| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Hymecromone targets NSMase2 (neutral sphingomyelinase 2) as an activator (no IC50/Ki reported); downstream effectors include ceramide, PP2A, Akt (Ser473 phosphorylation inhibited), HAS2, calpain1/2, p53 (phosphorylated), caspase-3 (activated), and SIRT1 (downregulated). [1]
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
[1] 1 mM 的羟甲烯酮 (Hymecromone) 处理 24 小时后，G26-24 细胞中透明质酸 (HA) 的产生量从 3250±221 ng/mg 细胞蛋白降至 291±14 ng/mg 细胞蛋白（降低超过 90%）。MTT 法检测显示，羟甲烯酮以剂量依赖的方式（0-1 mM）降低细胞活力，Annexin V/PI 流式细胞术检测显示其诱导细胞凋亡；2 mM 的羟甲烯酮也诱导了细胞凋亡。NSMase2 抑制剂 GW4869 (5 μM) 部分逆转了细胞活力的丧失和细胞凋亡。羟甲烯酮处理引起细胞形态改变（拉伸、粘附并形成突起），GW4869 可部分逆转这些改变。羟甲烯酮无法渗透到细胞内（3 小时后未检测到荧光）。 MU在15分钟内激活NSMase2，并以时间依赖性方式（0.25-24小时）提高神经酰胺水平（总神经酰胺和各组分神经酰胺），这已通过高效薄层色谱（HPTLC）和液相色谱-串联质谱（LC/MS/MS）分析证实；神经酰胺/鞘磷脂（SM）比值呈剂量和时间依赖性增加，且该作用可被GW4869逆转。MU在24小时时增加PP2A表达并降低Akt（Ser473）的磷酸化水平。MU在0.5、1、3和24小时时降低HAS2表达，该作用可被GW4869部分逆转。MU促进NSMase2向脂筏的转位并提高其活性（长达3小时），但不影响ASMase。其他NSMase2激活剂（细菌SMase、星形孢菌素、H₂O₂）和外源性C2-神经酰胺也降低了透明质酸（HA）的合成并增加了细胞黏附性。 MU 可降低 G26-24 细胞的迁移（0.5 mM 时降低约 24%，1 mM 时降低约 42%）和侵袭（分别降低约 30% 和 40%）。MU 可降低钙蛋白酶活性，并增加 pro-calpain1 和 pro-calpain2 的蛋白水平。MU 可增加 p-P53 的水平，激活 caspase-3（活性和裂解），并降低 SIRT1 的表达。[1]
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| 酶活实验 |
[1] NSMase2 和 ASMase 的活性采用荧光底物 HMU-磷酸胆碱进行测定。将细胞裂解液（50 μg 蛋白）与底物在 pH 7.4（NSMase2 的底物为 10 mM MgCl2、100 mM Tris-HCl、0.1% Triton X-100 和 5 mM DTT）或 pH 4.5（ASMase 的底物为 150 mM 乙酸钠和 1 mM EDTA）的条件下孵育；释放的 HMU 通过荧光法测定（激发/发射波长未指定，但使用微孔板读数仪），并根据荧光强度随时间变化的斜率计算活性，以蛋白浓度进行标准化。
钙蛋白酶活性采用细胞可渗透底物 t-BOC-LM-CMAC (30 μM) 进行测定。用 1 mM MU 处理细胞 60 分钟后裂解，并定量分析释放的 CMAC 的荧光强度（激发波长 351 nm，发射波长 430 nm）。 将 25–30 μg 细胞提取物与 DEVD-AFC 底物在 HEPES 缓冲液（pH 7.4，2 mM DTT，5 mM EDTA）中于 37 °C 孵育 3 小时，测定 Caspase-3 活性；在激发波长 400 nm、发射波长 505 nm 处测量荧光强度，并根据斜率计算活性，该斜率已根据蛋白质含量进行归一化。[1] |
| 细胞实验 |
[1] HA 生成量采用竞争性 ELISA 法测定：将 G26-24 细胞（培养 48 小时）的条件培养基与检测剂混合，加入 HA 包被的酶标板；450 nm 处的比色信号与 HA 含量呈负相关，并以细胞蛋白含量进行标准化。
细胞活力采用 MTT 法评估：将细胞接种于 24 孔板（1×10⁵/cm²），用 MU（0–1 mM）处理，然后加入 MTT（5 mg/mL）孵育 2 小时，之后用 10% SDS-HCl 溶解，并在 595 nm 处测定吸光度值。 细胞凋亡采用 Alexa Fluor 488 Annexin V/Dead Cell 凋亡检测试剂盒进行流式细胞术分析；对细胞进行染色，并计算早期和晚期凋亡细胞的百分比。 超声处理后，通过荧光法（激发波长360 nm，发射波长460 nm）检测细胞裂解液和上清液中的MU摄取情况，并使用DRAQ5进行核染色，通过共聚焦显微镜观察；3小时后未检测到摄取。 蛋白质印迹分析：将细胞裂解液进行SDS-PAGE电泳分离，转移至膜上，并用针对NSMase2、Akt、p-Akt (Ser473)、HAS2、calpain1、calpain2、PP2A、caspase3、cleaved caspase3、p53、SIRT1和β-actin的抗体进行检测；使用密度扫描法对条带进行定量。 脂筏分离：将细胞在4℃下用Triton X-100裂解，进行蔗糖梯度超速离心，收集各组分并进行蛋白质印迹分析。 脂质提取和高效薄层色谱法 (HPTLC)：用[³H]棕榈酸酯标记细胞24小时，用氯仿-甲醇-水提取脂质，进行碱性甲醇解，用氯仿/甲醇/乙酸/水进行HPTLC分离，碘显色，并通过闪烁计数定量，以确定神经酰胺/鞘磷脂 (SM) 比值。 液相色谱-串联质谱 (LC/MS/MS)：以17:0-神经酰胺 (17:0-Cer) 为内标提取脂质，采用ESI正离子模式和多反应监测 (MRM) 进行LC/MS/MS分析；使用R²>0.98的标准曲线（0–300 pmol）对各神经酰胺种类进行定量。 