| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
humand and mouse STING
Stimulator of interferon genes (STING), a key adaptor protein in the innate immune response to cytosolic DNA. C-178 is a covalent inhibitor of STING that binds to Cys91 on STING to block its palmitoylation. C-178 targets the N-terminal portion of mouse STING that includes the transmembrane domains. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
C-178 包含 mmSTING N 端跨越膜结构域的区域，但其作用机制尚不完全清楚。此外，C-178 通过阻断 STING 的掌部磷脂化来抑制这一过程。C-178 对人细胞的影响不大。单独使用 C-178（0-1 μM；1 小时）对 BMDM 的基因表达谱没有显著影响。此外，它还能抑制 CMA 诱导的 TBK1[1] 磷酸化。在小鼠骨髓来源的巨噬细胞中，C-178（1 μM；1 小时）可降低 cdG、dsDNA、CMA 和 LPS 诱导的 Ifnb1 表达[1]。在小鼠胚胎成纤维细胞中，C-178（1 μM；0.5-4 小时）以时间依赖性方式抑制 CMA 诱导的 p-TBK1 和 STING 蛋白的产生[1]。
C-178 与 STING 的 Cys91 位点共价结合，阻断棕榈酰化诱导的 STING 聚集，从而抑制其激活。该化合物可抑制 HEK293T 细胞中 TBK1 的募集和磷酸化。C-178（0.01-1.25 μM）选择性地降低 HEK293 细胞中 STING 介导的 IFN-β 报告基因活性，但不影响 RIG-I 或 TBK1 介导的活性。该化合物能有效抑制小鼠细胞而非人细胞中的 STING 反应。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
由于我们注意到C-176的溶解度优于C-178，因此选择该化合物进行体内研究。首先，我们采用体内点击化学方法验证了该化合物靶向STING，并评估了C-176单次腹腔注射后的药代动力学特征。接下来，我们评估了C-176是否能够抑制CMA诱导的I型干扰素（IFN）的产生。值得注意的是，C-176预处理显著降低了CMA介导的血清I型IFN和IL-6水平的升高。因此，C-176在小鼠体内有效，并且正如共价抑制剂的预期，其较短的血清半衰期并不限制其体内抑制能力。为了评估C-176在自身炎症性疾病模型中拮抗STING的潜力，我们研究了其在Trex1−/−小鼠中的疗效。 Trex1−/−小鼠表现出由环磷酸鸟苷-AMP合成酶-STING通路持续激活引起的严重多器官炎症，并重现了人类艾卡迪-古蒂埃综合征的某些致病特征。我们已证实C-178能够抑制Trex1−/−小鼠细胞中的干扰素刺激基因，随后进行了为期两周的C-176体内疗效研究。值得注意的是，C-176治疗Trex1−/−小鼠后，其血清中I型干扰素水平显著降低，心脏炎症指标也得到显著抑制。野生型小鼠接受C-176治疗两周后未出现明显的毒性反应。接下来，我们对Trex1−/−小鼠进行了为期三个月的C-176试验，结果表明，C-176显著改善了多种全身炎症症状。因此，C-176 可减轻小鼠体内 STING 相关自身炎症性疾病 [1]。
体内研究已证实 C-178 具有抑制 STING 介导的炎症反应的能力。该化合物可抑制小鼠细胞中由不同 STING 激活剂诱导的 STING 反应。需要进一步的体内研究来全面评估其在治疗 STING 相关炎症和自身免疫性疾病方面的潜力。 |
| 酶活实验 |
竞争性分析[1]
表达Flag-STING的HEK293T细胞与指定化合物孵育，1小时后加入C-176-AL，孵育1小时。收集细胞于PBS中，并通过凝胶内分析C-176-AL介导的STING标记情况进行分析（参见“基于凝胶的化合物与STING结合分析”）。 基于凝胶的化合物与STING结合分析[1] 表达Flag-STING的HEK293T细胞在无血清培养基中与C-176-AL、C-175-AZ、碘乙酰胺叠氮化物（Thermo Fisher）或H-151-AL孵育，收集于PBS中，并通过反复冻融裂解细胞。将43微升裂解细胞与新鲜配制的“点击试剂”混合物处理，该混合物包含三(苄基三唑甲基)胺(TBTA)（每样品3微升，3 mM，溶于1:4 DMSO:叔丁醇）、四甲基罗丹明(TAMRA)叠氮化物、SiR叠氮化物(Spirochrome)或SiR炔烃(Spirochrome)（每样品2微升，1.25 mM，溶于DMSO）、新鲜配制的硫酸铜(CuSO4)（每样品1微升）和三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP)（每样品1微升），并在室温下孵育30分钟。反应通过加入还原性样品缓冲液终止。使用 Fusion FX（Vilber Lourmat）对凝胶内荧光进行可视化，并使用 Fusion capt advance 采集软件进行分析。 与二琥珀酰亚胺基辛二酸酯交联[1] 表达 Flag–mmSTING 的 HEK293T 细胞与 C-176 (1 μM) 或不与 C-176 (1 μM) 孵育 1 小时，然后用 DMSO 或 CMA (250 μg ml−1) 处理 2 小时。交联在 PBS 中进行，使用 1 mM 二琥珀酰亚胺基辛二酸酯 (DSS)（Thermo Fisher），DSS 用 DMSO 新鲜配制，室温孵育 1 小时。 C-178 的体外酶活性测定包括测量 STING 的激活和抑制。将 STING 蛋白与化合物和 STING 激活剂（例如 cGAMP）孵育。通过测量下游信号事件（例如 TBK1 磷酸化或 IRF3 二聚化）来评估 STING 的激活。 C-178 与 STING 的 Cys91 共价结合，阻止其棕榈酰化。 |
