| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
humand and mouse STING
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| 体外研究 (In Vitro) |
C-178 包括 mmSTING N 末端的一个区域，该区域穿过膜结构域，但尚不清楚。此外，C-178 通过阻断 STING 的棕榈磷脂化来阻碍这一过程。人体细胞不会受到 C-178 的显着影响。单独使用 C-178（0-1 μM；1 小时）不会显着影响 BMDM 的基因表达谱。此外，它还可以防止 CMA 引起的 TBK1[1] 磷酸化。在小鼠骨髓产生的巨噬细胞中，C-178（1 μM；1 小时）可降低由 cdG、dsDNA、CMA 和 LPS 触发的 Ifnb1 表达 [1]。在小鼠胚胎成纤维细胞中，C-178（1 μM；0.5-4 小时）以时间依赖性方式抑制 CMA 产生的 p-TBK1 和刺蛋白的产生[1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
因为我们注意到C-176相对于C-178的溶解度有所提高，所以我们选择该化合物进行体内研究。首先，我们使用体内点击化学方法验证了这些化合物靶向STING，并评估了单剂量腹膜内注射C-176的药代动力学特征。接下来，我们评估了C-176是否可以抑制由CMA给药引发的I型IFN的诱导。值得注意的是，用C-176预处理显著降低了CMA介导的血清I型IFN和IL-6水平的诱导。因此，C-176对小鼠有效，正如共价抑制剂所预期的那样，短的血清半衰期不会限制其体内抑制能力。为了评估C-176在自身炎症性疾病模型中拮抗STING的潜力，我们研究了其在Trex1−/-小鼠中的疗效。Trex1−/-小鼠表现出由环状GMP–AMP合酶–STING通路的持续激活引起的严重多器官炎症的迹象，并概括了人类Aicardi–Goutières综合征的某些致病特征。在验证了C-178抑制Trex1−/-小鼠细胞中干扰素刺激的基因后，我们对C-176进行了为期两周的体内疗效研究。值得注意的是，用C-176治疗Trex1−/-小鼠导致血清I型IFN水平显著降低，并强烈抑制心脏炎症参数。用C-176治疗两周的野生型小鼠没有明显的明显毒性迹象。接下来，我们在Trex1−/−小鼠中用C-176进行了为期三个月的试验，结果表明，系统炎症的各种迹象都得到了显著改善。因此，C-176可减轻小鼠STING相关的自身炎症疾病[1]。
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| 酶活实验 |
竞争分析[1]
将表达Flag–STING的HEK293T细胞与所示化合物孵育，1小时后，加入C-176-AL 1小时。将细胞收集在PBS中，并通过C-176-AL-介导的STING标记的凝胶内分析进行分析（见“化合物与STING结合的基于凝胶的分析”） 基于凝胶的化合物与STING结合的分析[1] 将表达Flag–STING的HEK293T细胞与C-176-AL、C-175-AZ、叠氮化碘乙酰胺（Thermo Fisher）或H-151-AL在无血清培养基中孵育，收集在PBS中，并通过重复冷冻和解冻裂解。用新制备的“点击试剂”混合物处理43微升裂解的细胞，该混合物含有三（苄基三唑基甲基）胺（TBTA）（每个样品3μl，在1:4 DMSO:t-ButOH中3 mM）、四甲基罗丹明（TAMRA）叠氮化物、SiR叠氮化物（Spichrome）或SiR炔烃（Spichrochrome）减少样品缓冲液。使用Fusion FX（Vilber-Lourmat）对凝胶内荧光进行可视化，并通过Fusion-capt高级采集软件进行分析 与辛二酸二琥珀酰亚胺酯交联[1] 将表达Flag–mmSTING的HEK293T细胞与C-176（1μM）一起或不与C-176一起孵育1小时，并用DMSO或CMA（250μg ml−1）处理2小时。在PBS中与室温下在DMSO中新制备的1 mM二琥珀酰亚胺基亚油酸酯（DSS）（赛默飞世尔）进行交联1小时。 |
| 细胞实验 |
蛋白质印迹分析[1]
细胞类型： 小鼠骨髓源性巨噬细胞 (BMDM) 测试浓度： 0 μM； p-TBK1 和刺痛湿度纤维形成细胞蛋白表达随着时间的推移而发生[1]。 0.125μM； 0.25μM； 0.5μM； 1 μM 孵育时间： 1 小时 实验结果： 以剂量依赖性方式抑制 CMA 诱导的 p-TBK1 表达。 RT-PCR[1] 细胞类型：小鼠骨髓源性巨噬细胞 (BMDM) 测试浓度： 1 μM 孵育时间：1小时 实验结果：Ifnb1表达在BMDM中下调。 |
| 动物实验 |
C57BL/6J小鼠（品系编号000664）购自Jackson Laboratories。TREX1缺陷小鼠由T. Lindahl31惠赠，并已回交至C57BL/6NJ品系超过10代。小鼠饲养于瑞士洛桑联邦理工学院（EPFL）的特定病原体清除（SPF）条件下。在药代动力学研究中，每只野生型小鼠腹腔注射750 nmol C-176（溶于200 μl玉米油，Sigma公司）。分别于注射后30分钟、2小时和4小时采集血液样本，并采用液相色谱-高分辨率质谱法（LC-HRMS）测定血清中C-176的浓度。为评估C-176的体内抑制作用，将8-12周龄的野生型小鼠分别注射溶剂或C-176。1小时或4小时后，给予浓度为224 mg/kg的CMA。四小时后，处死小鼠并收集血清，以检测CMA诱导的细胞因子水平。为评估H-151的体内抑制作用，将750 nmol H-151溶于200 μl含10% Tween-80的PBS溶液中，腹腔注射至野生型小鼠体内。1小时后，给予CMA（112 mg kg⁻¹），4小时后处死小鼠并收集血清。Trex1⁻/⁻小鼠的疗效研究如下：将7.5 μl C-176或DMSO溶于85 μl玉米油中，每天两次注射至2-5周龄的小鼠体内，连续11天。小鼠在CO₂麻醉箱中麻醉后，采用颈椎脱臼法处死。在毒理学研究中，8周龄小鼠每日注射562.5 nmol C-176，持续2周。第14天，用肝素锂抗凝管（Microvette CB 300 Hep-Lithium）采集血样，4℃离心后分离血浆，并储存于-80℃。使用DimensionXpand Plus（西门子医疗诊断公司）测定血浆参数。