| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TLR7;TLR8;HIV-1
TLR7 (specific agonist when used at <10 μM); no binding affinity (IC50, Ki, EC50) values are reported in the provided studies. TLR8 (agonist at higher concentrations); no affinity data given. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
Gardiquimod (6–60 μM) 显著降低了 HIV-1 逆转录酶合成 cDNA 的能力[1]。
在 TLR7/8 激动剂研究 (HCC) 中：Gardiquimod (1 μg/mL，即 ~1 μM) 直接激活 NKL 细胞和原代 NK 细胞，上调 TLR7/8 表达，诱导 NF-κB 磷酸化和 IκB-α 降解，增加 IL-6 和 IL-1β 转录，并增强 NK 细胞对 HepG2、H7402 和 PLC/PRF/5 HCC 细胞的细胞毒性。在DC-NK共培养体系中，加地莫德促进DC成熟（上调CD1a、CD11c、CD83、CD86），增加DC产生Th1型细胞因子（IFN-α、IFN-β、IL-12p35、IL-15、IL-18）和促炎细胞因子（IL-1β、IL-6），但不增加IL-10的产生。加地莫德联合NK细胞能最有效地诱导这些变化。DC介导的NK细胞活化依赖于I型干扰素（IFNAR）和IL-12，并部分依赖于细胞间接触，涉及NKG2D、NKp80、CD40/CD40L、LFA-1/ICAM-1以及趋化因子CCL2/CCL4及其受体。 [1] 在HIV-1研究中：加地莫德（0.6–3 μM）显著降低了感染HIV-1BaL (R5)的巨噬细胞中的HIV-1 DNA水平（p≤0.001）。在活化的外周血单核细胞(PBMC)中，加地莫德（0.6 μM）抑制了R5 (BaL, CM235)、X4 (HC4)和双嗜性(C7/86)毒株。在感染后48小时内添加加地莫德可有效抑制病毒复制，但在72小时后则无效。剂量反应显示，浓度≥0.3 μM时，加地莫德可显著抑制p24的复制。加地莫德不诱导细胞凋亡（Annexin V/PI染色），也不影响细胞代谢/活力。在共培养实验中，用加地莫德（gardiquimod）处理的巨噬细胞（感染前3天用3 μM处理）显著抑制了活化的外周血单核细胞（PBMC）在巨噬细胞感染后立即、24小时或48小时加入时对病毒扩增的抑制作用，该抑制作用通过检测HIV-1 DNA和p24蛋白水平来评估。加地莫德诱导IFN-α mRNA的表达（2小时时增加80倍，4小时时增加20倍，6小时时增加35倍），并维持IFN-α蛋白的分泌长达48小时。MyD88抑制肽阻断了IFN-α的转录，并部分逆转了加地莫德的抗HIV作用。IFN-α受体阻断抗体也部分逆转了这种保护作用。生化实验表明，加地莫德在6-60 μM浓度下抑制HIV-1逆转录酶活性，在某些浓度下其抑制效果优于AZT。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
当树突状细胞 (DC) 与加地莫德 (Gardiquimod)（1 mg/kg/只小鼠；腹腔注射；每日一次，连续7天）联合使用时，NK细胞的抗肿瘤作用增强[2]。
在一项肝细胞癌 (HCC) 研究中：在HepG2异种移植裸鼠模型中，于第7天和第14天分别给予加地莫德（1 mg/kg/只小鼠，腹腔注射）联合NKL细胞（1×10⁸/只小鼠）和DC（1×10⁷/只小鼠）。联合治疗显著抑制了肿瘤生长，使最大肿瘤结节体积从700±43 mm³（仅NKL）减少至289±65 mm³（NKL+GDQ）和162±51 mm³（NKL+GDQ+DC）。肿瘤重量分别为 0.503±0.05 g (NKL)、0.299±0.05 g (NKL+GDQ) 和 0.209±0.02 g (NKL+GDQ+DC)。单独使用 GDQ 或 DC 的效果甚微；与其他治疗组相比，NKL+GDQ+DC 组的肿瘤抑制效果最为显著 (p<0.05)。[1] 在 HIV-1 研究中：该论文提到，在 HIV-1 感染前，使用阴道内给予人源化小鼠加地莫德 (gardiquimod) 治疗的初步研究表明，该治疗可显著预防阴道传播，但未提供详细的实验方案或数据。[2] |
| 酶活实验 |
HIV-1逆转录酶抑制试验：采用改良的cDNA合成反应，以HIV-1逆转录酶为酶源，U937细胞总RNA为模板，并使用CD45反义引物进行cDNA合成。反应体系为50 μL，包含1 μg总RNA、1×第一链缓冲液、80 μM dNTP、0.15 μg HIV-1逆转录酶、RNase抑制剂、5 mM DTT以及gardiquimod（6–60 μM）或AZT（40–400 μM）。cDNA合成反应条件为：25°C 5 min，50°C 45 min，55°C 15 min，65°C 15 min。取10 μL cDNA进行实时PCR，使用CD45特异性引物。 Gardiquimod 在 6–60 μM 浓度下抑制 RT 活性，其抑制作用强于相同浓度的 AZT。当 dNTP 浓度增加至 320 μM 时，抑制作用减弱，表明存在竞争性抑制。[2]
