| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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描述：Gedatolisib（PF-05212384，PKI-587）是一种全新的、极其有效的PI3Kα、PI3Kγ和mTOR双重抑制剂，可能具有抗癌特性。在无细胞实验中，它对PI3Kα、PI3Kγ和mTOR的IC50值分别为0.4 nM、5.4 nM和1.6 nM。 PF-05212384 可能通过作用于 PI3K/mTOR 信号通路中的磷脂酰肌醇 3 激酶 (PI3K) 和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 (mTOR) 发挥抗癌作用。PF-05212384 可抑制 PI3K/mTOR 信号通路蛋白的细胞磷酸化。它能阻止 Akt 及其效应蛋白 GSK3 激酶、ENOS 和 PRAS 40 的磷酸化。此外，在包括 H1975、BT474、HCT116、H1975 和 U87MG 在内的多种异种移植模型中，PF-05212384 均表现出强大的抗肿瘤活性。
| 靶点 |
PI3Kα (IC50 = 0.4 nM); mTOR (IC50 = 1.6 nM); PI3Kγ (IC50 = 5.4 nM)
PI3Kα (IC50=0.4 nM) [1] PI3Kβ (IC50=68 nM) [1] PI3Kγ (IC50=5.4 nM in one assay; 60 nM in another assay) [1] PI3Kδ (IC50=0.6 nM) [1] mTOR (IC50=1.4 nM) [1] PI3Kα mutant H1047R (IC50=0.6 nM) [1] PI3Kα mutant E545K (IC50=0.6 nM) [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
PKI-587 对 PI3K-α、PI3K-γ 和 mTOR 均表现出强效抑制活性，IC50 值分别为 0.4 nM、5.4 nM 和 1.6 nM。此外，PKI-587 对最常见的 PI3Kα 突变体，特别是 H1047R 和 E545K，也具有抑制活性，IC50 值均为 0.6 nM。[1] 在 MDA-361 和 PC3-MM2 细胞系中，PKI-587 抑制肿瘤细胞生长，IC50 值分别为 4 nM 和 13.1 nM。这种效应与PI3K/mTOR信号通路蛋白磷酸化的抑制相关。[1]
PKI-587对MDA-361乳腺癌细胞（IC50=4.0 nM）和PC3-MM2前列腺癌细胞（IC50=13.1 nM）的增殖表现出强效抑制作用[1]。 它抑制了MDA-361细胞中Akt在T308（IC50=8 nM）和S473（IC50<10 nM）位点的磷酸化，在30 nM浓度下诱导了PARP的裂解，并在<30 nM浓度下抑制了GSK3、eNOS和PRAS40的磷酸化[1]。 它还抑制了mTORC1活性，表现为在<30 nM浓度下抑制了p70S6K和4EBP1的磷酸化[1]。在 10 μM 浓度下，PKI-587 对 236 种其他人类蛋白激酶进行了测试，结果显示其对 PI3K 和 mTOR 具有高度选择性 [1]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在裸鼠体内，静脉注射25 mg/kg PKI-587可使其血浆清除率低（7 mL/min/kg）、分布容积大（7.2 L/kg）且半衰期长（14.4 小时）。PKI-587对MDA-361肿瘤的最小有效剂量（MED）为3 mg/kg，最大耐受单次剂量（MTD）为30 mg/kg，在MDA-361异种移植瘤模型中表现出强大的抗肿瘤疗效。此外，在H1975（非小细胞肺癌，EGFR突变型[L858R, T790M]）异种移植瘤模型中，以25 mg/kg剂量连续治疗7周后，治疗组的存活率达到90%。 [1] 在裸鼠MDA-361皮下异种移植模型中，分别于第1、5和9天静脉注射20 mg/kg的PKI-587，可使体积较大的（约900 mm³）肿瘤消退，其疗效优于紫杉醇（60 mg/kg，单次腹腔注射）[1]。在MDA-361模型中，最小有效剂量（MED）为3 mg/kg，最大耐受单次剂量（MTD）为30 mg/kg [1]。在原位H1975非小细胞肺癌模型（EGFR L858R/T790M突变体）中，每周一次静脉注射25 mg/kg的PKI-587，持续7周，可使90%的小鼠存活，而所有未治疗的对照组小鼠均在第50天死亡[1]。 25 mg/kg 的剂量可抑制 MDA-361 肿瘤中的 pAkt (T308 和 S473) 长达 36 小时，并诱导 PARP 裂解长达 18 小时 [1]。
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| 酶活实验 |
酶活性测定采用荧光偏振 (FP) 法，该方法参考了 Echelon K-1100 PI3K FP 检测试剂盒的方案。E545K 和 H1047R 人 I 类 PI3K 突变体可在 Sf9 培养基中构建，也可从 Upstate Biotech 公司购买。大肠杆菌表达 GST-GRP1（鼠源），然后使用 GST-Sepharose 进行分离。测定缓冲液包括反应缓冲液 [20 mM HEPES (pH 7.1)、2 mM MgCl2、0.05% CHAPS 和 0.01% β-巯基乙醇] 和终止/检测缓冲液 [100 mM HEPES (pH 7.5)、4 mM EDTA 和 0.05% CHAPS]。 FP反应在室温下进行30分钟，反应体系为20 μL，包含20 μM磷脂酰肌醇4,5-二磷酸（PIP2）、25 μM ATP和<4% DMSO。FP反应用20 μL终止/检测缓冲液（10 nM探针和40 nM GST-GRP）终止，2小时后使用Envision酶标仪收集数据。纯化的FLAG-TOR（FL和3.5）的常规检测在96孔板中进行，具体步骤如下：首先将酶稀释于激酶测定缓冲液（10 mM Hepes (pH 7.4)、50 mM NaCl、50 mM β-甘油磷酸钠、10 mM MnCl2、0.5 mM DTT、0.25 μM微囊藻毒素LR和100 μg/mL BSA）中。将 12 μL 稀释后的酶液与 0.5 μL 测试抑制剂或对照溶剂二甲基亚砜 (DMSO) 短暂混合至每个孔中。加入 12.5 μL 含有 ATP 和 His6-S6K 的激酶测定缓冲液启动激酶反应，使最终反应体积为 25 μL，其中包含 800 ng/mL FLAG-TOR、100 μM ATP 和 1.25 μM His6-S6K。将反应板在室温下轻柔摇动孵育 2 小时（1-6 小时呈线性变化），然后加入 25 μL 终止缓冲液（20 mM Hepes (pH 7.4)、20 mM EDTA 和 20 mM EGTA）终止反应。
