| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 体外研究 (In Vitro) |
浓度为 50 μM、70 μM 和 100 μM 的顺式-十八碳烯酸 (CVA) 可刺激 γ 珠蛋白的产生,并诱导 K562、JK1 和转基因小鼠红系祖细胞分化[2]。此外,50 μM 的顺式-十八碳烯酸可提高苯胺阳性 JK-1 细胞的比例[2]。顺式-十八碳烯酸在 50 μg/ml 的浓度下,于 Tris-Cu 缓冲液(pH 7.4)中,在 37°C 光照条件下孵育 30 分钟后,可使 67.9% 的 T5 噬菌体失活。[1] 顺式-十八碳烯酸 (50 μM) 可诱导 K562 细胞分化,诱导后 48 小时,苯胺阳性细胞比例超过 20%。[2] 顺式-十八碳烯酸 (50 μM) 可随时间推移增加 JK-1 细胞中 γ-珠蛋白 mRNA 的水平,在 48 小时时显著增加,并在 96 小时达到峰值(通过 qRT-PCR 检测,与对照组相比增加约 8 倍)。在相同浓度下,它还能上调β-珠蛋白基因表达。[2]
顺式-十八碳烯酸 (50 μM) 可抑制 JK-1 细胞中 KLF1 的表达至对照水平的约 60% (P<0.05),这是通过诱导后 24 小时的 qRT-PCR 测定得出的。[2] 顺式-十八碳烯酸 (50 μM) 可增加 JK-1 细胞中胎儿血红蛋白的合成,通过碱性变性试验评估,与对照组相比,HbF 水平显著升高 (P<0.05);血红素 (40 μM) 用作阳性对照,但未能诱导 JK-1 细胞中 HbF 的显著表达。[2] 顺式-十八碳烯酸 (50 μM) 使苯胺阳性 JK-1 细胞的百分比从约 5%(对照组)增加到 72 小时时的约 30%。[2] 顺式-十八碳烯酸 (50 μM) 诱导转基因小鼠骨髓红系祖细胞 (TMbmEPSC) 形成 BFUe 集落,与对照组相比,BFUe 集落的百分比增加。[2] 顺式-十八碳烯酸 (50 μM) 在孵育 24 小时内增加 TMbmEPSC 中 γ-珠蛋白 mRNA 的表达,且该水平持续升高至 96 小时。[2] 顺式-十八碳烯酸 (50 μM)诱导TMbmEPSC分化,通过联苯胺-吉姆萨染色评估,结果显示诱导后24小时网织红细胞百分比更高。[2] 在用顺式-十八碳烯酸诱导前48小时用促红细胞生成素(2 U/ml)预分化JK-1细胞,可增强CVA诱导的γ-珠蛋白基因表达,但与单独使用CVA相比,EPO和CVA同时处理抑制了γ-珠蛋白mRNA的合成。[2] 在JK-1细胞中抑制Elovl5(用40 μM环酸)或Δ9-去饱和酶(用10 μM异氧杂环己烯酸)可完全抑制顺式-十八碳烯酸诱导的γ-珠蛋白表达;抑制后 48 小时外源添加顺式十八碳烯酸 (50 μM) 未能挽救 γ-珠蛋白表达。[2] 抑制 TMbmEPSC 中的 Elovl5 或 Δ9-去饱和酶也降低了顺式十八碳烯酸诱导的 γ-珠蛋白基因表达和 BFUe 形成能力,但异氧苯酚处理增强了 BFUe 的形成。[2] |
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| 细胞实验 |
细胞分化实验[2]
细胞类型: K562 细胞 测试浓度: 50 μM、70 μM 和 100 μM 孵育时间: 48 和 120 小时 实验结果: 在 K562 细胞中,诱导分化似乎呈浓度依赖性,其中 50 μM CVA 是最有效的浓度,在与 CVA 孵育 48 小时后,超过 20% 的 K562 细胞对苯胺染色呈阳性。 T5 噬菌体灭活实验: 将 T5 噬菌体暴露于含有 1.21 g Tris-羟甲基氨基甲烷、5.8 g NaCl、75 mg CaCl2 和 100 μM 的 Tris-Cu 缓冲液(pH 7.4)中的测试化合物中。每升蒸馏水中加入 0.1 mg CuSO4。将测试化合物(终浓度 50 μg/ml)溶解于 300 mM NaOH 溶液中,然后加入噬菌体悬液中,使 NaOH 的终浓度为 30 mM。将等体积的测试噬菌体和对照噬菌体在 37°C 下避光孵育 30 分钟。处理后,采用琼脂层法测定噬菌体滴度,每个处理重复三次。数据以与对照组相比的噬菌斑形成单位减少百分比表示。[1] 细胞培养和分化实验: K562 和 JK-1 细胞培养于添加 20% 胎牛血清和青霉素/链霉素(100 U/ml 青霉素,200 μg/ml 链霉素)的 RPMI 1640 培养基中。细胞以 1.5×10^4 个细胞/ml 的密度接种,并在 37°C、5% CO2 的湿润环境中培养。