Hoechst 34580 (HOE 34580)

目录号: V31301 纯度: ≥98%
Hoechst 34580 是 Hoechst 系列的标记染料。
Hoechst 34580 (HOE 34580) CAS号: 23555-00-2
产品类别: Beta Amyloid
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
10mg
25mg
50mg
100mg
250mg
500mg
1g
Other Sizes

Other Forms of Hoechst 34580 (HOE 34580):

  • Hoechst 34580 tetrahydrochloride (HOE 34580 tetrahydrochloride)
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产品描述
Hoechst 34580 是 Hoechst 系列的标记染料。 Hoechst 系列是活细胞核标记染料。 Hoechst 通过与 DNA 双链中的小沟结合来结合核酸。 Hoechst 更喜欢与富含 A/T 的 DNA 链结合。同时,富含A/T的双链DNA显着增强荧光强度。 Hoechst 可以穿过细胞膜并与活细胞或固定细胞结合。 Hoechst 染料的荧光强度随着溶液 pH 值的增加而增加。
生物活性&实验参考方法
靶点
Hoechst 34580 targets amyloid beta (Aβ) aggregation process (IC50 = 2.3 μM, ThT fluorescence assay) [1]
体外研究 (In Vitro)
Hoechst工作液配制 1.1 Hoechst储备液配制 用DMSO配制1 mg/mL Hoechst储备液。注意:填充后,Hoechst 储存液应在-4°C 或-20°C 避光保存。 1.2 更换工作液:使用储存液前,添加PBS或优质无血清细胞培养基。 10 μg/mL 的 Hoechst 工作溶液为终浓度。注意:使用前,请确保赫斯特工作液浓度适合当前情况。 2.悬浮细胞染色(2.1):离心细胞,加入PBS,洗涤两次,每次5分钟。加入 1 mL Hoechst 工作液,静置 3-10 分钟,或直至细胞密度达到 1×106/mL 2.2。 2.3 400 g 离心 3-4 分钟,然后丢弃。 2.4 用PBS洗涤细胞两次,每次5分钟。 2.5 将细胞重悬于1毫升PBS或无血清水中,用流式细胞仪或荧光显微镜观察。 3. 基于粘附的细胞染色 3.1 在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。 3.2 吸出多余的细胞并从培养基中取出盖玻片。步骤3:吸去染料工作液,用培养基洗涤细胞2-3次,每次5分钟,用荧光显微镜或流式细胞仪监测。步骤 3.3 加入 100 μL 染料工作液,轻轻摇匀,使细胞完全覆盖。注意事项 1. 请根据当前情况修改Hoechst工作液浓度。 10分钟。 2.本品不得用于临床诊断或治疗,也不得掺入食品或药品中。它仅供科学研究中的专业用途。 3、工作时,为了您的健康和安全,请戴手套并穿实验服。
1. Aβ聚集抑制作用:
- HOE 34580Hoechst 34580)以浓度依赖方式抑制Aβ1-42聚集,ThT荧光实验测得IC50为2.3 μM(50%抑制率) [1]
- 浓度为10 μM时,对Aβ1-42聚集的抑制率达82%(相较于溶媒对照组) [1]
- 浓度高达20 μM时,对Aβ1-40聚集无显著影响,显示对Aβ1-42的选择性 [1]
2. Aβ纤维形成抑制作用:
- 透射电镜(TEM)分析显示,HOE 34580Hoechst 34580)(10 μM)处理72小时后,完整Aβ1-42纤维数量大幅减少 [1]
- 剩余Aβ物质呈无定形聚集状态,而非对照组中典型的长链无分支纤维 [1]
3. Aβ二级结构调控作用:
- 圆二色谱(CD)分析显示,HOE 34580Hoechst 34580)(10 μM)使Aβ1-42的β-折叠结构含量从对照组的45%降至18% [1]
- α-螺旋结构(从12%升至29%)和无规则卷曲结构(从43%升至53%)相应增加,表明纤维形成结构被破坏 [1]
4. Aβ诱导细胞毒性保护作用:
- HOE 34580Hoechst 34580)(1-20 μM)以浓度依赖方式保护SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞免受Aβ1-42诱导的细胞毒性 [1]
- 20 μM Aβ1-42使细胞存活率降至对照组的45%,而10 μM HOE 34580Hoechst 34580)联合处理后,细胞存活率恢复至78% [1]
细胞实验
1. Aβ诱导细胞毒性保护实验(MTT法):
- SH-SY5Y细胞以每孔5×10^3个的密度接种到96孔板,在添加胎牛血清和抗生素的DMEM/F12培养基中培养过夜 [1]
- 细胞用HOE 34580Hoechst 34580)(1、5、10、20 μM)预处理2小时,随后暴露于20 μM Aβ1-42中48小时 [1]
- 向每孔加入MTT试剂,37°C孵育4小时后,去除上清液,用DMSO溶解甲臜结晶 [1]
- 酶标仪检测570 nm处吸光度,相对于未处理对照组计算细胞存活率 [1]
参考文献

[1]. Discovery of DNA dyes Hoechst 34580 and 33342 as good candidates for inhibiting amyloid beta formation: in silico and in vitro study. J Comput Aided Mol Des. 2016 Aug;30(8):639-50.

其他信息
Hoechst 34580是一种知名的DNA结合染料,通过计算机筛选(分子对接)被鉴定为潜在的Aβ聚集抑制剂[1]
- 分子对接研究表明,它与Aβ1-42的疏水核心区域(残基17-21)结合,并与关键残基(Phe19、Val24)形成氢键和疏水相互作用[1]
- 它能够破坏Aβ1-42的β折叠形成和纤维聚集,并对Aβ诱导的细胞毒性具有神经保护作用,这表明其在阿尔茨海默病研究中具有潜在的应用价值[1]
- 与传统的Aβ抑制剂不同,它具有DNA染料和Aβ调节剂的双重特性,使其能够在生物学实验中实现多用途应用[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C27H29N7
分子量
451.56606
精确质量
451.248
CAS号
23555-00-2
相关CAS号
Hoechst 34580 tetrahydrochloride;2310135-08-9
PubChem CID
448202
外观&性状
Off-white to pink solid powder
LogP
5.867
tPSA
82.54
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
4
重原子数目
34
分子复杂度/Complexity
672
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
VMCOQLKKSNQANE-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C27H29N7/c1-32(2)20-7-4-18(5-8-20)26-28-22-10-6-19(16-24(22)30-26)27-29-23-11-9-21(17-25(23)31-27)34-14-12-33(3)13-15-34/h4-11,16-17H,12-15H2,1-3H3,(H,28,30)(H,29,31)
化学名
N,N-dimethyl-4-[6-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-benzimidazol-2-yl]aniline
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ≥ 47 mg/mL (~104.08 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.2145 mL 11.0725 mL 22.1450 mL
5 mM 0.4429 mL 2.2145 mL 4.4290 mL
10 mM 0.2214 mL 1.1072 mL 2.2145 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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