低。[1]
浆细胞样树突状细胞祖细胞 (pro-pDC) 的动员：Balixafortide 治疗动员了一组独特的 pro-pDC (CD34dimCD45dimCD45RA+CD123high) 细胞群，占 CD34+CD45dim 细胞比例的 22.4 ± 2.3%，显著高于 G-CSF 动员后的比例。 [1]
与G-CSF的比较：个体内部比较显示，在所测试的剂量下，G-CSF方案动员CD34+细胞的疗效约为巴利沙福肽的三倍。然而，志愿者对巴利沙福肽的主观评价高于G-CSF。[1]

Balixafortide 在基于 HTRF 的 CXCR4 配体结合试验、功能试验（钙离子流和 β-arrestin）中进行了测试，并在包括 CXCR7 在内的多种其他受体中进行了进一步分析。通过细胞内 pERK/pAKT 信号通路分析追踪了其对肿瘤细胞敏化的影响。通过趋化性试验评估了肿瘤细胞迁移，并通过 HUVEC 出芽试验确定了其对血管生成的抑制作用。免疫细胞活化的证据来自对相应标志物（例如干扰素 γ）的评估。Balixafortide 在广泛的体外 ADME 分析中进行了详细的分析[1]。

巴利沙福肽与CXCR4具有高亲和力（IC50 < 10 nM）。它能以IC50 < 10 nM的浓度阻断β-arrestin的募集和钙离子内流。在包括CXCR7在内的多种受体中，巴利沙福肽展现出高达1000倍的选择性窗口。巴利沙福肽能有效抑制淋巴瘤细胞系Namalwa（IC50 < 200 nM）和Jurkat（IC50 < 400 nM）中的pERK/pAKT信号通路。巴利沙福肽能有效阻断MDA-MB-231乳腺癌细胞（IC50 < 20 nM）、Namalwa和Jurkat细胞（IC50 < 10 nM）的SDF-1依赖性趋化作用。使用竞争性抗体12G5进行的受体占有率洗脱实验表明，巴利沙福肽与CXCR4的结合具有持久性。此外，Balixafortide 经过优化，具有良好的小鼠和人 ADME 特性，血浆蛋白结合率平衡，血浆和微粒体稳定性更高[1]。

C57BL/6NCrl 野生型 (WT) 小鼠，家养（丹麦杂交）雌性猪
8 mg/kg，3 mg/kg
静脉注射

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研究设计和志愿者：** 这是一项前瞻性、开放标签的 I 期剂量递增试验。纳入了 27 名健康男性志愿者，他们此前对粒细胞集落刺激因子 (G-CSF，非格司亭) 表现出平均动员反应。经过至少 6 周的洗脱期后，他们接受了单次静脉输注巴利沙福肽。该研究在歌德大学医学中心的 I 期临床试验中心进行。志愿者在治疗后 24 小时出院，并在 8-14 天后返回进行随访。 [1]
* **给药方案：** Balixafortide 以生理盐水配制，剂量分别为 500、1000、1500、2000 和 2500 μg/kg，根据实际体重计算。输注时间为 1 或 2 小时（恒定速率），或 2 小时（递增）输注速率。12 名供体在至少 4 周的洗脱期后接受第二次给药，以便进行个体内部比较。部分高剂量组（≥2000 μg/kg）的志愿者接受了预防性或治疗性抗组胺药物，以控制组胺释放症状。[1]
* **药效学评估：** 在预定的时间点采集系列血样。使用血液分析仪进行全血细胞计数。 CD34+ 细胞计数采用单平台流式细胞术（SCE 试剂盒），并遵循 ISHAGE 指南进行定量。多参数流式细胞术用于定量 T 细胞 (CD3+)、B 细胞 (CD19+)、NK 细胞 (CD56+、CD16+)、单核细胞 (CD14+) 和前浆细胞样树突状细胞 (pro-pDCs，CD45^dimCD34^dimCD45RA⁺CD123^high)。循环集落形成单位 (CFU-C) 的评估方法是将裂解的外周血接种于富含细胞因子的甲基纤维素培养基中进行。[1]
* **药代动力学评估：** 在多个时间点采集血浆样本。使用 Phoenix WinNonlin 6.4 软件测量巴利沙福肽 (Balixafortide) 的浓度，并计算药代动力学参数（C_max、AUC、分布容积、半衰期、清除率）。 [1]
* **安全性评估：**监测生命体征，并采集血样进行生化安全性分析。记录不良事件，并评估其与研究药物的关系。志愿者填写问卷，比较他们使用粒细胞集落刺激因子 (G-CSF) 和巴利沙福肽 (balixafortide) 的主观体验。[1]