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| 细胞实验 |
细胞培养和处理：人肝癌细胞系HepG2、H7402、PLC/PRF/5和NK细胞系NKL培养于含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中。原代NK细胞采用NK细胞分离试剂盒（磁珠分选法）从外周血单核细胞（PBMC）中分离。单核细胞来源的树突状细胞（DC）由贴壁PBMC在GM-CSF（200 U/mL）和IL-4（100 U/mL）的诱导下培养5-6天分化而来。NK细胞刺激实验中，细胞用加地莫德（1 μg/mL）处理48小时；DC-NK共培养实验中，DC和NKL细胞以1:2的比例共培养，并分别加入或不加入加地莫德。流式细胞术检测细胞表面标志物（CD69、CD56、CD1a、CD11c、CD83、CD86）和细胞内颗粒酶B、穿孔素、CD107a脱颗粒。采用4小时⁵¹Cr释放试验检测HepG2、H7402和PLC/PRF/5细胞的细胞毒性。RT-PCR和qRT-PCR检测TLR7、TLR8、IL-6、IL-1β、IFN-α、IFN-β、IL-12p35、IL-15、IL-18和IL-10的表达。Western blot检测磷酸化NF-κB、NF-κB和IκB-α。采用ELISA检测上清液中的细胞因子。Transwell实验分离树突状细胞（DC）和自然杀伤细胞（NK细胞），以评估细胞接触依赖性。本研究使用了IFNAR和IL-12阻断抗体以及重组IL-12。[1]
HIV-1感染实验：将人单核细胞用GM-CSF培养8天使其成熟，然后在感染HIV-1BaL（200 TCID₅₀）前3天用gardiquimod（0.6–3 μM）处理，并在第4天通过实时PCR检测HIV-1 DNA。将PHA激活的PBMC在感染各种HIV-1毒株（BaL、CM235、HC4、C7/86）前1小时或感染后72小时内用gardiquimod（0.01–10 μM）处理。在第9天通过实时PCR定量HIV-1 DNA；用ELISA检测上清液中的p24。在共培养实验中，用加地喹莫德处理巨噬细胞后进行感染，然后立即或在24/48小时后加入PHA激活的PBMC；检测HIV-1 DNA和p24。在加地喹莫德处理后1-48小时，通过qRT-PCR检测IFN-α mRNA；通过ELISA检测IFN-α蛋白。使用MyD88抑制肽（10 μg/mL，预处理4小时）和IFN-α受体阻断抗体（2 μg/mL）阻断信号通路。通过CellTiter 96 AQueous法检测代谢活性；通过Annexin V/PI流式细胞术检测细胞凋亡。[2] |
| 动物实验 |
动物模型：携带人HepG2肝癌异种移植瘤的雄性无胸腺裸鼠（Balb-nu/nu，5周龄）[2]
剂量：每只小鼠1 mg/kg 给药途径：腹腔注射；每日一次，连续7天 结果：显著抑制人HepG2肝癌异种移植瘤的生长。 在肝细胞癌（HCC）研究（体内）中：将5×10⁶个HepG2细胞腹腔注射到5周龄的Balb/c裸鼠体内。在第7天和第14天，小鼠接受腹腔注射NKL细胞（每只小鼠1×10⁸个）、树突状细胞（DC）（每只小鼠1×10⁷个）、加地喹莫德（每只小鼠1 mg/kg）或其组合。小鼠在第28天处死；肝门静脉、脾门静脉和肠系膜血管内的肿瘤结节被分离；肿瘤体积计算公式为长×宽²/2。NKL+GDQ+DC组的肿瘤抑制效果最为显著。[1] HIV-1研究：未提供详细的动物实验方案；仅简要提及在HIV-1感染前对人源化小鼠进行阴道内加地莫德给药的初步研究（数据未显示）。[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在 HIV-1 研究中，Gardiquimod 未诱导活化 PBMC 细胞凋亡（Annexin V 染色阳性率为 10.3%，未处理组为 10.7%，p=NS），且在整个培养过程中均未影响细胞代谢活性、活力或细胞数量。TNF-α (100 ng/mL) 作为细胞凋亡的阳性对照（Annexin V 染色阳性率为 16.3%，p≤0.0002）。未报告巨噬细胞的显著毒性。[2]
在 HCC 研究中，未提供明确的毒性数据；然而，体内实验表明，gardiquimod (1 mg/kg 腹腔注射) 与 NK 细胞和 DC 细胞联合使用在小鼠体内耐受良好，未报告不良反应。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