| 细胞实验 |
Western Blot 分析[1]
细胞类型： 小鼠骨髓来源巨噬细胞 (BMDM) 测试浓度： 0 μM；p-TBK1 和刺痛湿度诱导的纤维化细胞蛋白表达随时间推移而发生 [1]。0.125μM；0.25μM；0.5μM；1 μM 孵育时间： 1 小时 实验结果： 以剂量依赖的方式抑制 CMA 诱导的 p-TBK1 表达。 RT-PCR[1] 细胞类型： 小鼠骨髓来源巨噬细胞 (BMDM) 测试浓度： 1 μM 孵育时间： 1 小时 实验结果： BMDM 中 Ifnb1 表达下调。 C-178 的体外细胞实验包括用该化合物处理细胞（例如 HEK293T 或小鼠胚胎成纤维细胞），并测量 STING 介导的 IFN-β 报告基因活性或细胞因子产生。C-178 (0.01-1.25 μM) 选择性地降低 HEK293 细胞中 STING 介导的 IFN-β 报告基因活性。该化合物可阻止 TBK1 的募集和磷酸化，并抑制小鼠细胞而非人细胞中的 STING 反应。 |
| 动物实验 |
C57BL/6J小鼠（品系编号000664）购自Jackson Laboratories。TREX1缺陷小鼠由T. Lindahl31惠赠，并已回交至C57BL/6NJ品系超过10代。小鼠饲养于瑞士洛桑联邦理工学院（EPFL）的特定病原体清除（SPF）条件下。在药代动力学研究中，每只野生型小鼠腹腔注射750 nmol C-176（溶于200 μl玉米油，Sigma公司）。分别于注射后30分钟、2小时和4小时采集血液样本，并采用液相色谱-高分辨率质谱法（LC-HRMS）测定血清中C-176的浓度。为评估C-176的体内抑制作用，将8-12周龄的野生型小鼠分别注射溶剂或C-176。1小时或4小时后，给予浓度为224 mg/kg的CMA。四小时后，处死小鼠并收集血清，以检测CMA诱导的细胞因子水平。为评估H-151的体内抑制作用，将750 nmol H-151溶于200 μl含10% Tween-80的PBS溶液中，腹腔注射至野生型小鼠体内。1小时后，给予CMA（112 mg kg⁻¹），4小时后处死小鼠并收集血清。Trex1⁻/⁻小鼠的疗效研究如下：将7.5 μl C-176或DMSO溶于85 μl玉米油中，每天两次注射至2-5周龄的小鼠体内，连续11天。小鼠在CO₂麻醉箱中麻醉后，采用颈椎脱臼法处死。在毒理学研究中，8周龄小鼠每日注射562.5 nmol C-176，持续2周。第14天，用肝素锂抗凝管（Microvette CB 300 Hep-Lithium）采集血样，4℃离心后分离血浆，并储存于-80℃。使用DimensionXpand Plus（西门子医疗诊断公司）测定血浆参数。对于外周血细胞分析，用EDTA-K抗凝管（Microvette CB 300 EDTA K2）采集100 μl血液。使用ADVIA120血液分析仪（西门子医疗诊断公司）分析全血细胞计数。为了检测荧光素酶活性，将4-7周龄的Trex1−/−Ifnb1Δβ-luc/Δβ-luc报告基因小鼠32腹腔注射750 nmol H-151或DMSO（溶于200 μl含0.1% Tween-80的PBS缓冲液中），连续7天。对于体内成像，小鼠用异氟烷麻醉后，静脉注射15 mg kg−1 XenoLight D-荧光素（Perkin Elmer公司），该荧光素溶于等渗氯化钠溶液中。注射两分钟后，使用In-vivo Xtreme II成像仪（Bruker公司）定量光子通量，像素合并设置为8×8，积分时间为3分钟。动物实验已获得瑞士沃州消费与兽医事务局或德国德累斯顿州政府的批准，并严格按照相关法律法规进行[1]。
C-178 的体内动物研究通常涉及对 STING 相关炎症或自身免疫性疾病的小鼠模型进行给药。该化合物可抑制小鼠细胞中由特定激活剂诱导的 STING 反应。疗效评估指标包括炎症细胞因子水平、疾病严重程度和 STING 通路激活标志物。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
C-178 的药代动力学数据有限。该化合物的分子量为 322.27，分子式为 C17H10N2O5。它是一种 STING 共价抑制剂，可与 Cys91 结合。需要进一步的药代动力学研究来支持其作为治疗药物的开发。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
C-178 的临床前毒性研究有限。该化合物是一种强效且选择性的 STING 共价抑制剂，可抑制小鼠细胞而非人细胞中的 STING 反应。在进行临床开发之前，需要进行全面的毒理学评估。该化合物对小鼠 STING 的选择性高于人 STING，这可能会限制其治疗应用。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
