| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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描述：GSK2983559 游离酸（化合物 3）是一种高效、特异性强且口服有效的受体相互作用蛋白 2 (RIP2) 激酶抑制剂，在体内和人炎症性肠病 (IBD) 组织块样本中均显示出优异的活性，能够阻断多种促炎细胞因子反应。
| 靶点 |
RIP2 kinase
Receptor Interacting Protein 2 (RIP2) kinase. GSK2983559 free acid RIP2 binding fluorescence polarization (FP) assay (human): IC50 = 5 nM. RIP2 FP assay (rat): IC50 = 2 nM. RIP2 ADP-Glo kinase activity assay (human): IC50 = 2 nM. [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在针对非激酶靶点的筛选中（Eurofins，104 项受体和离子通道结合试验，35 项酶和细胞试验），GSK2983559 被发现具有极高的选择性，仅在浓度低于 10 μM 时抑制褪黑素受体 MT3。[1] 在生化试验中，GSK2983559 游离酸 在大鼠和人 RIP2 结合 FP 试验以及人激酶活性试验 (ADP-Glo) 中均表现出强效抑制作用，IC50 值分别为 5 nM、2 nM 和 2 nM。[1] 在过表达 NOD2 的 HEK293 细胞中，GSK2983559 游离酸 能以剂量依赖的方式强效抑制 MDP 刺激的 IL-8 生成，IC50 值为 4 nM。 [1]
在从健康志愿者分离的原代人单核细胞中，该化合物以13 nM的IC50值抑制MDP刺激的TNFα产生。[1] 在人全血(hWB)中，该化合物以26 nM的IC50值抑制MDP刺激的TNFα产生。这种效力的轻微降低归因于血浆蛋白结合。[1] 在人单核细胞中分析了GSK2983559游离酸的通路特异性。在1 μM浓度下，该化合物对Toll样受体（TLR2、TLR4、TLR7）或细胞因子受体（IL-1R、TNFR）激活后的促炎信号通路没有抑制作用。相反，MDP激活NOD2受体的活性被有效抑制。 [1]在克罗恩病 (CD) 或溃疡性结肠炎 (UC) 患者的培养炎症肠黏膜活检样本中，GSK2983559 游离酸 以浓度依赖的方式降低了促炎细胞因子 IL-1β 和 IL-6 的自发产生。其抑制程度与 1 μM 泼尼松龙相当。在这些外植体培养物中观察到的表观效力 (IC50 ~ 10 nM) 与 MDP 刺激的人全血中观察到的效力 (IC50 = 26 nM) 相当。[1]在人外周血单核细胞 (PBMC) 中，使用选择性 RIP2 激酶抑制剂（化合物 9，GSK214）评估了 NOD2 与 TLR2 联合亚最佳刺激后对协同细胞因子释放的影响。用 RIP2 激酶抑制剂预处理后进行共刺激，可使细胞因子水平降低至与单独刺激 TLR2 时观察到的水平大致相同。对 TLR4、TLR5 和 IL-1R 也观察到了类似的结果。这些数据支持了 RIP2 激酶抑制阻断 NOD2/TLR 协同作用的假设。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
GSK2983559（灌胃给药；3 和 10 mg/kg；单次）可显著抑制小鼠体内 MDP 诱导的 IL-6 表达 [2]。
在小鼠 TNBS 诱导的结肠炎模型中评估了磷酸酯前药 3（可递送GSK2983559 游离酸）的体内疗效。小鼠分别以 0.25、7.5 和 145 mg/kg 的剂量每日两次口服前药 3，分别对应 24 小时后 10%、50% 和 90% 的预期抑制率。7.5 和 145 mg/kg 每日两次给药的疗效与泼尼松龙相似，以结肠总评分（炎症、水肿、杯状细胞减少）衡量。这些结果支持以下假设：抑制 RIP2 激酶可减轻与肠上皮破坏相关的胃肠道炎症。 [1] |
| 酶活实验 |
在小鼠2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的结肠炎模型中，以7.5和145 mg/kg每日两次给药的剂量给予GSK2983559，其疗效与泼尼松龙相似，以结肠评分总和衡量。[1]