加地莫德是一种咪唑喹啉类化合物，可激活TLR7（高浓度时也可激活TLR8）。它既是一种免疫系统调节剂，也是一种直接抗病毒剂。在肝细胞癌（HCC）免疫治疗中，加地莫德促进NK细胞与树突状细胞（DC）之间的相互作用，通过I型干扰素和IL-12通路增强NK细胞活化和抗肿瘤细胞毒性，并涉及细胞间接触和共刺激分子（NKG2D、NKp80、CD40/CD40L、LFA-1/ICAM-1）。加地莫德与NK细胞和DC联合应用可显著抑制裸鼠体内HepG2异种移植瘤的生长，提示其可能是一种治疗HCC的潜在免疫疗法。 [1] 在 HIV-1 感染中，加地莫德通过两种机制抑制巨噬细胞和活化 T 细胞中的 HIV-1 复制：(1) 通过 TLR7-MyD88 信号通路诱导 IFN-α 和其他抗病毒细胞因子；(2) 直接抑制 HIV-1 逆转录酶活性（可能作为核苷类似物竞争剂）。它对 R5、X4 和双嗜性毒株有效，并能阻止病毒在共培养体系中从巨噬细胞扩增至 T 细胞。加地莫德有望成为一种预防 HIV-1 传播的潜在杀微生物剂，初步的人源化小鼠研究表明其可预防阴道传播。目前尚未提及 FDA 批准或警告。[2]
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| 分子式 |
C21H25F6N5O5
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|---|---|
| 分子量 |
541.44
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| 精确质量 |
313.19
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| 元素分析 |
C, 65.15; H, 7.40; N, 22.35; O, 5.10
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| CAS号 |
1159840-61-5
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| 相关CAS号 |
Gardiquimod diTFA;1159840-61-5
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| PubChem CID |
44592366
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.019
|
| tPSA |
88.99
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
23
|
| 分子复杂度/Complexity |
404
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C(F)(F)(F)C(=O)O.C(N1C(=NC2C(N)=NC3=CC=CC=C3C1=2)CNCC)C(O)(C)C
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| InChi Key |
FHJATBIERQTCTN-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H23N5O/c1-4-19-9-13-21-14-15(22(13)10-17(2,3)23)11-7-5-6-8-12(11)20-16(14)18/h5-8,19,23H,4,9-10H2,1-3H3,(H2,18,20)
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| 化学名 |
1-[4-Amino-2-(ethylaminomethyl)imidazo[4,5-c]quinolin-1-yl]-2-methylpropan-2-ol
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| HS Tariff Code |
2934.99.03.00
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMF :≥ 20 mg/mL (~63.82 mM)
DMSO : ≥ 20 mg/mL (~63.82 mM) Ethanol :≥ 12 mg/mL (~38.29 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8469 mL | 9.2346 mL | 18.4693 mL | |
| 5 mM | 0.3694 mL | 1.8469 mL | 3.6939 mL | |
| 10 mM | 0.1847 mL | 0.9235 mL | 1.8469 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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COA
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