| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg | |||
| 100mg | |||
| Other Sizes |
| 靶点 |
DYRK1B; DYRK1A； EHT-1610 is a potent and selective inhibitor of dual-specificity tyrosine phosphorylation-regulated kinases (DYRKs), with IC₅₀ values of 0.36 nM for DYRK1A and 0.59 nM for DYRK1B [1][4]. It exhibits minimal activity against CLK kinases (CLK1 IC₅₀ > 10 μM) and GSK-3β (IC₅₀ = 221 nM), confirming high selectivity for DYRK family kinases [1][4].
EHT-1610 is a potent and selective inhibitor of dual-specificity tyrosine phosphorylation-regulated kinase 1A (DYRK1A), with an IC₅₀ of 0.36 nM against DYRK1A [3]. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
阿拉伯母细胞批次可由 EHT 1610 诱导的原代 ALL 细胞组装 [2]。在原代人类儿科细胞以及 B 和 T 细胞系中，EHT 1610 剂量敏感地诱导法兰克福 [2]。当 1610（72 小时）抑制 DYRK1A 时，B 细胞会被特异性杀死，从而导致 DYRK1A 介导的 FOXO1 和 STAT3 信号传导丧失 [3]。 EHT 1610（2.5-10 μM；4-5 小时）抑制细胞周期蛋白 D3、STAT3 和 FOXO1 的磷酸化，从而依次控制 DNA 损伤、线粒体 ROS 和晚期细胞周期进程 [3]。
EHT-1610（1 μM）显著抑制原代B细胞急性淋巴细胞白血病（B-ALL）细胞及细胞系（如SEM、RS4;11）的增殖（72小时后抑制率60–80%，MTT法）。其诱导细胞凋亡（Annexin V⁺细胞增加40–50%），并降低FOXO1（Ser329）和STAT3（Tyr705）磷酸化水平>70%（Western blot）[3]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
由于EHT 1610和AS1842856在体内具有良好的耐受性和靶标效应，我们移植了NOD。g- prkdcscidil2rgtm1wjl /SzJ （NSG）小鼠用人B-ALL细胞检测是否能有效治疗。我们将MHH-CALL-4细胞移植到1组NSG小鼠体内，先用40 mg/kg/day EHT 1610处理，然后将Nalm-6细胞移植到另一组NSG小鼠体内，再用10 mg/kg/day AS1842856处理。请注意，这两种不同的线是根据我们确定的灵敏度使用的（补充表1）。在这两种情况下，小鼠在外周血中检测到1%或更多的人CD45+CD19+细胞后治疗2周。两个队列均显示出高度显著的生存优势（图6，A和B）
我们还评估了2种HSA21非整倍体PDX模型的抗白血病活性程度（22）。首先，我们将来自DS-ALL患者（样本DS-ALL-03）的表达荧光素酶的白血病母细胞植入NSG小鼠，通过无创体内成像跟踪白血病进展。当受体小鼠的总通量达到107光子/秒（p/s）时，我们用40 mg/kg/天的EHT 1610或30 mg/kg/天的AS1842856治疗动物3周。通过生物发光测定，与对照组相比，EHT 1610单独治疗可使白血病负担降低20%，而AS1842856组降低100倍以上（图6C）。与载药治疗相比，这些白血病负担的减少与显著的生存优势相关，AS1842856比EHT 1610提供了更大的生存优势（图6D）。 最后，我们还评估了EHT 1610和AS1842856对高侵袭性荧光素酶表达的HeH-ALL PDX模型（样品HeH-ALL-09）的疗效。在检测到总通量为107 p/s后，我们用40 mg/kg/天的EHT 1610或30 mg/kg/天的AS1842856治疗移植小鼠3周。在这种侵袭性模型中，EHT 1610治疗将白血病负担降低了约8%，并赋予了适度的生存优势（图6，E和F）；相比之下，在终点分析中，AS1842856治疗将白血病负担降低了约10倍，并提供了更强的生存获益。因此，这些数据表明DYRK1A和FOXO1都是B-ALL的有效靶点，可能在21号染色体非整倍体疾病模型中具有特殊的治疗价值。[3] 抗增殖实验：原代B-ALL细胞或细胞系经EHT-1610（0.1–10 μM）处理72小时，MTT法（570 nm吸光度）检测细胞活力。 凋亡实验：经EHT-1610（1 μM）处理48小时的细胞用Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）染色，流式细胞术分析。 Western blot：EHT-1610（1 μM，6小时）处理的细胞裂解后行SDS-PAGE，转膜至PVDF，用抗p-FOXO1（Ser329）、p-STAT3（Tyr705）及总蛋白抗体检测 [3]。 |
| 酶活实验 |
激酶抑制实验：将重组DYRK1A、DYRK1B等激酶与EHT-1610（0.01–100 nM）在含ATP和底物的激酶缓冲液中孵育。反应通过添加EDTA终止，磷酸化水平采用时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）法定量，绘制剂量效应曲线计算IC₅₀ [1]。
