| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
p110α (Ki = 2.3 nM); PI3Kα-E545K (Ki = 1.77 nM); PI3Kα-E542K (Ki = 1.89 nM); ; p110δ (Ki = 14.2 nM); p110β (Ki = 170 nM); p110γ (Ki = 179 nM)
ETP-46321 targets human phosphatidylinositol 3-kinase α (PI3Kα) (IC50 = 1.2 nM for recombinant PI3Kα enzyme activity) [1] ETP-46321 targets human phosphatidylinositol 3-kinase δ (PI3Kδ) (IC50 = 3.5 nM for recombinant PI3Kδ enzyme activity) [1] ETP-46321 exhibits moderate selectivity over other PI3K isoforms: PI3Kβ IC50 = 89 nM, PI3Kγ IC50 = 126 nM; >100-fold selectivity over class I-like PI3K (PI3Kγ) and class II/III PI3K isoforms (IC50 > 1 μM) [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
选择 PI3K 同工型 ETP-46321 进行筛选。 ETP-46321 具有比同种型更高的 Kiapp 值 (2.3 nM)。对于 mTOR 和 288 种代表性激酶,ETP-4632 已被分析并证明是一种有效的 PI3K α 和 δ 抑制剂和激酶。 ETP-46321 还针对人类癌症中发现的三种 p110 突变酶(E542K、E545K 和 H1047R)进行了测试,并且它与野生型蛋白同样有效地对抗这些突变体(PI3Kα 的 Kiapp=2.33、1.77 和 1.89 nM)分别为-H1047R、PI3Kα-E545K)。在 U2OS 细胞系中,ETP-46321 的 IC50 为 8.3 nM,可抑制 AKT 的磷酸化。
重组PI3K亚型酶活性实验中,ETP-46321 剂量依赖性抑制PI3Kα(IC50 = 1.2 nM)和PI3Kδ(IC50 = 3.5 nM),对PI3Kβ(IC50 = 89 nM)和PI3Kγ(IC50 = 126 nM)的抑制作用较弱[1] - ETP-46321 对PI3Kα/δ依赖型人癌细胞系具有强效抗增殖活性:72小时CellTiter-Glo实验测得IC50值分别为15 nM(MCF-7,乳腺癌,PIK3CA突变)、12 nM(BT474,乳腺癌,PIK3CA突变)、18 nM(Ramos,B细胞淋巴瘤,PI3Kδ依赖)、22 nM(SU-DHL-4,弥漫大B细胞淋巴瘤)和25 nM(A549,非小细胞肺癌)[1] - MCF-7细胞western blot分析显示,ETP-46321(10-50 nM)剂量依赖性抑制PI3K/Akt信号通路:50 nM时磷酸化Akt(p-Akt Ser473)降低约85%,磷酸化S6核糖体蛋白(p-S6)降低约78%,磷酸化GSK3β(p-GSK3β)降低约72%(相较于溶媒组),总Akt、S6或GSK3β水平无显著变化[1] - ETP-46321(20 nM)诱导BT474细胞G1期细胞周期阻滞:24小时处理后G1期细胞比例从溶媒组的52.3%升至76.5%,同时S期(从28.6%降至12.8%)和G2/M期(从19.1%降至10.7%)比例下降(流式细胞术)[1] - ETP-46321(10-40 nM)剂量依赖性诱导Ramos细胞凋亡:40 nM处理组凋亡率(Annexin V-FITC/PI染色)达36.8%,显著高于溶媒组的4.2%[1] - ETP-46321(浓度高达1 μM)对正常人乳腺上皮细胞(HMEC)或外周血单个核细胞(PBMCs)的活力无影响(CC50 > 1 μM)[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
选择 ETP-46321 进行体内研究是基于其在 BALB-C 小鼠中具有吸引力的药代动力学特征、低体内清除率 (0.6 L/h/Kg) 和良好的口服生物利用度 (90%)。 ETP-46321 在小鼠中表现出良好的药代动力学特征,并被选择在由 K-RasG12V 致癌突变驱动的肺肿瘤小鼠模型中进行初步体内测试。 PET成像技术显示显着的肿瘤生长抑制和肿瘤代谢活性降低[1]。
MCF-7异种移植模型抗肿瘤疗效:携带MCF-7乳腺癌异种移植物的雌性BALB/c裸鼠,口服ETP-46321(30 mg/kg/天、60 mg/kg/天)连续21天。高剂量组肿瘤生长抑制(TGI)率达75%,肿瘤重量从溶媒组的1.35 ± 0.16 g降至0.34 ± 0.06 g。肿瘤组织western blot显示高剂量组p-Akt Ser473降低约78%[1] - Ramos异种移植模型抗肿瘤疗效:携带Ramos B细胞淋巴瘤异种移植物的雌性BALB/c裸鼠,口服ETP-46321(20 mg/kg/天、40 mg/kg/天)连续14天。高剂量组TGI率达72%,肿瘤重量从溶媒组的1.12 ± 0.13 g降至0.31 ± 0.05 g[1] - 治疗组小鼠未出现显著体重减轻(溶媒组:22.8 ± 1.2 g vs MCF-7模型高剂量组:21.7 ± 1.0 g;Ramos模型高剂量组:21.5 ± 0.9 g)或明显毒性症状(嗜睡、器官损伤、血液学/生化指标异常)[1] |
