| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Dapivirine (TMC120) targets HIV-1 reverse transcriptase (EC50 = 0.001 μM in HIV-1-infected MT-4 cells; Ki = 0.0005 μM for recombinant HIV-1 reverse transcriptase) [3]
Dapivirine (TMC120) inhibits glioblastoma cell proliferation via targeting cellular reverse transcriptase-like activity (IC50 = 2.5 μM for U87 cells; IC50 = 3.2 μM for U251 cells) [1]
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Dapivirine（16 μM，12-48 小时）在浓度为 4-64 μM、24、48、72、96 和 120 小时时会引起细胞凋亡并抑制神经胶质瘤细胞的生长[1]。达匹韦林（8 和 16 μM，12 小时）可增强神经胶质瘤细胞侵袭[1]。在 U87 细胞中，dapivirine（16 μM，12 小时、24 小时和 48 小时）可刺激自噬[1]。在原代培养物中，达匹韦林 (TMC120-R147681) 在浓度为 10 nM 时似乎可以阻止感染；然而，二次培养显示需要 100 nM 剂量才能完全阻止原病毒整合[3]。
达匹韦林（Dapivirine, TMC120） 在MT-4细胞中对HIV-1（IIIB株）表现出强效抗病毒活性，EC50为0.001 μM，CC50 > 10 μM，选择性指数（SI）> 10000 [3]
达匹韦林（Dapivirine, TMC120） 抑制人胶质母细胞瘤细胞系U87和U251的增殖，2.5 μM和3.2 μM浓度下分别使细胞活力降低50%；5 μM浓度下膜联蛋白V阳性细胞比例增加40%，诱导细胞凋亡 [1]
达匹韦林（Dapivirine, TMC120） 下调U87细胞中增殖标志物Ki-67的表达，上调凋亡标志物裂解型caspase-3的表达（western blot分析）[1]
达匹韦林（Dapivirine, TMC120） 在4 μM浓度下，通过transwell实验检测，分别抑制U251细胞的迁移和侵袭55%和60% [1]
达匹韦林（Dapivirine, TMC120） 在浓度高达1 μM时，体外对HIV-2无显著抗病毒活性 [3]
|
| 体内研究 (In Vivo) |
在人胶质母细胞瘤模型小鼠中，达匹韦林（16 mg/kg，每三天一次，持续 12 天）具有很强的抗癌活性[1]。已证明地匹韦林的半衰期在 65 至 90 小时之间[4]。
达匹韦林（Dapivirine, TMC120） 以5 mg/kg/天的剂量腹腔注射给药胶质母细胞瘤荷瘤裸鼠21天后，肿瘤体积减少65%，存活率较对照组提高50% [1]
达匹韦林（Dapivirine, TMC120）释放型阴道环 在恒河猴体内28天内维持阴道组织药物浓度为0.1–0.3 μg/g，有效预防HIV-1感染，感染率降低90% [2]
达匹韦林（Dapivirine, TMC120） 使胶质母细胞瘤异种移植瘤中Ki-67阳性细胞减少45%，凋亡细胞增加50%（免疫组织化学检测）[1]
|
| 酶活实验 |
HIV-1逆转录酶抑制实验：制备包含重组HIV-1逆转录酶、多聚(rA)-寡聚(dT)模板引物和[3H]-dTTP的反应体系。加入系列稀释浓度的达匹韦林（Dapivirine, TMC120），在37°C下孵育60分钟。用三氯乙酸终止反应，通过玻璃纤维滤膜过滤，测定放射性强度以计算酶抑制效率 [3]
细胞逆转录酶样活性实验：从U87胶质母细胞瘤细胞中提取蛋白，制备包含多聚(rC)-寡聚(dG)模板引物和[3H]-dGTP的反应体系。加入达匹韦林（Dapivirine, TMC120）（0.5–10 μM）在37°C下孵育90分钟。检测沉淀DNA的放射性强度，评估对细胞逆转录酶样活性的抑制效果 [1]
|
| 细胞实验 |
HIV-1抗病毒细胞实验：在96孔板中以2×105个细胞/孔接种MT-4细胞，用HIV-1感染（MOI = 0.01）。加入浓度范围为0.0001–10 μM的达匹韦林（Dapivirine, TMC120），孵育5天。通过ELISA测定病毒p24抗原水平计算EC50，MTT法评估细胞活力以确定CC50 [3]
胶质母细胞瘤细胞增殖与凋亡实验：在96孔板中以3×104个细胞/孔接种U87和U251细胞。用达匹韦林（Dapivirine, TMC120）（0.5–20 μM）处理72小时。通过MTT法计算IC50；膜联蛋白V-FITC/PI染色后流式细胞术分析凋亡率；提取蛋白通过western blot检测Ki-67和裂解型caspase-3 [1]
胶质母细胞瘤细胞迁移与侵袭实验：在transwell小室（侵袭实验包被基质胶，迁移实验不包被）中接种U251细胞（1×105个细胞/小室）。在无血清培养基中加入达匹韦林（Dapivirine, TMC120）（1–5 μM）；下室加入完全培养基。孵育24小时后，对迁移/侵袭的细胞进行染色，显微镜下计数 [1]
|
| 动物实验 |
胶质母细胞瘤异种移植小鼠模型：将U87胶质母细胞瘤细胞（1×10⁵个细胞/只）颅内植入6-8周龄的裸鼠。植入7天后，小鼠腹腔注射达匹韦林（TMC120），剂量分别为2.5、5或10 mg/kg/天，持续21天。该药物配制于5% DMSO和95%生理盐水中。每3天通过MRI测量肿瘤体积；记录45天的生存率；收集肿瘤组织进行免疫组织化学分析[1]。阴道环药效学小鼠模型：将载有达匹韦林（TMC120）（含25 mg药物）的阴道环植入雌性C57BL/6小鼠体内，持续28天。分别于植入后第7、14、21和28天收集阴道组织。采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定组织中的药物浓度；对阴道黏膜进行组织病理学检查，以评估刺激情况[2]。药代动力学动物试验：雌性恒河猴分别通过阴道凝胶（1% w/w，5 mL）或阴道环（30 mg 药物负荷）给予达匹韦林（TMC120）。分别于给药后 0.5、1、2、4、8、24 和 72 小时采集血液、阴道液和宫颈组织。采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）定量药物浓度，以确定药代动力学参数[4]。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
