| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 靶点 |
Sphingosine 1-phosphate (S1P1) receptor ( EC50 = 1.35 nM )
CYM-5442 is a highly selective agonist of the Sphingosine 1-Phosphate Receptor 1 (S1P1). It activates S1P1 in vitro with an EC50 of 1.35 ± 0.25 nM in a CRE reporter assay [1]. It exhibits no activity on S1P2, S1P3, and S1P4, and only 20% activity at 10 μM on S1P5 [1]. Unlike S1P, CYM-5442 does not require the headgroup interaction residues R120 and E121 on S1P1 for receptor activation [1]. S1P1 receptor (Sphingosine-1-phosphate receptor 1) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在CRE报告基因检测中，CYM-5442以浓度依赖的方式激活S1P1，其EC50为1.35 ± 0.25 nM，效力高于SEW2871（EC50 = 29 nM）和CYM-5181（EC50 = 3.4 nM）[1]。在稳定表达S1P1-GFP的HEK293细胞中，CYM-5442（500 nM）诱导了S1P1的时间依赖性磷酸化（通过P32-正磷酸盐标记检测），并在45分钟内诱导S1P1从质膜内转运至胞质囊泡，这可通过荧光显微镜观察到。这些作用可被选择性S1P1拮抗剂W146（10 μM）预孵育所消除[1]。
CYM-5442 也诱导了 S1P1 的多聚泛素化，其程度与完全激动剂 AFD-R 相似。这种泛素化可被 W146 预孵育阻断 [1]。 在表达野生型 S1P1 的 CHO-K1 细胞中，CYM-5442 激活了 p42/p44 MAPK 的磷酸化，EC50 为 46 nM（Emax = S1P 的 70%）。与 S1P 不同，CYM-5442 保留了激活 S1P1 突变体（R120A 和 E121A）中 p42/p44 MAPK 的能力，其 EC50 值分别为 67 nM 和 134 nM，表明它不需要这些头部基团相互作用残基 [1]。 用 CYM5442（0.5 μM；0-60 分钟；HEK293 细胞）处理可以时间依赖性方式刺激 P32 正磷酸盐标记细胞中的 S1P1 磷酸化 [1]。中等/p44-MAPK 磷酸化，EC50 为 46 nM。丙氨酸 R120 (R120A) 突变体在用 CYM5442 染色后保留了 p42/p44-MAPK 活性（EC50 为 67 nM）。 CYM5442 以浓度依赖的方式激活 E121A S1P1 细胞中的 p42/p44-MAPK，平均 EC50 值为 134 nM [1]。蛋白质印迹分析[1] 细胞系：稳定表达羧基末端融合 GFP 的 S1P1 的 HEK293 细胞 浓度：0.5 µM 孵育时间：0 分钟、2 分钟、5 分钟、10 分钟、30 分钟、60 分钟 结果：CYM5442 以浓度依赖的方式刺激 S1P1 磷酸化。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
淋巴细胞减少症的诱导：在C57BL/6小鼠中，腹腔注射CYM-5442（10 mg/kg）可在5小时内诱导急性淋巴细胞减少症，与对照组相比，白细胞计数降低64%，B220+ B细胞降低63%，CD4+ T细胞降低83%，CD8+ T细胞降低84%。CD4+、CD8+和B220+细胞的ED50值分别为0.5 mg/kg、1.0 mg/kg和2.0 mg/kg。在血清浓度为50-100 nM时达到最大淋巴细胞减少症。药物清除后，淋巴细胞减少症可逆，且可被S1P1受体拮抗剂W146（20 mg/kg）阻断，证实了该作用依赖于S1P1受体[1]。
视网膜缺血的神经保护作用：在内皮素-1 (ET-1) 诱导视网膜神经节细胞 (RGC) 丢失的成年雄性 Wistar 大鼠中，腹腔注射 CYM-5442（1 mg/kg/天，连续 5 天，ET-1 注射后 1 小时开始）可显著保护视觉功能。治疗组动物的模式视觉诱发电位 (VEP) 振幅为 11.95 ± 0.86 μV，而对照组动物为 3.47 ± 1.20 μV。治疗组动物的视网膜神经纤维层 (RNFL) 厚度 (93.62 ± 3.22 μm) 显著高于对照组动物 (77.72 ± 0.35 μm)。经治疗的视网膜中 Brn3a+ RGC 细胞计数（76,540 ± 303 个细胞/视网膜）显著高于载体对照组（52,426 ± 1,932 个细胞/视网膜）。与载体对照组（13,299 ± 432 个细胞/mm²）相比，CYM-5442 治疗显著降低了视网膜裂解 caspase-3 阳性细胞的数量（1,073 ± 89 个细胞/mm²），表明细胞凋亡减少 [2]。 CYM5442（1 mg/kg；腹腔注射；每日一次；持续 5 天；雄性白化 Wistar 小鼠）治疗显示庭院诱发电位 (VEP) 下庭院功能得以保留。与载体对照组相比，CYM 治疗组动物的视网膜神经纤维层 (RNFL) 显著增厚 [2]。1 mg/kg 给药途径：腹腔注射；每日一次；持续 5 天的结果：视觉诱发电位 (VEP) 显示视觉功能得以保留。视网膜神经节细胞 (RGC) 的数量显著增加。 