先天免疫通路异常激活与多种疾病相关。对先天免疫通路分子机制的深入理解为靶向治疗带来了希望，但开发能够特异性作用于靶分子的药物仍然是一项挑战。本文报道了高效选择性小分子干扰素基因刺激因子（STING）拮抗剂的发现和表征。STING是细胞内DNA感应通路的核心信号组分。从机制上讲，这些化合物共价靶向预测的跨膜半胱氨酸残基91，从而阻断STING激活诱导的棕榈酰化。利用这些抑制剂，我们发现STING的棕榈酰化对其在Golgi体中组装成多聚体复合物至关重要，进而影响下游信号因子的募集。这些化合物及其衍生物能够降低人和小鼠细胞中STING介导的炎症细胞因子的产生。此外，我们发现这些小分子拮抗剂能够缓解小鼠自身炎症性疾病的病理特征。总之，我们的研究揭示了药物抑制STING的机制，并证明了靶向STING疗法在治疗自身炎症性疾病方面的潜力。[1]
C-178是一种强效且选择性的STING共价抑制剂，它与STING上的Cys91结合，阻断其棕榈酰化并抑制其激活。该化合物可抑制小鼠细胞而非人细胞中由特定激活剂诱导的STING反应。C-178选择性地降低HEK293细胞中STING介导的IFN-β报告基因活性，并阻止TBK1的募集和磷酸化。它被用于研究炎症和免疫中的STING通路。 |
| 分子式 |
C17H10N2O5
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|---|---|
| 分子量 |
322.27
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| 精确质量 |
322.059
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| 元素分析 |
C, 62.49; H, 5.59; N, 9.72; O, 22.20
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| CAS号 |
329198-87-0
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| 相关CAS号 |
329198-87-0
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| PubChem CID |
2866412
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid
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| LogP |
4.1
|
| tPSA |
101Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
508
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1=CC=C2C(=C1)C3=C(O2)C=C(C=C3)NC(=O)C4=CC=C(O4)[N+](=O)[O-]
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| InChi Key |
URUVDCCYSJEGQQ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H10N2O5/c20-17(14-7-8-16(24-14)19(21)22)18-10-5-6-12-11-3-1-2-4-13(11)23-15(12)9-10/h1-9H,(H,18,20)
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| 化学名 |
N-(Dibenzo[b,d]furan-3-yl)-5-nitrofuran-2-carboxamide
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| 别名 |
C178; C 178; STING inhibitor C-178; N-(dibenzo[b,d]furan-3-yl)-5-nitrofuran-2-carboxamide; N-(3-Dibenzofuranyl)-5-nitro-2-furancarboxamide; N-3-Dibenzofuranyl-5-nitro-2-furancarboxamide; N-?(3-?Dibenzofuranyl)-?5-?nitro-2-?furancarboxamide; N-dibenzofuran-3-yl-5-nitrofuran-2-carboxamide; C-178
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~41.67 mg/mL (~129.30 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1030 mL | 15.5149 mL | 31.0299 mL | |
| 5 mM | 0.6206 mL | 3.1030 mL | 6.2060 mL | |
| 10 mM | 0.3103 mL | 1.5515 mL | 3.1030 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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