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研究设计和志愿者：这是一项前瞻性、开放标签、I期剂量递增试验。纳入27名健康男性志愿者，他们此前对G-CSF（非格司亭）表现出平均动员反应。经过至少6周的洗脱期后，他们接受单次静脉输注巴利沙福肽。该研究在歌德大学医学中心的I期临床试验中心进行。志愿者在治疗后24小时出院，并在8-14天后返回进行随访。 [1]
给药方案：Balixafortide溶于生理盐水中，剂量根据实际体重而定，分别为500、1000、1500、2000和2500 μg/kg。输注时间为1或2小时（恒定速率），或2小时（递增）输注速率。12名供体在至少4周的洗脱期后接受第二次给药，以便进行个体内部比较。部分高剂量组（≥2000 μg/kg）的志愿者接受了预防性或治疗性抗组胺药物，以控制组胺释放症状。[1]
药效学评估：在预定的时间点采集系列血样。使用血液分析仪进行全血细胞计数。采用单平台流式细胞术（SCE试剂盒），并遵循ISHAGE指南，对CD34+细胞计数进行定量。采用多参数流式细胞术对T细胞（CD3+）、B细胞（CD19+）、NK细胞（CD56+、CD16+）、单核细胞（CD14+）和前浆细胞样树突状细胞（pro-pDCs，CD45^dimCD34^dimCD45RA⁺CD123^high）进行定量。将裂解的外周血接种于富含细胞因子的甲基纤维素培养基中，评估循环集落形成单位（CFU-C）。[1]药代动力学评估：在多个时间点采集血浆样本。使用Phoenix WinNonlin 6.4软件测量Balixafortide的浓度，并计算药代动力学参数（C_max、AUC、分布容积、半衰期、清除率）。 [1]
安全性评估：监测生命体征，并抽取血样进行生化安全性分析。记录不良事件，并评估其与研究药物的关系。志愿者填写了一份问卷，比较他们使用G-CSF和balixafortide的主观体验。[1]

人体药代动力学特征：在健康志愿者中静脉输注巴利沙福肽后，在 500-2500 μg/kg 的剂量范围内，Cmax 和 AUC 均呈剂量线性药代动力学特征。分布容积约为 500-600 mL/kg。末端半衰期约为 5 小时（平均 5 小时 45 分 ± 35 秒）。清除率与肾小球滤过率相似，提示主要经肾脏清除。[1]
输注方案的影响：不同的输注持续时间（1000 μg/kg 时为 1 小时与 2 小时）对整体药代动力学特征没有显著影响，仅较短输注时间下的 Cmax 出现较早。在 2000 μg/kg 剂量下，恒速输注和递增输注的 AUC 几乎相同，但递增输注的 Cmax 更高。[1]

人体安全性和耐受性：巴利沙福肽总体耐受性良好。未观察到严重不良事件（SAE）。最常见的不良事件是与组胺释放一致的轻度皮肤反应（潮红、荨麻疹、瘙痒、红斑），且随着剂量增加，发生频率也随之增加。这些症状可通过H1/H2抗组胺药治疗进行控制。[1]
不良事件：可能与研究药物相关的不良事件包括轻度骨痛（1例）、血清肌酸激酶升高（2例）和收缩压>150 mmHg（2例）。[1]
主观偏好：在随访调查中，绝大多数志愿者更倾向于使用巴利沙福肽而非G-CSF作为动员剂，认为其更易于使用且总体上更方便。[1]

[1]. Anti-tumor cell activity and in vitro profile of the next generation CXCR4 antagonist Balixafortide. Ann Oncol. 2018 Oct;29 Suppl 8:viii103.

[2]. Mobilization of hematopoietic stem cells with the novel CXCR4 antagonist POL6326 (balixafortide) in healthy volunteers-results of a dose escalation trial. J Transl Med. 2017 Jan 3;15(1):2.

巴利沙福肽（Balixafortide）正在临床试验NCT03786094（一项针对HER2阴性、局部复发或转移性乳腺癌的关键性研究）中进行研究。巴利沙福肽是一种口服生物利用度高的CXC趋化因子受体4（CXCR4）抑制剂，具有受体结合和造血干细胞动员活性。巴利沙福肽与趋化因子受体CXCR4结合，从而阻止基质细胞衍生因子-1（SDF-1或CXCL12）与CXCR4受体结合，进而抑制受体活化。这可能诱导造血干细胞和祖细胞从骨髓动员到血液中。CXCR4是一种属于G蛋白偶联受体（GPCR）基因家族的趋化因子受体，在趋化性和血管生成中发挥重要作用，并在多种肿瘤细胞类型中表达上调。 CXCL12/CXCR4 相互作用诱导造血细胞在骨髓中滞留。

