规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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10 mM * 1 mL in DMSO |
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5mg |
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10mg |
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25mg |
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50mg |
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100mg |
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250mg |
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Other Sizes |
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靶点 |
PI3K; mTOR
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体外研究 (In Vitro) |
在转染的 Madin-Darby 犬肾 (MDCK) 细胞中,GNE-317 不是 P-gp 或 BCRP 转运蛋白的底物。在小鼠血浆中,GNE-317 与血浆蛋白的结合显示出 14.9% 的游离分数,而其与脑组织的结合则更高,为 5.4% 的游离分数。 GNE-317 中可见细胞停滞,但 U87 细胞不会死亡。 [1]
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体内研究 (In Vivo) |
GNE-317(40 mg/kg,口服)显着抑制小鼠大脑中的 PI3K 通路,给药后 6 小时内,40% 至 90% 的 pAkt 和 pS6 信号被抑制。在 U87 和 GS2 原位模型中,GNE-317(40 mg/kg,口服)分别有效抑制肿瘤生长 90% 和 50%。 GNE-317(30 mg/kg,口服;前两周 40 mg/kg)可将 GBM10 肿瘤模型中小鼠的平均寿命从 55.5 天延长至 75 天。 [1]
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酶活实验 |
化合物在 384 孔聚丙烯母板上从第 1 列到第 12 列以及从第 13 列到第 24 列进行连续稀释(在 100% DMSO 中稀释 3 倍),得到 GSK2126458 的 11 种浓度。第 6 列和第 18 列仅包含 DMSO。滴定完成后,将 0.05μL 转移至 384 孔小容量测定板中。该测定板包含三种药理学对照(已知的 PI3K 抑制剂)和 3 个测定对照: (1) 不含抑制剂的酶; (2) 缓冲液减去酶,以及(3) 缓冲液减去酶加上天然PIP3。将 DMSO 印入第 6 列和第 18 列的所有孔中。将 1X 反应缓冲液(1μL 200 μM PIP3)中的 40 μM PIP3 添加到第 18 列的交替行(孔 18 B、D、F、H、J、L、 N、P)。无酶对照反应在孔 18 A、C、E、G、I、K、M、O(0.1μL 100% DMSO)中进行。使用 HTRF 试剂盒优化 PI3-激酶分析测定。该检测试剂盒包含七种试剂: 1) 4X Reaction Buffer; 2) 原生PIP2(底物); 3) 终点 A (EDTA); 4) 终止点 B (生物素-PIP3); 5) 检测混合物A(链霉亲和素-APC); 6) 检测混合物 B(Eu 标记的抗 GST 加上 GST 标记的 PH 结构域); 7) 检测混合物C (KF)。 PI3Kinase Reaction Buffer 是用去离子水按 1:4 稀释原液来制备的。使用当天添加新鲜制备的 DTT,终浓度为 5 mM。使用 Multidrop Combi 将 1X 反应缓冲液中的 2.5μL PI3K(最终浓度的两倍)添加到所有孔中,启动酶添加和化合物预孵育。将板在室温下孵育 15 分钟。使用 Multidrop Combi 添加 2.5μL 2X 底物溶液(1X 反应缓冲液中的 PIP2 和 ATP)来启动反应。将板在室温下孵育一小时。使用 Multidrop Combi 将 2.5μL 终止液(终止剂 A 和终止剂 B 分别以 5:1 的比例预混合)添加到所有孔中来淬灭反应。然后使用 Mulitdrop Combi(检测混合物 C、检测混合物 A 和检测混合物 B 以 18:1:1 的比例组合在一起,即:对于 6000 μL 总体积,混合 5400 μL 检测混合物 C、300 μL 检测混合物 A 和 300 μL 检测混合物 B。注意:该溶液应在使用前 2 小时制备。在黑暗中孵育一小时后,在设置为 330nm 激发和 620nm (Eu) 和 665nm (APC) 双重发射检测的 Envision 读板器上测量 HTRF 信号。
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细胞实验 |
GL261 是一种侵袭性 C57BL/6J 衍生的神经胶质瘤系。来自不同质粒的绿色荧光蛋白(GFP)和荧光素酶(Luc)均被转染到该细胞系中。所得单克隆 GL261-GFP-Luc 细胞在 5% 氧气下培养,并在补充有 10% FBS 和青霉素/链霉素 (100 U/mL) 的 Dulbecco 改良 Eagle 培养基中保持活力。对于细胞选择,使用 4 mg/mL G418 和 4 mg/mL 嘌呤霉素。细胞活力测定采用 96 孔格式,在培养条件下每孔接种 2000 个细胞。与药物或载体一起孵育 48 小时,然后进行 MTS 测定以确定细胞的活力。 Synergy Mx 自动读板机用于测量 490 nm 处的吸光度以评估活力,并使用 650 nm 处的吸光度来考虑背景。通过将药物处理孔的数值数据标准化为载体处理孔的数据来计算存活百分比[1]。
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动物实验 |
U87 and GS2 orthotopic tumor-bearing mice
40 mg/kg p.o. |
参考文献 |
分子式 |
C19H22N6O3S
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分子量 |
414.4814
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精确质量 |
414.1474
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元素分析 |
C, 55.06; H, 5.35; N, 20.28; O, 11.58; S, 7.73
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CAS号 |
1394076-92-6
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相关CAS号 |
1394076-92-6
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外观&性状 |
Solid powder
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SMILES |
CC1=C(SC2=C1N=C(N=C2N3CCOCC3)C4=CN=C(N=C4)N)C5(COC5)OC
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InChi Key |
XOZLHJMDLKDZAL-UHFFFAOYSA-N
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InChi Code |
InChI=1S/C19H22N6O3S/c1-11-13-14(29-15(11)19(26-2)9-28-10-19)17(25-3-5-27-6-4-25)24-16(23-13)12-7-21-18(20)22-8-12/h7-8H,3-6,9-10H2,1-2H3,(H2,20,21,22)
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化学名 |
5-[6-(3-methoxyoxetan-3-yl)-7-methyl-4-morpholin-4-ylthieno[3,2-d]pyrimidin-2-yl]pyrimidin-2-amine
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别名 |
GNE317; GNE-317; GNE 317
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HS Tariff Code |
2934.99.9001
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存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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溶解度 (体外) |
DMSO: ~47 mg/mL warming (~113.4 mM)
Water: <1 mg/mL Ethanol: <1 mg/mL |
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溶解度 (体内) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 2.4127 mL | 12.0633 mL | 24.1266 mL | |
5 mM | 0.4825 mL | 2.4127 mL | 4.8253 mL | |
10 mM | 0.2413 mL | 1.2063 mL | 2.4127 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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Clin Cancer Res. 2012, 18(22):6239-6248 Efficacy in orthotopic models of glioblastoma. A, efficacy of GNE-317, GDC-0941, and GDC-0980 in GS2 neurosphere tumor model following treatment with GNE-317 at 40 mg/kg, GDC-0941 at 250 mg/kg or GDC-0980 at 10 mg/kg, daily for 6 weeks. B, GS2 brain tumor volume in control mice and mice treated with GNE-317, GDC-0941, or GDC-0980 for 6 weeks. Results are presented as the mean ± S.E. of 10 animals. C, efficacy of GNE-317 and GDC-0941 in U87 glioblastoma tumor model following treatment with GNE-317 at 40 mg/kg or GDC-0941 at 250 mg/kg, daily for 3 weeks. D, U87 brain tumor volume in control mice and mice treated with GNE-317 or GDC-0941 for 3 weeks. td> |