| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
CYM-5442 is a highly selective agonist of the Sphingosine 1-Phosphate Receptor 1 (S1P1). It activates S1P1 in vitro with an EC50 of 1.35 ± 0.25 nM in a CRE reporter assay [1]. It exhibits no activity on S1P2, S1P3, and S1P4, and only 20% activity at 10 μM on S1P5 [1]. Unlike S1P, CYM-5442 does not require the headgroup interaction residues R120 and E121 on S1P1 for receptor activation [1].
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 P32 正磷酸盐标记的细胞中，CYM5442（0.5 µM；0–60 分钟；HEK293 细胞）处理会以时间依赖性方式诱导 S1P1 磷酸化 [1]。在 S1P1 转染的 CHO-K1 细胞中，EC50 为 46 nM 的 CYM5442 刺激 S1P1 依赖性 p42/p44-MAPK 磷酸化。当 CYM5442 添加到 R120 丙氨酸 (R120A) 突变体时，仍然可以维持 p42/p44-MAPK 活性（EC50 为 67 nM）。在 E121A S1P1 细胞中，CYM-5442 以浓度依赖性方式激活 p42/p44-MAPK，平均 EC50 值为 134 nM [1]。
CYM-5442 在 CRE 报告基因实验中浓度依赖性地激活 S1P1，EC50 为 1.35 ± 0.25 nM，其效价高于 SEW2871 (EC50 = 29 nM) 和 CYM-5181 (EC50 = 3.4 nM) [1]。 在稳定表达 S1P1-GFP 的 HEK293 细胞中，CYM-5442 (500 nM) 诱导时间依赖性的 S1P1 磷酸化（通过 P32-正磷酸盐标记检测），并在 45 分钟内诱导 S1P1 从质膜内化至胞质囊泡（通过荧光显微镜观察）。这些效应可被选择性 S1P1 拮抗剂 W146 (10 μM) 预孵育所阻断 [1]。 CYM-5442 还诱导 S1P1 多聚泛素化，其程度与完全激动剂 AFD-R 相当。这种泛素化可被 W146 预孵育所阻断 [1]。 在表达野生型 S1P1 的 CHO-K1 细胞中，CYM-5442 激活 p42/p44 MAPK 磷酸化的 EC50 为 46 nM (Emax 为 S1P 的 70%)。与 S1P 不同的是，CYM-5442 在 S1P1 突变体 (R120A 和 E121A) 中仍能激活 p42/p44 MAPK，EC50 分别为 67 nM 和 134 nM，表明其不依赖这些头基相互作用残基 [1]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
用 CYM5442（1 mg/kg；腹膜内注射；每天；持续 5 天）治疗的成年雄性白化 Wistar 大鼠在视觉诱发电位 (VEP) 下表现出视觉功能的保留。当给小鼠施用 CYM 而不是载体时，视网膜神经纤维层 (RNFL) 明显变厚 [2]。
诱导淋巴细胞减少: 在 C57BL/6 小鼠中，腹腔注射 CYM-5442 (10 mg/kg) 在 5 小时内诱导急性淋巴细胞减少，与溶媒对照组相比，白细胞计数减少 64%，B220+ B 细胞减少 63%，CD4+ T 细胞减少 83%，CD8+ T 细胞减少 84%。ED50 值分别为：CD4+ 细胞 0.5 mg/kg，CD8+ 细胞 1.0 mg/kg，B220+ 细胞 2.0 mg/kg。最大淋巴细胞减少效果在血清浓度 50-100 nM 时达到。该淋巴细胞减少效应在药物清除后可逆，并可被 S1P1 拮抗剂 W146 (20 mg/kg) 阻断，证实其依赖于 S1P1 [1]。 视网膜缺血的神经保护作用: 在成年雄性 Wistar 大鼠内皮素-1 (ET-1) 诱导的视网膜神经节细胞 (RGC) 损失模型中，腹腔注射 CYM-5442 (1 mg/kg/天，连续 5 天，于 ET-1 注射后 1 小时开始) 显著保留了视觉功能。治疗组动物的图形视觉诱发电位 (VEP) 振幅为 11.95 ± 0.86 μV，而溶媒治疗组为 3.47 ± 1.20 μV。治疗组动物的视网膜神经纤维层 (RNFL) 厚度 (93.62 ± 3.22 μm) 显著大于溶媒治疗组 (77.72 ± 0.35 μm)。治疗组视网膜中 Brn3a+ RGC 数量 (76,540 ± 303 个细胞/视网膜) 显著高于溶媒治疗组 (52,426 ± 1,932 个细胞/视网膜)。与溶媒治疗组 (13,299 ± 432 个细胞/mm²) 相比，CYM-5442 治疗与视网膜中 cleaved caspase-3 阳性细胞显著减少 (1,073 ± 89 个细胞/mm²) 相关，表明凋亡减少 [2]。 |
| 细胞实验 |
蛋白质印迹分析[1]
细胞类型： HEK293 细胞稳定表达在羧基末端与 GFP 融合的 S1P1 测试浓度： 0.5 µM 孵育时间：0分钟、2分钟、5分钟、10分钟、30分钟、60分钟 实验结果：受刺激的S1P1以时间依赖性方式磷酸化。 CRE 报告基因实验: 使用稳定表达人 S1P1 和 CRE-β-内酰胺酶报告基因的 CHO-K1 细胞。细胞与毛喉素 (2 μM) 和递增浓度的 CYM-5442 共同孵育 2 小时。通过检测荧光底物 CC4-AM 裂解产生的 β-内酰胺酶表达，来测定激动剂对毛喉素诱导的 cAMP 累积的抑制作用，以 SEW2871 作为阳性对照 [1]。 S1P1-GFP 内化和泛素化实验: 使用稳定表达 S1P1-GFP 的 HEK293 细胞。对于内化实验，细胞用 CYM-5442 (500 nM) 处理 45 分钟，固定后通过荧光显微镜观察。对于泛素化实验，细胞用激动剂处理 1 小时，裂解后使用 GFP 抗体免疫沉淀 S1P1-GFP，然后用泛素抗体进行免疫印迹 [1]。 p42/p44 MAPK 激活 ELISA: 使用瞬时转染野生型或突变型 (R120A, E121A) S1P1 cDNA 的 CHO-K1 细胞，细胞血清饥饿 4 小时。然后用递增浓度的 CYM-5442 刺激细胞 5 分钟（经实验确定为最大反应时间）。收集细胞裂解液，使用特异性检测磷酸化 p42/p44 MAPK 的 ELISA 试剂盒进行分析 [1]。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：成年雄性Wistar白化大鼠（8-10周龄；180-230克）感染眼内皮素-1（ET-1）[2]