使用荧光偏振法测定 PI3Kα 和 PI3Kγ 酶活性；采用该方法测定 IC50 值 [1]。 mTOR 抑制采用 DELFIA 型 ELISA 法测定，该方法可测量 mTOR 的激酶活性 [1]。 对于针对 PI3K 亚型（β、γ、δ）和突变体（H1047R、E545K）的分析，采用类似的荧光偏振分析法测定 IC50 值 [1]。 |
| 细胞实验 |
将细胞以每孔约 3000 个细胞的密度接种于 96 孔培养板中。接种后一天，向细胞中加入 PKI-587。PKI-587 处理三天后，通过监测染料 MTS（由活细胞代谢）的代谢转化来评估活细胞密度，这是一种久经考验的细胞增殖检测方法。每次检测均使用新鲜解冻并混合的 MTS 和 PMS 储备液（20:1）。随后，将 20 μL MTS/PMS 混合物加入 96 孔细胞培养板中，并在细胞培养箱中孵育 1 至 2 小时。
使用 MDA-361（乳腺癌，PI3K 突变 E545K/Her2+）和 PC3-MM2（前列腺癌，PTEN 缺失）人肿瘤细胞系，通过为期 3 天的生长抑制试验评估细胞增殖抑制情况；将细胞暴露于测试化合物中 3 天，并计算 IC50 值 [1]。 对于磷酸化印迹研究，将 MDA-361 肿瘤细胞暴露于 PKI-587 4 小时，然后进行蛋白质印迹分析以检测磷酸化 Akt（T308 和 S473）、裂解的 PARP、磷酸化 GSK3、eNOS、PRAS40、p70S6K 和 4EBP1；使用蛋白质印迹的密度扫描来确定 pAkt 抑制的 IC50 值 [1]。 |
| 动物实验 |
将MDA-361和H1975细胞皮下注射到裸鼠体内。
≤30 mg/kg 静脉注射 为进行疗效研究，将MDA-361肿瘤皮下植入雌性裸鼠体内；当肿瘤体积达到约900 mm^3时，在第1、5和9天，以20 mg/kg的剂量静脉注射PKI-587，溶于含0.3%乳酸的5%葡萄糖溶液（D5/W，pH 3.5）中；作为对照，腹腔注射紫杉醇，剂量为60 mg/kg，单次给药[1]。 对于原位H1975模型，将H1975细胞注射到裸鼠的胸膜腔内； PKI-587每周一次静脉注射，剂量为25 mg/kg，持续7周，生存率以Kaplan-Meier曲线表示[1]。 对于体内生物标志物研究，单次静脉注射25 mg/kg PKI-587，并在不同时间点收集肿瘤组织，通过Western blot检测p-Akt抑制和cleaved PARP诱导[1]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在雌性裸鼠中，单次静脉注射 25 mg/kg 的 PKI-587（溶于 5% 葡萄糖/0.3% 乳酸溶液，pH 3.5）后，观察到以下参数：C0=4852 ng/mL，半衰期 (T1/2)=14.4 h，AUClast=42593 h·ng/mL，AUC0-inf=57927 h·ng/mL，血浆清除率 (Clp)=7 (mL/min)/kg，稳态分布容积 (Vss)=7.2 L/kg，平均滞留时间 (MRT)=16.7 h [1]。
与肝血流量 (90 mL/min/kg) 相比，较低的清除率 (7 mL/min/kg) 表明代谢极少，而较高的分布容积提示组织分布广泛 [1]。 未检测到 PKI-587 的口服暴露。裸鼠口服给药后[1]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在裸鼠中，PKI-587 的最大耐受单次剂量 (MTD) 被确定为 30 mg/kg [1]。PKI-587 在所有三个测试物种中均表现出良好的微粒体稳定性，并且没有 CYP 抑制作用 [1]。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
加达普利布已用于多种癌症的基础科学研究和治疗试验，包括卵巢癌、乳腺癌、晚期癌症和子宫内膜癌。加达普利布是一种靶向PI3K/mTOR信号通路中磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的药物，具有潜在的抗肿瘤活性。静脉注射加达普利布可抑制PI3K和mTOR激酶，从而导致PI3K/mTOR过表达的癌细胞凋亡和生长抑制。PI3K/mTOR通路的激活可促进细胞生长、存活以及对化疗和放疗的耐药性。 mTOR是PI3K下游的丝氨酸/苏氨酸激酶，其激活也可能独立于PI3K。
PI3K/Akt信号通路是细胞增殖、生长、存活和代谢的关键通路；选择性抑制mTOR反而会激活PI3K，这为双重PI3K/mTOR抑制剂提供了理论依据[1]。 PKI-587是一种ATP竞争性抑制剂，可阻断PI3K和mTOR的激酶活性；它是一种泛PI3K抑制剂，对mTOR的抑制效力与PI3K相当[1]。 PKI-587在本文发表时正作为单药静脉注射药物进入I期临床试验[1]。 |
| 分子式 |
C32H41N9O4
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|---|---|
| 分子量 |
615.7258
|
| 精确质量 |
615.328
|
| 元素分析 |
C, 62.42; H, 6.71; N, 20.47; O, 10.39
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| CAS号 |
1197160-78-3
|
| 相关CAS号 |
1197160-78-3
|
| PubChem CID |
44516953
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| 外观&性状 |
white solid powder
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 折射率 |