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药物适应症
乳腺癌治疗

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背景和原理：巴利沙福肽是一种合成的蛋白表位模拟物（PEM）肽类CXCR4拮抗剂。它被开发为G-CSF的替代方案，用于动员造血干细胞进行移植，旨在克服G-CSF的缺点，例如需要连续数天每日多次注射、相关副作用（骨痛、流感样症状）以及潜在的禁忌症。[1]
作用机制：巴利沙福肽通过拮抗CXCR4受体，破坏CXCR4/CXCL12（SDF-1）轴，而该轴对于将造血干细胞滞留在骨髓微环境中至关重要。这会导致干细胞和祖细胞快速释放或“动员”到外周血中。[1]
临床潜力：基于所达到的动员水平（≥1500 μg/kg 剂量），该研究预测，对于大多数为体重匹配的受者捐献的个体而言，单次血细胞分离术即可获得标准剂量（≥4 × 10⁶ CD34+ 细胞/kg 受者体重）。该研究表明，balixafortide 可能是一种安全、耐受性良好且方便的单剂量替代 G-CSF 的干细胞动员药物，适用于供者和患者。其作用机制和快速清除可能使其适用于 G-CSF 禁忌症患者。[1]

C84H118N24O21S2

1864.1

1862.83

C, 49.00; H, 5.53; F, 7.75; N, 15.24; O, 19.58; S, 2.91

1051366-32-5

Balixafortide TFA; 1051366-32-5

138752609

Cyclo(Ala-Cys-Ser-Ala-{D-Pro}-{Dab}-Arg-Tyr-Cys-Tyr-Gln-Lys-{D-Pro}-Pro-Tyr-His) (Disulfide bridge: Cys2-Cys9)

Cyclo(ACSA-{D-Pro}-{Dab}-RYCYQK-{D-Pro}-PYH) (Disulfide bridge: Cys2-Cys9)

Solid powder

-3.5

757Ų

24

29

23

131

3970

16

C[C@H]1C(=O)N[C@H]2CSSC[C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]3CCCN3C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC2=O)CO)C)CCN)CCCNC(=N)N)CC4=CC=C(C=C4)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]5CCCN5C(=O)[C@@H]6CCCN6C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NN1)CC7=CN=CN7)CC8=CC=C(C=C8)O)CCCCN)CCC(=O)N)CC9=CC=C(C=C9)O

OYWQJZAVFWOOBF-WBMPNIIXSA-N

InChI=1S/C84H118N24O21S2/c1-44-70(116)102-62-41-130-131-42-63(77(123)98-57(35-46-14-20-50(110)21-15-46)69(115)68(114)53(10-5-31-91-84(88)89)94-73(119)56(28-30-86)97-79(125)64-11-6-32-106(64)81(127)45(2)93-76(122)61(40-109)101-78(62)124)103-74(120)58(36-47-16-22-51(111)23-17-47)99-72(118)55(26-27-67(87)113)95-71(117)54(9-3-4-29-85)96-80(126)65-12-7-33-107(65)83(129)66-13-8-34-108(66)82(128)60(37-48-18-24-52(112)25-19-48)100-75(121)59(105-104-44)38-49-39-90-43-92-49/h14-25,39,43-45,53-66,104-105,109-112H,3-13,26-38,40-42,85-86H2,1-2H3,(H2,87,113)(H,90,92)(H,93,122)(H,94,119)(H,95,117)(H,96,126)(H,97,125)(H,98,123)(H,99,118)(H,100,121)(H,101,124)(H,102,116)(H,103,120)(H4,88,89,91)/t44-,45-,53-,54-,55-,56-,57-,58-,59-,60-,61-,62-,63-,64+,65+,66-/m0/s1

3-[(1R,4S,7S,10S,16S,22R,25S,28S,31S,34R,37S,40S,43S,46R,52S,55S)-25-(4-aminobutyl)-43-(2-aminoethyl)-40-(3-carbamimidamidopropyl)-55-(hydroxymethyl)-10,31,37-tris[(4-hydroxyphenyl)methyl]-7-(1H-imidazol-5-ylmethyl)-4,52-dimethyl-3,8,11,17,23,26,29,32,35,38,39,42,45,51,54,57-hexadecaoxo-59,60-dithia-2,5,6,9,12,18,24,27,30,33,36,41,44,50,53,56-hexadecazapentacyclo[32.23.4.012,16.018,22.046,50]henhexacontan-28-yl]propanamide

Balixafortide; POL 6326; POL6326; POL6326; Cyclo(L-alanyl-L-cysteinyl-L-seryl-L-alanyl-D-prolyl-(2S)-2,4-diaminobutanoyl-L-arginyl-L-tyrosyl-L-cysteinyl-L-tyrosyl-L-glutaminyl-L-lysyl-D-prolyl-L-prolyl-L-tyrosyl-L-histidyl), cyclic (2->9)-disulfide; Balixafortide [INN]; Balixafortide [USAN]; 11-Dideuterolinoleic acid; Balixafortide(POL6326); POL6326

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

Water: ~100 mg/mL

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。