采用荧光偏振（FP）法测定GSK2983559游离酸与人和大鼠RIP2激酶的结合情况。该方法测定了结合的IC50值。[1] 采用ADP-Glo激酶活性测定法测定GSK2983559游离酸对人RIP2激酶的抑制活性。该方法测定了激酶活性抑制的IC50值。 [1] 对化合物 5 进行了激酶选择性筛选，在 1 μM 浓度下筛选了 300 种激酶。结果显示，化合物 5 对 4 种激酶（STK10、VEGFR2、EPHA6 和 ABL2）的抑制率在 70% 至 90% 之间，对 1 种激酶（VEGFR3）的抑制率超过 90%。[1] 为了解前药化合物 3 在胃肠道中的脱靶效应，对其进行了激酶选择性筛选，在 10 μM 浓度下筛选了 344 种激酶。结果显示，化合物 3 对 VEGFR3 的抑制率超过 90%，对另外 11 种激酶的抑制率在 70% 至 89% 之间。 [1] GSK2983559 游离酸与 RIP2 激酶的共结晶证实了其在 ATP 口袋中呈 1 型结合模式，其中喹唑啉 N1 与 Met98 的铰链氢键相互作用、砜与富含甘氨酸环中的 Ser25 的氢键相互作用以及苯并噻唑氮与 DFG 环中的 Asp164 的相互作用，均对结合活性至关重要。[1] |
| 细胞实验 |
在HEK293细胞检测中，过表达NOD2的细胞在不同浓度的GSK2983559游离酸存在下用MDP（1 μg/mL）刺激。孵育后，测定IL-8的产生。测试化合物的抑制率以内部高低对照的抑制百分比表示。[1]
在原代人单核细胞检测中，从健康志愿者分离的细胞在不同浓度的GSK2983559游离酸存在下用MDP（1 μg/mL）刺激。然后评估TNFα的产生。[1] 在人全血检测中，血液在不同浓度的GSK2983559游离酸存在下用MDP刺激，并测定TNFα的产生。 [1] 在人外周血单核细胞 (PBMC) 协同作用测定中，采用 Ficoll-Paque 法分离细胞，并重悬于添加了补充剂的 RPMI-1640 培养基中。将测试化合物（包括一种选择性 RIP2 抑制剂）预孵育 30 分钟，然后加入配体（NOD2 的 MDP 和 TLR2 的 Pam2CSK4，EC10 至 EC30 范围）。培养板孵育 4 小时。检测上清液中的人促炎细胞因子。采用类似方法检测 MDP 与 LPS (TLR4)、鞭毛蛋白 (TLR5) 和 IL-1β 的相互作用。 [1] 在炎症性肠黏膜活检组织块试验中，将克罗恩病或溃疡性结肠炎患者的活检组织在培养基、泼尼松龙（1 μM）或指定浓度的GSK2983559游离酸存在下培养过夜。采用免疫测定法评估细胞因子（IL-1β、IL-6）浓度。[1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： C57BL/6 小鼠（雌性）注射 MDP (100 μg) [2]
剂量： 3 和 10 mg/kg 给药途径： 灌胃（po）；3 和 10 mg/kg； 实验结果： 呈剂量依赖性地抑制血清 IL-6 水平。 对于 TNBS 诱导的结肠炎模型，于第 0 天通过直肠内灌注 100 μL 溶于 50% 乙醇的 TNBS (4 mg) 诱导雄性小鼠结肠炎。从第 -2 天到第 5 天，通过灌胃（po）给予动物受试物（前药 3）或溶剂对照。剂量水平为 0.25、7.5 和 145 mg/kg，每日两次（bid）。在第5天，处死动物并切除结肠。修剪结肠组织进行组织学评估。对组织进行炎症、水肿、杯状细胞减少和上皮损伤评分（0=无，4=严重），并将评分相加。[1] 在组织分布研究中，向大鼠输注前药3 4小时（总剂量2.1 mg/kg），然后采集一系列终末组织样本，测定化合物5的浓度并与血药浓度进行比较。[1] 为了确定前药3的裂解位点，在给药后15、30、60和120分钟采集大鼠的胃肠道组织样本进行评估。在采集样本前，清洗胃和肠道内容物以评估母体化合物5和前药3的水平。同时分析了胃和肠道的匀浆组织样本。 [1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
口服磷酸前药 3 后，GSK2983559 游离酸（母体 5）在大鼠体内有效递送，未在体循环中观察到前药。[1]