1.670
|
| LogP |
-0.76
|
| tPSA |
128.29
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
10
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
45
|
| 分子复杂度/Complexity |
913
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O=C(C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])N([H])C(N([H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])C1=NC(=NC(=N1)N1C([H])([H])C([H])([H])OC([H])([H])C1([H])[H])N1C([H])([H])C([H])([H])OC([H])([H])C1([H])[H])=O)N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])(C([H])([H])C1([H])[H])N(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H]
|
| InChi Key |
DWZAEMINVBZMHQ-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C32H41N9O4/c1-38(2)27-11-13-39(14-12-27)29(42)24-5-9-26(10-6-24)34-32(43)33-25-7-3-23(4-8-25)28-35-30(40-15-19-44-20-16-40)37-31(36-28)41-17-21-45-22-18-41/h3-10,27H,11-22H2,1-2H3,(H2,33,34,43)
|
| 化学名 |
-[4-[4-(dimethylamino)piperidine-1-carbonyl]phenyl]-3-[4-(4,6-dimorpholin-4-yl-1,3,5-triazin-2-yl)phenyl]urea
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| 别名 |
Gedatolisib; PKI-587; PKI587; PKI 587; PF-05212384; PF05212384; PF 05212384; PF5212384; PF 5212384; PF-5212384
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~2 mg/mL (~3.2 mM)
Water: <1 mg/mL Ethanol: <1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6241 mL | 8.1204 mL | 16.2409 mL | |
| 5 mM | 0.3248 mL | 1.6241 mL | 3.2482 mL | |
| 10 mM | 0.1624 mL | 0.8120 mL | 1.6241 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Status | Interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT03911973 | Active Recruiting |
Drug: Gedatolisib Drug: Talazoparib |
TNBC - Triple-Negative Breast Cancer |
Kari Wisinski | April 17, 2019 | Phase 1 Phase 2 |
| NCT02626507 | Active Recruiting |
Drug: Gedatolisib Drug: Faslodex |
Breast Cancer | Hoffman Oncology | January 2016 | Phase 1 |
| NCT05501886 | Recruiting | Drug: Gedatolisib Drug: Alpelisib |
Breast Cancer | Celcuity, Inc. | September 30, 2022 | Phase 3 |
| NCT03243331 | Completed | Drug: Gedatolisib Drug: PTK7-ADC |
Metastatic Breast Cancer Triple Negative Breast Cancer |
Kathy Miller | January 19, 2018 | Phase 1 |
| NCT02684032 | Completed | Drug: Gedatolisib Drug: Palbociclib |
Breast Cancer | Celcuity, Inc. | June 14, 2016 | Phase 1 |
a,bWe treated cell lines with different concentrations of everolimus (RAD001), PKI-587, or vehicle control for 0, 24, 48, and 96 h and assessed cell viability with the WST-1 assay (Roche).Neuroendocrinology.2017;105(1):90-104. |
|
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Asperosaponin V
PIP5K1A Recombinant Human Active Lipid Kinase
PIK3CG Recombinant Human Active Lipid Kinase
PI3K/mTOR-IN-18
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