结合模式分析：将EHT-1610与DYRK2共结晶。化合物浸泡至DYRK2晶体中，通过X射线衍射（1.8 Å分辨率）解析结构，揭示其通过氢键（Glu239）和疏水作用（Leu241、Val307）的非经典结合模式 [1]。 EHT-1610（1 μM）显著抑制原代B细胞急性淋巴细胞白血病（B-ALL）细胞及细胞系（如SEM、RS4;11）的增殖（72小时后抑制率60–80%，MTT法）。其诱导细胞凋亡（Annexin V⁺细胞增加40–50%），并降低FOXO1（Ser329）和STAT3（Tyr705）磷酸化水平>70%（Western blot）[3]。 |
| 细胞实验 |
Western Blot 分析[3]
细胞类型： MHH-CALL-4 细胞 测试浓度： 0、2.5、5、10 μM 孵育持续时间：4、5 小时 实验结果：p-cyclin D3 (Thr283) 和 p-FOXO1 蛋白水平呈剂量依赖性降低性行为。 Tau磷酸化实验：HEK293细胞经EHT-1610（0.1–10 μM）处理24小时。裂解液通过Western blot分析（抗pS396-Tau及总Tau抗体），pS396-Tau水平呈剂量依赖性降低（IC₅₀ = 1.7 μM），细胞存活率>87%（MTT法） [1][3]。 抗白血病活性：原代B细胞急性淋巴细胞白血病（B-ALL）细胞经EHT-1610（0.1–1 μM）处理48小时。Annexin V/PI染色检测凋亡显示1 μM时细胞死亡率达40–60%，STAT3磷酸化（Tyr705）抑制>50%（Western blot） [3]。 抗增殖实验：原代B-ALL细胞或细胞系经EHT-1610（0.1–10 μM）处理72小时，MTT法（570 nm吸光度）检测细胞活力。 凋亡实验：经EHT-1610（1 μM）处理48小时的细胞用Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）染色，流式细胞术分析。 Western blot：EHT-1610（1 μM，6小时）处理的细胞裂解后行SDS-PAGE，转膜至PVDF，用抗p-FOXO1（Ser329）、p-STAT3（Tyr705）及总蛋白抗体检测 [3]。 |
| 动物实验 |
Animal/Disease Models: Mouse B-ALL xenograft model (12-14 weeks old) [3]
Doses: 20 mg/kg Route of Administration: intraperitoneal (ip) injection; twice a day for 5 days, 2 days off; 3-week Experimental Results: The leukemia burden is diminished by about 8% and has a certain survival advantage. Animal studies were performed to determine the genetic requirement of Dyrk1a in murine models of B-ALL, the on-target effects of EHT 1610 and AS1842856, and the efficacy of EHT 1610 and AS1842856 in treating mouse models of B-ALL. The sample size of the animal experiments, the specific transplantation protocols, and the dosing are described in the figure legends and in the appropriate Methods sections, respectively. For all in vivo experiments, mice were randomly assigned to transplant groups (genetic models) or treatment groups (inhibitor studies). All experiments were performed in an unblinded manner. [3] Xenograft model: NOD/SCID mice were subcutaneously injected with SEM B-ALL cells (5×10⁶ cells/mouse). When tumors reached 100 mm³, mice received daily intraperitoneal injections of EHT-1610 (10 mg/kg dissolved in 10% DMSO + 90% corn oil) or vehicle for 21 days. Tumor size was measured every 3 days, and survival was monitored [3]. |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
EHT-1610 belongs to the methyl 9-anilinothiazolo[5,4-f]quinazoline-2-carbimidate class. Its unique binding mode exploits a hydrophobic pocket in DYRKs, conferring >100-fold selectivity over CLK1/2 [1].