大鼠（Sprague-Dawley，口服 2.0 mg/kg）口服前药 3 后，GSK2983559 游离酸 的低剂量药代动力学参数：口服 Cmax 560 ng/mL，口服 AUC 170 ng·h/mL，Cl 30 mL min-1 kg-1，Vdss 2.1 L/kg，T1/2 2.4 h，F 77%。 [1] 低剂量药代动力学参数（犬，比格犬，口服 2.0 mg/kg）：口服 Cmax 840 ng/mL，口服 AUC 4400 ng·h/mL，Cl 11 mL min-1 kg-1，Vdss 2.0 L/kg，T1/2 2.9 h，F 100%。[1] 低剂量药代动力学参数（小型猪，哥廷根，口服 2.0 mg/kg）：口服 Cmax 340 ng/mL，口服 AUC 1100 ng·h/mL，Cl 11 mL min-1 kg-1，Vdss 2.1 L/kg，T1/2 4.2 h，F 58%。[1] 前药 3 在多种临床前药代动力学模型（大鼠和小型猪）中均表现出口服暴露的剂量线性关系，剂量线性图所示。 [1] 磷酸酯前药 3 的体外稳定性在肠道 S9 组分和全血中进行了评估，结果显示其快速裂解（大鼠肠道 S9 中的 T1/2 = 3.3 分钟，犬 = 8.0 分钟，人 = 18.3 分钟；大鼠血液中的 T1/2 = 35 分钟，犬 = 21 分钟，人 = 25 分钟）。[1] GSK2983559 游离酸在肝细胞中的体外肝清除率在不同物种间均处于低至中等水平：大鼠 <0.48 (mL/min)/g 肝脏，犬 0.65 (mL/min)/g 肝脏，小型猪 0.55 (mL/min)/g 肝脏，人 <0.48 (mL/min)/g 肝脏。 [1] 在人肝S9组分中，GSK2983559游离酸在有无NADPH辅因子存在的情况下均表现出稳定性，表明其并非醛氧化酶（AO）的底物。[1] 在大鼠、小型猪和人肝细胞中进行的代谢物鉴定研究证实，前药3在不同物种间均能高效转化为GSK2983559游离酸（5），且5可通过I相和II相代谢途径进一步代谢（氧化为羧酸、羟基化、氢化或开环以及葡萄糖醛酸化）。未检测到人特异性代谢物。[1] 在大鼠组织分布研究中，母体化合物5分布于包括结肠和皮肤在内的多种组织中。脑和眼中的浓度较低，可能是由于P-糖蛋白（P-gp）的主动外排所致。脑血比为 0.065:1。[1] 通过异速缩放预测了GSK2983559 游离酸的人体药代动力学，预测的末端半衰期为 6 小时，清除率为 7.1 mL min-1 kg-1，分布容积为 2.8 L/kg，生物利用度为 70%。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在一项为期7天的大鼠剂量范围探索研究中，化合物5表现出非剂量线性毒代动力学特征，导致无法在最高剂量下进行充分的毒理学评估。这种剂量线性缺失被认为是由于化合物5在空腹状态模拟肠液（FaSSIF：4 μg/mL）中的溶解度较低所致，随着剂量的增加，化合物在胃肠道中发生沉淀。剂量标准化AUC从0.44 kg·h/L降至0.21 kg·h/L，剂量从20 mg/kg增加到200 mg/kg。[1]
GSK2983559游离酸的血液游离分数在不同物种间相似：大鼠11%，犬8.9%，小型猪6.8%，人6.9%。 [1]缬氨酸酯前药 (8) 对 hERG 离子通道具有活性 (7.3 μM)，并抑制 P450 酶 CYP3A4 (126 nM)，且 CYP3A4 抑制作用可能具有时间依赖性 (2.9 倍偏移)。磷酸酯前药 3 不具有 hERG 或 CYP3A4 活性 (IC50 > 30 μM)。[1]在针对非激酶靶点的筛选中（104 项受体和离子通道结合试验以及 35 项酶和细胞试验），母体化合物 5 和前药 3 均具有高度选择性，仅在浓度低于 10 μM 时抑制褪黑素受体 MT3。由于 MT3 主要在大脑中表达，而母体化合物 5 的脑渗透性较低，因此这种活性不太可能产生任何药理作用。 [1] 在大鼠和小型猪中进行的为期六周的前药 3 安全性评估研究提供了足够的治疗窗口，有利于推进临床试验。[1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
GSK2983559 游离酸（化合物 5）源自 4-氨基喹唑啉化学类型。对该系列化合物进行优化后，得到了抑制剂 4 和 5，其中化合物 5 在人全血 MDP 刺激的 TNFα 生成中 IC50 为 26 nM，同时保持了对 hERG 离子通道的选择性。[1]
为了解决化合物 5 的溶解度驱动的药代动力学问题（DCS 2b 状态），我们设想采用前药策略。我们设计了 50 多种前药，并选择磷酸酯（化合物 3）进行进一步的分析。该前药除了磷酸部分中的酸性羟基外，还具有弱碱性的 N1 氮原子，因此可以制备多种盐形式（HCl、氢钠、半钙），所有这些盐形式在 FaSSIF 和 FeSSIF 中均具有优异的溶解度。前药的高溶解度和母体药物的高渗透性（MDCK细胞，母体药物5的渗透率为166 nm/s）共同驱动母体药物5快速穿过肠壁吸收。[1] RIP2激酶抑制剂阻断炎症性肠病活检样本中自发性促炎细胞释放的可能机制，可能是由于其对NOD2与其他模式识别受体（PRR），如TLR2、TLR4、TLR5和IL-1R之间的串扰和协同信号传导的影响。[1] 基于人体药代动力学/药效学预测，预计每日两次服用103 mg前药3或单次服用745 mg前药，可使母体药物5（GSK2983559游离酸）在24小时内达到90%的抑制率（谷浓度>90%抑制率）。 [1] GSK2983559 游离酸（作为前药 3）于 2018 年初进入 I 期临床试验。[1] |