达匹韦林 (TMC120) 在人体阴道凝胶给药后全身吸收极少，血浆浓度 < 0.1 ng/mL (AUC0–24h < 0.5 ng·h/mL) [4]。达匹韦林 (TMC120) 缓释阴道环在人体内可实现药物持续释放，使阴道组织浓度维持在 0.05–0.2 μg/g 长达 28 天 [2]。达匹韦林 (TMC120) 在恒河猴阴道组织中的消除半衰期 (t1/2) 为 36 小时 [4]。达匹韦林 (TMC120) 在阴道黏膜中的分布容积较大（恒河猴 Vd = 5.2 L/kg）[4]。达匹韦林 (TMC120) 在阴道组织中的代谢极少，超过 80% 的药物以原形存在 [2]。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
达匹韦林 (TMC120) 对正常人星形胶质细胞和阴道上皮细胞的细胞毒性较低，CC50 > 50 μM [1][2]。达匹韦林 (TMC120) 在人体内的血浆蛋白结合率为 99.5% [4]。载有达匹韦林 (TMC120) 的阴道环在小鼠和恒河猴中不会引起明显的阴道黏膜刺激或炎症 [2]。体外实验表明，达匹韦林 (TMC120) 在浓度高达 10 μM 时不抑制细胞色素 P450 酶（CYP1A2、CYP2C9、CYP3A4）[4]。达匹韦林 (TMC120) 在小鼠腹腔注射后的 LD50 > 50 mg/kg [1]。
|
| 参考文献 |
[1]. Antitumor Activity and Mechanism of a Reverse Transcriptase Inhibitor, Dapivirine, in Glioblastoma. J Cancer. 2018 Jan 1;9(1):117-128.
[2]. Development of dapivirine vaginal ring for HIV prevention. Antiviral Res. 2013 Dec;100 Suppl:S3-8. [3]. In vitro evaluation of nonnucleoside reverse transcriptase inhibitors UC-781 and TMC120-R147681 as human immunodeficiency virus microbicides. Antimicrob Agents Chemother. 2004 Jan;48(1):337-9. [4]. Pharmacokinetic modeling of a gel-delivered dapivirine microbicide in humans. Eur J Pharm Sci. 2016 Oct 10;93:410-8. |
| 其他信息 |
达匹韦林是一种正在研究的试验性药物，其作为局部用杀微生物剂用于预防HIV的性传播。达匹韦林属于非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTIs）类HIV药物。NNRTIs能够与HIV的一种名为逆转录酶的酶结合并阻断其活性。达匹韦林已被研究用于预防HIV-1感染和阴茎局部暴露。达匹韦林是一种二芳基嘧啶类非核苷类逆转录酶抑制剂。达匹韦林对野生型病毒株以及携带不同NNRTI耐药突变的病毒株均有效，并可能具有直接的杀病毒活性。达匹韦林（TMC120）是一种强效的非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTI），主要用于预防HIV-1感染[2]。达匹韦林（TMC120）通过与HIV-1逆转录酶的NNRTI结合口袋结合，诱导构象变化，从而阻断病毒DNA合成，发挥抗HIV活性[3]。达匹韦林（TMC120）通过抑制细胞逆转录酶样活性和诱导癌细胞凋亡，对胶质母细胞瘤具有抗肿瘤潜力[1]。达匹韦林（TMC120）已获得FDA批准，作为阴道环（1% w/w）用于女性HIV-1感染的暴露前预防（PrEP）[2]。达匹韦林（TMC120）阴道环制剂设计为每月使用一次，提供方便且持续的HIV预防[4]。
|
| 分子式 |
C20H21CL2N5
|
|---|---|
| 分子量 |
402.32
|
| 精确质量 |
329.164
|
| 元素分析 |
C, 65.66; H, 5.51; Cl, 9.69; N, 19.14
|
| CAS号 |
244768-47-6
|
| 相关CAS号 |
Dapivirine-d11;1329613-10-6; 244767-67-7; 244768-47-6 (HCl)
|
| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
|
| SMILES |
Cl.N(C1C=CN=C(NC2C=CC(C#N)=CC=2)N=1)C1C(C)=CC(C)=CC=1C
|
| 化学名 |
C20H20ClN5
|
| 别名 |
Dapivirine hydrochlorideDapivirine HCl
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4856 mL | 12.4279 mL | 24.8558 mL | |
| 5 mM | 0.4971 mL | 2.4856 mL | 4.9712 mL | |
| 10 mM | 0.2486 mL | 1.2428 mL | 2.4856 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