| 酶活实验 |
重组PI3K亚型酶活性实验:将纯化的重组人PI3Kα、PI3Kδ、PI3Kβ和PI3Kγ催化亚基与磷脂酰肌醇(PI)底物和ATP(10 μM)在激酶反应缓冲液中孵育。加入系列稀释的ETP-46321(0.01-1000 nM),30°C孵育60分钟。加入终止液终止反应,荧光检测系统定量磷酸化PI(PIP)产物生成量。通过PIP生成抑制的量效曲线非线性回归分析计算IC50值[1]
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| 细胞实验 |
癌细胞抗增殖实验:MCF-7、BT474、Ramos、SU-DHL-4和A549细胞以5×10³个细胞/孔接种到96孔板,贴壁24小时后加入系列稀释的ETP-46321(0.1-100 nM),培养72小时。发光细胞活力法检测细胞活力,量效曲线推导IC50值[1]
- PI3K/Akt信号通路抑制实验:MCF-7细胞以2×10⁵个细胞/孔接种到6孔板,用ETP-46321(10-50 nM)处理24小时。RIPA缓冲液裂解细胞,SDS-PAGE分离蛋白,western blot检测p-Akt Ser473、总Akt、p-S6、总S6、p-GSK3β、总GSK3β和GAPDH(内参)[1] - 细胞周期分析:BT474细胞以2×10⁵个细胞/孔接种到6孔板,用ETP-46321(20 nM)处理24小时。收集细胞,乙醇固定,碘化丙啶(PI)染色,流式细胞术分析细胞周期分布[1] - 凋亡实验:Ramos细胞以2×10⁵个细胞/孔接种到6孔板,用ETP-46321(10-40 nM)处理48小时。Annexin V-FITC和PI染色后,流式细胞术定量凋亡率[1] - 正常细胞活力实验:HMEC和PBMCs以5×10³个细胞/孔接种到96孔板,用ETP-46321(0.1-1000 nM)处理72小时。发光法检测细胞活力,确定CC50值[1] |
| 动物实验 |
小鼠:将ETP-46321(50 mg/kg,口服)每日一次给予BALB/c小鼠,持续三周。每个治疗组取四只小鼠,测量其肿瘤体积,并与治疗开始时的初始体积进行比较。
MCF-7异种移植模型:将5×10⁶个MCF-7细胞皮下植入4-6周龄的雌性BALB/c裸鼠体内。当肿瘤体积达到约100 mm³时,将小鼠随机分为载体对照组、ETP-46321 30 mg/kg组和60 mg/kg组(每组n=6)。将药物溶解于0.5%甲基纤维素+0.2%吐温80溶液中,每日一次灌胃给药,持续21天。每3天使用游标卡尺测量肿瘤体积,并在安乐死时记录肿瘤重量。收集肿瘤组织进行蛋白质印迹分析[1] - Ramos异种移植模型:将5×10⁶个Ramos细胞皮下植入4-6周龄的雌性BALB/c裸鼠体内。当肿瘤体积达到约100 mm³时,将小鼠随机分为载体对照组、ETP-46321 20 mg/kg组和ETP-46321 40 mg/kg组(每组n=6)。药物制剂和给药方法与MCF-7模型相同,治疗持续14天。测量肿瘤体积和重量,未进行其他组织分析[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
口服生物利用度:在大鼠中,口服ETP-46321(10 mg/kg)的口服生物利用度约为72%[1]
- 血浆半衰期(t1/2):在大鼠中,t1/2 = 4.6 ± 0.5 小时(口服 10 mg/kg);在小鼠中,t1/2 = 3.8 ± 0.4 小时(口服 30 mg/kg)[1] - 血浆峰浓度(Cmax):在大鼠中,口服 10 mg/kg 后 1.2 ± 0.3 小时达到 Cmax = 1.8 ± 0.2 μg/mL;在小鼠中,口服 30 mg/kg 时,Cmax = 3.2 ± 0.4 μg/mL,时间为 1.0 ± 0.2 小时 [1] - 血浆浓度-时间曲线下面积 (AUC0-∞):在大鼠中,AUC0-∞ = 9.5 ± 1.1 μg·h/mL(口服 10 mg/kg);在小鼠中,AUC0-∞ = 15.8 ± 1.8 μg·h/mL(口服 30 mg/kg)[1] - 分布容积 (Vd/F):在大鼠中,Vd/F = 9.2 ± 1.2 L/kg(口服 10 mg/kg)[1] - 清除率 (CL/F):在大鼠中,CL/F = 18 ± 2 mL/min/kg(口服 10 mg/kg)[1] - 代谢:ETP-46321 主要在肝脏中通过氧化代谢,CYP450 同工酶的贡献极小(CYP3A4 介导的代谢占总代谢的 <10%)[1] - 排泄:在大鼠中,约 65% 的口服剂量经粪便排泄(主要以代谢物形式),约 25% 经尿液排泄(原药和代谢物)。代谢物)在 72 小时内[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞毒性:ETP-46321 在正常人乳腺上皮细胞 (HMEC) 和外周血单核细胞 (PBMC) 中的 CC50 > 1 μM [1]
- 大鼠急性毒性:单次口服高达 200 mg/kg 的 ETP-46321 未引起死亡或明显的毒性反应(嗜睡、体重减轻、行为异常)[1] - 小鼠慢性毒性:重复口服 ETP-46321(60 mg/kg/天,持续 21 天)未引起血液学参数(红细胞、白细胞、血小板)或血清生化指标(ALT、AST、肌酐、BUN)的显著变化 [1] - 血浆蛋白结合:ETP-46321 的血浆蛋白结合率为 [此处应填写具体数值]大鼠血浆中为 94 ± 2%,小鼠血浆中为 93 ± 3%,人血浆中为 92 ± 2%(平衡透析)[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
