| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Hoechst 34580 targets amyloid beta (Aβ) aggregation process (IC50 = 2.3 μM, ThT fluorescence assay) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
Hoechst工作液配制 1.1 Hoechst储备液配制 用DMSO配制1 mg/mL Hoechst储备液。注意:填充后,Hoechst 储存液应在-4°C 或-20°C 避光保存。 1.2 更换工作液:使用储存液前,添加PBS或优质无血清细胞培养基。 10 μg/mL 的 Hoechst 工作溶液为终浓度。注意:使用前,请确保赫斯特工作液浓度适合当前情况。 2.悬浮细胞染色(2.1):离心细胞,加入PBS,洗涤两次,每次5分钟。加入 1 mL Hoechst 工作液,静置 3-10 分钟,或直至细胞密度达到 1×106/mL 2.2。 2.3 400 g 离心 3-4 分钟,然后丢弃。 2.4 用PBS洗涤细胞两次,每次5分钟。 2.5 将细胞重悬于1毫升PBS或无血清水中,用流式细胞仪或荧光显微镜观察。 3. 基于粘附的细胞染色 3.1 在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。 3.2 吸出多余的细胞并从培养基中取出盖玻片。步骤3:吸去染料工作液,用培养基洗涤细胞2-3次,每次5分钟,用荧光显微镜或流式细胞仪监测。步骤 3.3 加入 100 μL 染料工作液,轻轻摇匀,使细胞完全覆盖。注意事项 1. 请根据当前情况修改Hoechst工作液浓度。 10分钟。 2.本品不得用于临床诊断或治疗,也不得掺入食品或药品中。它仅供科学研究中的专业用途。 3、工作时,为了您的健康和安全,请戴手套并穿实验服。
1. Aβ聚集抑制作用: - HOE 34580(Hoechst 34580)以浓度依赖方式抑制Aβ1-42聚集,ThT荧光实验测得IC50为2.3 μM(50%抑制率) [1] - 浓度为10 μM时,对Aβ1-42聚集的抑制率达82%(相较于溶媒对照组) [1] - 浓度高达20 μM时,对Aβ1-40聚集无显著影响,显示对Aβ1-42的选择性 [1] 2. Aβ纤维形成抑制作用: - 透射电镜(TEM)分析显示,HOE 34580(Hoechst 34580)(10 μM)处理72小时后,完整Aβ1-42纤维数量大幅减少 [1] - 剩余Aβ物质呈无定形聚集状态,而非对照组中典型的长链无分支纤维 [1] 3. Aβ二级结构调控作用: - 圆二色谱(CD)分析显示,HOE 34580(Hoechst 34580)(10 μM)使Aβ1-42的β-折叠结构含量从对照组的45%降至18% [1] - α-螺旋结构(从12%升至29%)和无规则卷曲结构(从43%升至53%)相应增加,表明纤维形成结构被破坏 [1] 4. Aβ诱导细胞毒性保护作用: - HOE 34580(Hoechst 34580)(1-20 μM)以浓度依赖方式保护SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞免受Aβ1-42诱导的细胞毒性 [1] - 20 μM Aβ1-42使细胞存活率降至对照组的45%,而10 μM HOE 34580(Hoechst 34580)联合处理后,细胞存活率恢复至78% [1] |
| 细胞实验 |
1. Aβ诱导细胞毒性保护实验(MTT法):
- SH-SY5Y细胞以每孔5×10^3个的密度接种到96孔板,在添加胎牛血清和抗生素的DMEM/F12培养基中培养过夜 [1] - 细胞用HOE 34580(Hoechst 34580)(1、5、10、20 μM)预处理2小时,随后暴露于20 μM Aβ1-42中48小时 [1] - 向每孔加入MTT试剂,37°C孵育4小时后,去除上清液,用DMSO溶解甲臜结晶 [1] - 酶标仪检测570 nm处吸光度,相对于未处理对照组计算细胞存活率 [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Hoechst 34580是一种知名的DNA结合染料,通过计算机筛选(分子对接)被鉴定为潜在的Aβ聚集抑制剂[1]
- 分子对接研究表明,它与Aβ1-42的疏水核心区域(残基17-21)结合,并与关键残基(Phe19、Val24)形成氢键和疏水相互作用[1] - 它能够破坏Aβ1-42的β折叠形成和纤维聚集,并对Aβ诱导的细胞毒性具有神经保护作用,这表明其在阿尔茨海默病研究中具有潜在的应用价值[1] - 与传统的Aβ抑制剂不同,它具有DNA染料和Aβ调节剂的双重特性,使其能够在生物学实验中实现多用途应用[1] |
| 分子式 |
C27H29N7
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|---|---|
| 分子量 |
451.56606
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| 精确质量 |
451.248
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| CAS号 |
23555-00-2
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| 相关CAS号 |
Hoechst 34580 tetrahydrochloride;2310135-08-9
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| PubChem CID |
448202
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| 外观&性状 |
Off-white to pink solid powder
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| LogP |
5.867
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| tPSA |
82.54
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
672
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
VMCOQLKKSNQANE-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H29N7/c1-32(2)20-7-4-18(5-8-20)26-28-22-10-6-19(16-24(22)30-26)27-29-23-11-9-21(17-25(23)31-27)34-14-12-33(3)13-15-34/h4-11,16-17H,12-15H2,1-3H3,(H,28,30)(H,29,31)
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| 化学名 |
N,N-dimethyl-4-[6-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-benzimidazol-2-yl]aniline
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 47 mg/mL (~104.08 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2145 mL | 11.0725 mL | 22.1450 mL | |
| 5 mM | 0.4429 mL | 2.2145 mL | 4.4290 mL | |
| 10 mM | 0.2214 mL | 1.1072 mL | 2.2145 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。