通过添加特定浓度(50、75、100 μM)的顺式-十八碳烯酸进行诱导,诱导时间各不相同。使用台盼蓝染色法进行活细胞计数。使用联苯胺染色法检测血红蛋白化细胞的积累。使用联苯胺-吉姆萨染色和 May-Grumwald-吉姆萨染色法对细胞涂片进行染色,以确定细胞形态。[2] RNA 分离和定量实时 PCR: 使用 TRIZOL 从细胞中分离 RNA,用 DNase I 处理,并使用 RNA 纯化试剂盒进行纯化。使用随机引物和 oligo dT 组合,通过逆转录系统以等量总 RNA 为模板合成互补 DNA。采用实时荧光定量PCR法,以GAPDH为内参,定量分析γ-珠蛋白、β-珠蛋白和KLF1基因的表达。PCR反应条件:95℃变性15秒,60℃退火1分钟,72℃延伸1分钟,最多进行50个循环。[2] 胎儿血红蛋白测定: 细胞经450g离心收集,用磷酸盐缓冲液(pH 7.2)洗涤两次,并用10%皂苷PBS溶液裂解。混合物以300g离心10分钟。上清液中的成人血红蛋白用Drabkin试剂变性30分钟,然后用饱和硫酸铵沉淀。然后使用分光光度计在 415 nm 处测定胎儿血红蛋白的吸光度。[2] 克隆形成试验(BFUe 集落形成): 将 TMbmEPSCs 以 5×10^3 个细胞的密度培养在含有半固体培养基的 35 mm 培养皿中:Isocov 改良 Dulbecco 培养基,补充 20% 胎牛血清、200 U/ml 青霉素、250 μg/ml 链霉素、2 mM L-谷氨酰胺和 0.9% 甲基纤维素,在 37°C、5% CO2 的湿润环境中培养。每天对培养皿进行计数,以寻找含有 65 个或更多血红蛋白化细胞的大聚集体(BFUe 集落)。[2] 骨髓细胞的分离: 使用 1× PBS 从转基因小鼠的股骨中冲洗出小鼠骨髓。用 1× PBS 洗涤骨髓细胞两次。造血祖细胞通过贴壁法富集,随后以 2×10^6 个细胞/ml 的密度接种于添加了 20% 胎牛血清、250 单位/ml 青霉素和 200 μg/ml 链霉素的 IMDM 培养基中,并在 37°C、5% CO2 的湿润环境中培养。[2] 酶抑制研究: 为了评估脂肪酸延长酶 5 (Elovl5) 和 Δ9-去饱和酶的作用,在培养开始时分别用环戊二酸 (40 μM) 或异戊二酸 (10 μM) 处理 JK-1 细胞和 TMbmEPSCs。然后加入顺式-十八碳烯酸 (50 μM) 以诱导 γ-珠蛋白表达。在拯救实验中,抑制 48 小时后加入 50 μM 的顺式十八碳烯酸,48 小时后检测 γ-珠蛋白表达或 BFUe 集落形成。[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
浓度为 50 μM 的顺式-十八碳烯酸在 96 小时内未显著改变 JK-1 细胞的活力或增殖(通过台盼蓝染色评估,细胞生长速率与未诱导的对照组相当)。较高浓度的顺式-十八碳烯酸(高于 50 μM)则显著影响 JK-1 细胞的活力(P<0.05)[2]。在 K562 细胞中,根据之前的研究,使用了亚毒性浓度的顺式-十八碳烯酸(50、75 和 100 μM),其中 50 μM 是最有效的诱导分化且无毒性的浓度[2]。在 Tris-Cu 缓冲液中使用的铜离子 (Cu2+) 浓度 (0.1 mg/L) 在 T5 噬菌体灭活试验中未显示出对宿主细菌(大肠杆菌)的毒性[1]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
顺式十八碳烯酸是十八碳烯酸的顺式异构体,也是顺式十八碳烯酸酯(1-)的共轭酸。十八碳烯酸是大肠杆菌(K12 和 MG1655 菌株)中发现或产生的代谢产物。据报道,顺式十八碳烯酸也存在于巴西杆菌、颤藻属以及其他具有相关数据的生物体中。另见:鳕鱼肝油(部分);磷虾油(部分)。油酸(注:已移至此处)。
顺式十八碳烯酸是荚膜红假单胞菌的主要抗病毒化合物,本研究首次报道了不饱和脂肪酸对无包膜病毒(T5噬菌体)的灭活作用。[1] 顺式十八碳烯酸是一种18碳n-7单不饱和脂肪酸,由人肝脂肪酸延长酶5 (Elovl5) 生物合成。它经Δ9-去饱和酶转化为共轭亚油酸(9-顺式,11-反式-十八碳烯酸)。研究表明,顺式-十八碳烯酸(cis-vaccenic acid)可通过Elovl5调控其合成,从而调节mTORC2-Akt-FOXO1通路。[2] 顺式-十八碳烯酸可诱导胎儿血红蛋白(HbF)合成,并具有作为镰状细胞贫血和β-地中海贫血药物治疗诱导剂的潜力。γ-珠蛋白的诱导与KLF1的抑制有关,而KLF1的抑制反过来又会下调BCL11A的表达。抑制 Elovl5 或 Δ9-去饱和酶可消除 γ-珠蛋白的诱导作用,提示顺式-十八碳烯酸可能通过下游代谢物间接调节 γ-珠蛋白的表达。[2] 顺式-十八碳烯酸优先作用于相对早期的红系前体细胞,改变祖细胞的珠蛋白转录。它可诱导 JK-1 细胞分化为红系细胞,这可通过联苯胺-吉姆萨染色进行评估,并且促红细胞生成素是顺式-十八碳烯酸诱导 γ-珠蛋白表达的最佳条件。[2] |
| 分子式 |
C18H34O2
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|---|---|
| 精确质量 |
282.255
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| CAS号 |
506-17-2
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| 相关CAS号 |
trans-Vaccenic acid;693-72-1;cis-Vaccenic acid-d13
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| PubChem CID |
5282761
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| 外观&性状 |
Colorless to light yellow liquid
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| 密度 |
0.9±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
398.2±11.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
14-15ºC(lit.)
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| 闪点 |
295.0±14.4 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.0 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.467
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| LogP |
7.7
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| tPSA |
37.3
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
2
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| 可旋转键数目(RBC) |
15
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| 重原子数目 |
20
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| 分子复杂度/Complexity |
234
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCCCCC/C=C\CCCCCCCCCC(=O)O
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| InChi Key |
UWHZIFQPPBDJPM-FPLPWBNLSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H34O2/c1-2-3-4-5-6-7-8-9-10-11-12-13-14-15-16-17-18(19)20/h7-8H,2-6,9-17H2,1H3,(H,19,20)/b8-7-
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| 化学名 |
(Z)-octadec-11-enoic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 50 mg/mL (177.02 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。