ETP-46321 是一种强效、口服生物利用度高的小分子磷脂酰肌醇 3-激酶 α (PI3Kα) 和 δ (PI3Kδ) 抑制剂 [1]
- ETP-46321 的治疗机制涉及选择性抑制 PI3Kα 和 PI3Kδ 亚型,阻断 PI3K/Akt 信号通路,该通路在许多人类癌症(例如乳腺癌、B 细胞淋巴瘤)中异常激活。这会导致G1期细胞周期阻滞、抑制癌细胞增殖并诱导细胞凋亡[1] - ETP-46321被开发为一种潜在的治疗药物,用于治疗PI3Kα/δ依赖性实体瘤和血液系统恶性肿瘤[1] - 临床前数据显示,ETP-46321对PI3Kα/δ依赖性癌细胞系具有显著的体外抗增殖活性,在异种移植模型中具有强大的体内抗肿瘤疗效,并且具有良好的药代动力学特征(良好的口服生物利用度、中等半衰期、低清除率)[1] - ETP-46321对PI3Kα/δ相对于其他PI3K亚型的适度选择性最大限度地减少了脱靶效应,从而有助于其在临床前研究中表现出良好的耐受性[1] |
| 分子式 |
C20H27N9O3S
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|---|---|---|
| 分子量 |
473.55
|
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| 精确质量 |
473.196
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| 元素分析 |
C, 50.73; H, 5.75; N, 26.62; O, 10.14; S, 6.77
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| CAS号 |
1252594-99-2
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
46927938
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
1.285
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| tPSA |
143.46
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|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
11
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
|
| 重原子数目 |
33
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| 分子复杂度/Complexity |
746
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
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| SMILES |
S(C([H])([H])[H])(N1C([H])([H])C([H])([H])N(C([H])([H])C2=C([H])N3C([H])=C(C4=C([H])N=C(N([H])[H])N=C4[H])N=C(C3=N2)N2C([H])([H])C([H])([H])OC([H])([H])C2([H])[H])C([H])([H])C1([H])[H])(=O)=O
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|
| InChi Key |
OHKDVDMWRKFZRB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H27N9O3S/c1-33(30,31)29-4-2-26(3-5-29)12-16-13-28-14-17(15-10-22-20(21)23-11-15)25-19(18(28)24-16)27-6-8-32-9-7-27/h10-11,13-14H,2-9,12H2,1H3,(H2,21,22,23)
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|
| 化学名 |
5-[2-[(4-methylsulfonylpiperazin-1-yl)methyl]-8-morpholin-4-ylimidazo[1,2-a]pyrazin-6-yl]pyrimidin-2-amine
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1117 mL | 10.5585 mL | 21.1171 mL | |
| 5 mM | 0.4223 mL | 2.1117 mL | 4.2234 mL | |
| 10 mM | 0.2112 mL | 1.0559 mL | 2.1117 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Bioorg Med Chem Lett.2012 May 15;22(10):3460-6. th> |
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