剂量：1毫克/千克 给药途径：腹腔注射（ip）；常规；持续5天 实验结果：视觉诱发电位（VEP）显示视觉功能得以保留。视网膜神经节细胞（RGC）数量显著增加。 淋巴细胞减少症研究（小鼠）：雄性C57BL/6小鼠（30克）腹腔注射CYM-5442（0.3-10毫克/千克）或载体（无菌水），注射体积为300微升。在拮抗剂研究中，小鼠在接受 CYM-5442 (2 mg/kg) 给药前 30 分钟腹腔注射 W146 (20 mg/kg) 或载体（10% DMSO，25% Tween-20 的无菌水）。在指定时间点（1、3、5、8、16 小时）采集血液样本，置于 EDTA 抗凝管中。使用全自动兽用血液分析仪进行白细胞计数。淋巴细胞亚群（B220+、CD4+、CD8+）通过流式细胞术进行分析 [1]。药代动力学研究（大鼠）：Sprague Dawley 大鼠分别以 1 mg/kg 的剂量经颈静脉注射或 2 mg/kg 的剂量经灌胃给予 CYM-5442。该化合物配制成浓度为 1 mg/mL 的溶液，溶剂为 10:10:80（DMSO:Tween-80:水，体积比）。分别于给药后 5 分钟、15 分钟、30 分钟、1 小时、2 小时、4 小时、6 小时和 8 小时采集血液样本。通过离心分离获得血浆。采用 LC-MS/MS 法测定化合物浓度 [1]。 脑分布研究（小鼠）：C57BL/6 小鼠腹腔注射 CYM-5442（10 mg/kg）。给药后 2 小时采集血液和脑组织样本。称量脑组织样本并用乙腈提取。采用 LC-MS/MS 法测定血浆和脑匀浆中的化合物浓度 [1]。 视网膜神经保护研究（大鼠）：成年雄性Wistar大鼠（8-10周龄，180-230 g）右眼单次玻璃体内注射内皮素-1 (ET-1)（2 μL，浓度为10 pmol/μL）。一小时后，连续五天，每天腹腔注射CYM-5442（1 mg/kg，溶于PBS）或载体（PBS）。每日称量动物体重以计算剂量。治疗结束后（ET-1注射后5-7天），进行电生理记录（VEP、PERG、ERG）和OCT成像。收集视网膜进行Brn3a免疫组织化学染色和裂解型caspase-3分析[2]。 |
| 参考文献 |
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| 分子式 |
C23H28CLN3O4
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|---|---|
| 分子量 |
445.939125061035
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| 精确质量 |
445.176
|
| CAS号 |
1783987-80-3
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| 相关CAS号 |
CYM5442;1094042-01-9
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| PubChem CID |
90488865
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| tPSA |
89.6
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
9
|
| 重原子数目 |
31
|
| 分子复杂度/Complexity |
525
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
Cl.O1C(C2C=CC(=C(C=2)OCC)OCC)=NC(C2=CC=CC3=C2CCC3NCCO)=N1
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| InChi Key |
KMZLVDAVGXYZDA-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H27N3O4.ClH/c1-3-28-20-11-8-15(14-21(20)29-4-2)23-25-22(26-30-23)18-7-5-6-17-16(18)9-10-19(17)24-12-13-27;/h5-8,11,14,19,24,27H,3-4,9-10,12-13H2,1-2H3;1H
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| 化学名 |
2-[[4-[5-(3,4-diethoxyphenyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]-2,3-dihydro-1H-inden-1-yl]amino]ethanol;hydrochloride
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| 别名 |
CYM 5442 HCl; CYM-5442 HCl
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2425 mL | 11.2123 mL | 22.4245 mL | |
| 5 mM | 0.4485 mL | 2.2425 mL | 4.4849 mL | |
| 10 mM | 0.2242 mL | 1.1212 mL | 2.2425 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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