在内皮素-1 (ET-1) 诱导的视网膜神经节细胞 (RGC) 丢失大鼠模型中，腹腔注射 CYM-5442（1 mg/kg，连续 5 天）显著保护了视觉功能，通过模式视觉诱发电位 (VEP) 测量，平均振幅为 115.5 ± 0.86 μV，而载体对照组为 3.47 ± 1.20 μV (n=12, p<0.05) [2]。 CYM-5442 治疗显著保护了视网膜神经纤维层 (RNFL) 厚度，通过光学相干断层扫描 (OCT) 测量：93.62 ± 3.22 μm vs 载体组 77.72 ± 0.35 μm (n=12, p<0.05)。 [2]. Brn3a免疫组化结果显示，CYM-5442显著提高了RGC的存活率，每视网膜中Brn3a阳性细胞数为76,540 ± 303个，而载体组为52,426 ± 1,932个（n=9，p=0.05）[2]. CYM-5442给药显著降低了裂解型caspase-3阳性细胞的数量（1,073 ± 89个/mm²），而载体组为13,299 ± 432个/mm²，表明细胞凋亡水平降低（p=0.05）[2]. |
| 细胞实验 |
CRE报告基因检测：使用稳定表达人S1P1和CRE-β-内酰胺酶报告基因的CHO-K1细胞。将细胞与福斯克林（2 μM）和递增浓度的CYM-5442孵育2小时。通过检测荧光底物CC4-AM的裂解来测定β-内酰胺酶的表达，从而评估激动剂介导的福斯克林诱导的cAMP积累的抑制作用，并以SEW2871作为阳性对照[1]。
S1P1-GFP内吞和泛素化检测：使用稳定表达S1P1-GFP的HEK293细胞。对于内吞作用检测，将细胞用CYM-5442（500 nM）处理45分钟，固定后通过荧光显微镜观察。对于泛素化，细胞用激动剂处理 1 小时后裂解，使用 GFP 抗体对 S1P1-GFP 进行免疫沉淀，然后用泛素抗体进行免疫印迹分析 [1]。 p42/p44 MAPK 激活 ELISA：将 CHO-K1 细胞瞬时转染野生型或突变型（R120A、E121A）S1P1 cDNA，并在无血清培养基中培养 4 小时。用递增浓度的 CYM-5442 刺激细胞 5 分钟（根据经验确定为最大浓度）。根据制造商的说明[1]，使用针对磷酸化p42/p44 MAPK的ELISA试剂盒分析细胞裂解液。 细胞系：稳定表达羧基末端融合GFP的S1P1的HEK293细胞 浓度：0.5 µM 孵育时间：0分钟、2分钟、5分钟、10分钟、30分钟、60分钟 结果：S1P1磷酸化呈时间依赖性增加。 |
| 动物实验 |
淋巴细胞减少症研究（小鼠）：雄性C57BL/6小鼠（30 g）腹腔注射CYM-5442（0.3-10 mg/kg）或溶剂（无菌水），注射体积为300 μL。拮抗剂研究中，小鼠在注射CYM-5442（2 mg/kg）前30分钟腹腔注射W146（20 mg/kg）或溶剂（10% DMSO，25% Tween-20的无菌水）。在指定时间点（1、3、5、8、16小时）采集血液，置于EDTA抗凝管中。使用全自动兽用血液分析仪进行白细胞计数。淋巴细胞亚群（B220+、CD4+、CD8+）采用流式细胞术进行分析[1]。
药代动力学研究（大鼠）：Sprague Dawley大鼠分别以1 mg/kg的剂量经颈静脉（静脉注射）或2 mg/kg的剂量经灌胃给予CYM-5442。该化合物配制成浓度为1 mg/mL的溶液，溶剂为10:10:80（DMSO:Tween-80:水，体积比）。分别于给药后5分钟、15分钟、30分钟、1小时、2小时、4小时、6小时和8小时采集血液样本。通过离心分离获得血浆。采用LC-MS/MS法测定化合物浓度[1]。 脑分布研究（小鼠）：C57BL/6小鼠腹腔注射CYM-5442（10 mg/kg）。于给药后2小时采集血液和脑组织样本。脑组织样本称重后用乙腈提取。血浆和脑匀浆中的化合物浓度采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定[1]。 视网膜神经保护研究（大鼠）：成年雄性Wistar大鼠（8-10周龄，180-230 g）右眼单次玻璃体内注射内皮素-1（ET-1）（2 μL，10 pmol/μL）。一小时后，腹腔注射CYM-5442（1 mg/kg，溶于PBS）或载体（PBS），连续5天。每日称量动物体重以计算剂量。治疗结束后（ET-1注射后5-7天）进行电生理记录（VEP、PERG、ERG）和光学相干断层扫描（OCT）成像。收集视网膜用于Brn3a免疫组织化学和裂解型caspase-3分析[2]。 成年雄性Wistar白化大鼠（8-10周龄；180-230 g）感染眼内皮素-1 (ET-1) 1 mg/kg 腹腔注射；每日一次；持续5天 使用成年雄性Wistar白化大鼠（8-10周龄，180-230 g）。在异氟烷/氧气麻醉下，右眼玻璃体内注射2 μl ET-1（10 pmol/μl）以诱导选择性视网膜神经节细胞(RGC)丢失。ET-1注射1小时后，腹腔注射CYM-5442（1 mg/kg，溶于磷酸盐缓冲液，PBS）或载体（PBS），每日一次，连续5天。每天对动物进行称重以计算剂量。治疗结束后（ET-1注射后一周），进行电生理记录（VEP、PERG、ERG）和OCT成像。随后，通过腹腔注射戊巴比妥钠过量处死大鼠，并对视网膜进行Brn3a和cleaved caspase-3免疫组织化学染色。[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在大鼠中，静脉注射（1 mg/kg）后，CYM-5442的半衰期（t1/2）为3.05 ± 0.37小时，清除率（Cl）为72.90 ± 11.70 mL/min/kg，分布容积（Vss）为15.60 ± 3.50 L。口服（2 mg/kg）后，半衰期为4.00 ± 1.45小时，Cmax为36 ± 7.2 nM，Tmax为1.17 ± 0.76小时，口服生物利用度为20.5 ± 4.67% [1]。在小鼠中，腹腔注射CYM-5442（10 mg/kg，持续2小时）后，CYM-5442显示出显著的中枢神经系统穿透性，脑浓度为13.7 ± 2.9 μM，血浆浓度为1.08 ± 0.3 μM，脑血浆浓度比约为13:1 [1]。在啮齿动物中，CYM-5442能够轻易穿过血脑屏障，脑血浆浓度比约为13:1。当血清浓度在50至100 nM之间时，其作用接近最大。[2]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