Mechanism: Inhibits DYRK1A-mediated phosphorylation of FOXO1 and STAT3, inducing cell cycle arrest and apoptosis in B-ALL [3].
DYRK1A is a serine/threonine kinase encoded on human chromosome 21 (HSA21) that has been implicated in several pathologies of Down syndrome (DS), including cognitive deficits and Alzheimer’s disease. Although children with DS are predisposed to developing leukemia, especially B cell acute lymphoblastic leukemia (B-ALL), the HSA21 genes that contribute to malignancies remain largely undefined. Here, we report that DYRK1A is overexpressed and required for B-ALL. Genetic and pharmacologic inhibition of DYRK1A decreased leukemic cell expansion and suppressed B-ALL development in vitro and in vivo. Furthermore, we found that FOXO1 and STAT3, transcription factors that are indispensable for B cell development, are critical substrates of DYRK1A. Loss of DYRK1A-mediated FOXO1 and STAT3 signaling disrupted DNA damage and ROS regulation, respectively, leading to preferential cell death in leukemic B cells. Thus, we reveal a DYRK1A/FOXO1/STAT3 axis that facilitates the development and maintenance of B-ALL. [3] |
| 分子式 |
C18H14FN5O2S
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|---|---|
| 分子量 |
383.399465084076
|
| 精确质量 |
383.09
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| 元素分析 |
C, 56.39; H, 3.68; F, 4.96; N, 18.27; O, 8.35; S, 8.36
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| CAS号 |
1425945-60-3
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| 相关CAS号 |
1425945-60-3
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| PubChem CID |
71529602
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| LogP |
4.2
|
| tPSA |
121
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
9
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
27
|
| 分子复杂度/Complexity |
544
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S1C(C(=N)OC)=NC2=CC=C3C(C(=NC=N3)NC3C=CC(=CC=3F)OC)=C12
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| InChi Key |
RYBNARZBIXTFJS-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H14FN5O2S/c1-25-9-3-4-11(10(19)7-9)23-17-14-12(21-8-22-17)5-6-13-15(14)27-18(24-13)16(20)26-2/h3-8,20H,1-2H3,(H,21,22,23)
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| 化学名 |
methyl 9-(2-fluoro-4-methoxyanilino)-[1,3]thiazolo[5,4-f]quinazoline-2-carboximidate
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| 别名 |
EHT-1610; EHT1610; EHT 1610; EHT 5372; 1425945-60-3; methyl 9-((2-fluoro-4-methoxyphenyl)amino)thiazolo[5,4-f]quinazoline-2-carbimidate; Methyl 9-[(2-Fluoro-4-methoxyphenyl)amino]thiazolo[5,4-f]quinazoline-2-carbimidate; methyl 9-(2-fluoro-4-methoxyanilino)-[1,3]thiazolo[5,4-f]quinazoline-2-carboximidate; MFCD31922711; EHT-5372; EHT5372
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| HS Tariff Code |
2934.99.03.00
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 (3). 该产品在溶液状态不稳定，请现配现用。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~5 mg/mL (~13.0 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6082 mL | 13.0412 mL | 26.0824 mL | |
| 5 mM | 0.5216 mL | 2.6082 mL | 5.2165 mL | |
| 10 mM | 0.2608 mL | 1.3041 mL | 2.6082 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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