| 分子式 |
C21H23N4O7PS2
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|---|---|
| 分子量 |
538.5298
|
| 精确质量 |
538.074
|
| 元素分析 |
C, 46.84; H, 4.31; N, 10.40; O, 20.80; P, 5.75; S, 11.91
|
| CAS号 |
1579965-12-0
|
| 相关CAS号 |
GSK2983559;GSK2983559 active metabolite;1423186-80-4
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| PubChem CID |
73386708
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
823.6±75.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
451.9±37.1 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±3.1 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.675
|
| LogP |
0.55
|
| tPSA |
197
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
12
|
| 可旋转键数目(RBC) |
9
|
| 重原子数目 |
35
|
| 分子复杂度/Complexity |
878
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
S(C1=CC2=C(N=CN=C2C=C1OCCOP(=O)(O)O)NC1C=CC2=C(C=1)N=CS2)(C(C)(C)C)(=O)=O
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| InChi Key |
MJLYDVMFNHZMLV-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C21H23N4O7PS2/c1-21(2,3)35(29,30)19-9-14-15(10-17(19)31-6-7-32-33(26,27)28)22-11-23-20(14)25-13-4-5-18-16(8-13)24-12-34-18/h4-5,8-12H,6-7H2,1-3H3,(H,22,23,25)(H2,26,27,28)
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| 化学名 |
2-[4-(1,3-benzothiazol-5-ylamino)-6-tert-butylsulfonylquinazolin-7-yl]oxyethyl dihydrogen phosphate
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| 别名 |
GSK2983559; GSK-2983559; GSK 2983559; GSK2983559 free acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~5 mg/mL (~9.3 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8569 mL | 9.2845 mL | 18.5691 mL | |
| 5 mM | 0.3714 mL | 1.8569 mL | 3.7138 mL | |
| 10 mM | 0.1857 mL | 0.9285 mL | 1.8569 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
RIPK1 ligand-Linker Conjugate-1
RIPK1-ligand-2
RIPK1-IN-34
RIPK1-IN-35
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