文献中未描述CYM-5442的具体毒性数据（例如LD50、肝毒性、肾毒性）。然而，在一项视网膜神经保护研究中，CYM-5442以1 mg/kg的剂量腹腔注射，连续五天，未报告对整体健康或行为的不良影响[2]。在一项小鼠研究中，腹腔注射剂量高达10 mg/kg，也未报告明显的毒性[1]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
CYM5442 是一种恶二唑环状化合物。
CYM-5442 是一种能高度穿透中枢神经系统的分子。它无需与 S1P 样头部基团相互作用即可发挥完全的药理作用。CYM-5442 通过 S1P1 受体发出信号，与 Akt 和 ERK 的激活相关，而 Akt 和 ERK 是抑制细胞凋亡的主要因素。CYM-5442 可降低裂解型 caspase-3 的水平，表明其具有抗凋亡机制。它可能成为治疗视网膜退行性疾病（包括缺血性神经病变、急性视网膜血管阻塞、糖尿病视网膜病变和青光眼）的新型治疗药物。CYM-5442 以剂量依赖的方式降低 CD4+/CD8+ 细胞计数。[2] |
| 分子式 |
C23H27N3O4
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|---|---|
| 分子量 |
409.486
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| 精确质量 |
409.2
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| 元素分析 |
C, 67.46; H, 6.65; N, 10.26; O, 15.63
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| CAS号 |
1094042-01-9
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| 相关CAS号 |
CYM5442 hydrochloride; 1783987-80-3
|
| PubChem CID |
25110406
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| 外观&性状 |
Light yellow to light brown solid powder
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| LogP |
4.161
|
| tPSA |
89.64
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
9
|
| 重原子数目 |
30
|
| 分子复杂度/Complexity |
525
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O1C(C2C([H])=C([H])C(=C(C=2[H])OC([H])([H])C([H])([H])[H])OC([H])([H])C([H])([H])[H])=NC(C2C([H])=C([H])C([H])=C3C=2C([H])([H])C([H])([H])C3([H])N([H])C([H])([H])C([H])([H])O[H])=N1
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| InChi Key |
NUIKTBLZSPQGCP-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H27N3O4/c1-3-28-20-11-8-15(14-21(20)29-4-2)23-25-22(26-30-23)18-7-5-6-17-16(18)9-10-19(17)24-12-13-27/h5-8,11,14,19,24,27H,3-4,9-10,12-13H2,1-2H3
|
| 化学名 |
2-[[4-[5-(3,4-diethoxyphenyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]-2,3-dihydro-1H-inden-1-yl]amino]ethanol
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| 别名 |
CYM 5442; CYM-5442; 1094042-01-9; CYM5,442; CYM-5,442; RefChem:130105; CYM 5,442; CYM5442
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~2.6 mg/mL (~6.4 mM）
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4421 mL | 12.2103 mL | 24.4206 mL | |
| 5 mM | 0.4884 mL | 2.4421 mL | 4.8841 mL | |
| 10 mM | 0.2442 mL | 1.2210 mL | 2.4421 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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