对于外周血细胞分析，用EDTA-K抗凝管（Microvette CB 300 EDTA K2）采集100 μl血液。使用ADVIA120血液分析仪（西门子医疗诊断公司）分析全血细胞计数。为了检测荧光素酶活性，将4-7周龄的Trex1−/−Ifnb1Δβ-luc/Δβ-luc报告基因小鼠32腹腔注射750 nmol H-151或DMSO（溶于200 μl含0.1% Tween-80的PBS缓冲液中），连续7天。对于体内成像，小鼠用异氟烷麻醉后，静脉注射15 mg kg−1 XenoLight D-荧光素（Perkin Elmer公司），该荧光素溶于等渗氯化钠溶液中。注射两分钟后，使用In-vivo Xtreme II成像仪（Bruker公司）定量光子通量，像素合并设置为8×8，积分时间为3分钟。动物实验已获得瑞士沃州消费和兽医事务服务处或德国德累斯顿州政府的批准，并按照相应的法律法规进行[1]。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
先天免疫通路异常激活与多种疾病相关。对先天免疫通路分子机制的深入理解为靶向治疗方法带来了希望，但开发能够特异性作用于目标分子的药物仍然面临挑战。本文报道了高效且选择性的小分子干扰素基因刺激因子（STING）拮抗剂的发现和表征。STING是细胞内DNA感应通路的核心信号组分1,2。从机制上讲，这些化合物共价靶向预测的跨膜半胱氨酸残基91，从而阻断STING的激活诱导棕榈酰化。利用这些抑制剂，我们发现STING的棕榈酰化对于其在Golgi体组装成多聚体复合物至关重要，进而影响下游信号因子的募集。这些化合物及其衍生物能够降低人和小鼠细胞中STING介导的炎症细胞因子的产生。此外，我们还发现这些小分子拮抗剂能够减轻小鼠自身炎症性疾病的病理特征。总之，我们的研究揭示了STING可被药物抑制的机制，并证明了靶向STING的疗法在治疗自身炎症性疾病方面的潜力。[1]
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| 分子式 |
C17H10N2O5
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|---|---|
| 分子量 |
322.27
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| 精确质量 |
322.059
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| 元素分析 |
C, 62.49; H, 5.59; N, 9.72; O, 22.20
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| CAS号 |
329198-87-0
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| 相关CAS号 |
329198-87-0
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| PubChem CID |
2866412
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid
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| LogP |
4.1
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| tPSA |
101Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
24
|
| 分子复杂度/Complexity |
508
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
URUVDCCYSJEGQQ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H10N2O5/c20-17(14-7-8-16(24-14)19(21)22)18-10-5-6-12-11-3-1-2-4-13(11)23-15(12)9-10/h1-9H,(H,18,20)
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| 化学名 |
N-(Dibenzo[b,d]furan-3-yl)-5-nitrofuran-2-carboxamide
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| 别名 |
C178; C 178; STING inhibitor C-178; N-(dibenzo[b,d]furan-3-yl)-5-nitrofuran-2-carboxamide; N-(3-Dibenzofuranyl)-5-nitro-2-furancarboxamide; N-3-Dibenzofuranyl-5-nitro-2-furancarboxamide; N-?(3-?Dibenzofuranyl)-?5-?nitro-2-?furancarboxamide; N-dibenzofuran-3-yl-5-nitrofuran-2-carboxamide; C-178
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~41.67 mg/mL (~129.30 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1030 mL | 15.5149 mL | 31.0299 mL | |
| 5 mM | 0.6206 mL | 3.1030 mL | 6.2060 mL | |
| 10 mM | 0.3103 mL | 1.5515 mL | 3.1030 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
INI3069
CDN prodrug-1
STING agonist-45
STING agonist-46
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