迁移和侵袭实验使用CytoSelect 24孔板试剂盒，并按照制造商说明进行操作；用MU（0.5或1 mM）处理细胞24小时，然后接种于上室并进行孵育；对迁移/侵袭的细胞进行染色和定量。 [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Hymecromone是一种透明质酸（HA）合成抑制剂，传统观点认为其作用机制是通过消耗UDP-葡萄糖醛酸，但本研究揭示了一种新的机制：它激活质膜上的NSMase2，将鞘磷脂水解为神经酰胺，神经酰胺随后激活PP2A，使Akt去磷酸化，降低HAS2表达和HA合成；PP2A还抑制钙蛋白酶1/2，从而减少细胞迁移和侵袭；神经酰胺进一步激活p53和caspase-3，同时抑制SIRT1，最终导致细胞凋亡。该机制解释了MU的抗转移和促凋亡作用。该化合物无需进入细胞即可启动这些信号通路，因为它作用于细胞表面。这项工作表明，生成神经酰胺的药物（NSMase2激活剂）可能对癌症治疗有用。[1]
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| 参考文献 |
Biochim Biophys Acta.2016Feb;1861(2):78-90.
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| 分子式 |
C10H7NAO3
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|---|---|
| 分子量 |
198.15
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| 精确质量 |
198.029
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| CAS号 |
5980-33-6
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| PubChem CID |
3364573
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.319g/cm3
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| 沸点 |
377.4ºC at 760 mmHg
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| 熔点 |
90-92ºC(lit.)
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| 闪点 |
174.5ºC
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| 折射率 |
1.611
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| LogP |
2.245
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| tPSA |
53.27
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
0
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| 重原子数目 |
14
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| 分子复杂度/Complexity |
262
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
0
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| InChi Key |
JGMQHDNPUCPRQE-UHFFFAOYSA-M
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| InChi Code |
InChI=1S/C10H8O3.Na/c1-6-4-10(12)13-9-5-7(11)2-3-8(6)9;/h2-5,11H,1H3;/q;+1/p-1
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| 化学名 |
sodium;4-methyl-2-oxochromen-7-olate
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| 别名 |
Hymecromone sodium 4-Methylumbelliferone sodium
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.0467 mL | 25.2334 mL | 50.4668 mL | |
| 5 mM | 1.0093 mL | 5.0467 mL | 10.0934 mL | |
| 10 mM | 0.5047 mL | 2.5233 mL | 5.0467 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
1,2-ditridecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine
2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-YL)-5-FLUORO-6-(PIPERAZIN-1-YL)ISOINDOLINE-1,3-DIONE HCL
2-氯甲基-3-甲基-4-甲氧基吡啶盐酸盐
1H-Pyrazole-3-carboxylic acid, 5-hydroxy-1-[3-(trifluoromethyl)phenyl]-
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