| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100μg |
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| 500μg |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
URAT1; GLUT9
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| 体外研究 (In Vitro) |
化合物KPH2f表现出强大的URAT1抑制活性，IC50为0.24 mM，与维瑞脲相当（IC50¼0.17 mM）。KPH2f还抑制GLUT9，IC50值为9.37±7.10 mM，表明具有双重URAT1/GLUT9靶向能力。此外，KPH2f对OAT1和ABCG2的影响很小，因此不太可能引起OAT1/ABCG2介导的药物相互作用和/或中和URAT1/GLUT9抑制剂的促尿酸作用[1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
KPH2f（10mg/kg）在降低血尿酸水平方面同样有效，并且在小鼠高尿酸血症模型中表现出更高的促尿酸作用，与维瑞脲（10mg/kg的）相比。此外，KPH2f表现出良好的药代动力学特性，口服生物利用度为30.13%，明显优于韦尼拉德（21.47%）。此外，KPH2f表现出良好的安全性，不会引起hERG毒性、体外细胞毒性（低于维瑞脲）和体内肾损伤。总的来说，这些结果表明，KPH2f代表了一种新型、安全有效的双重URAT1/GLUT9抑制剂，具有更好的药物耐受性，值得作为抗高尿酸血症候选药物进行进一步研究[1]。
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| 酶活实验 |
14C-尿酸摄取抑制试验[1]
将HEK293细胞以1105/孔的密度接种到聚-D-赖氨酸（PDL）涂覆的96孔板中。使用脂质体3000将URAT1质粒（100ng/孔）瞬时转染入HEK293细胞。转染24小时后，将细胞与含有或不含有不同浓度受试化合物的尿酸摄取缓冲液一起孵育30分钟。通过加入终浓度为25mM的14C-尿酸15分钟来启动摄取。然后用冰冷的DPBS洗涤细胞三次以终止反应。通过加入100ml 0.1M氢氧化钠获得细胞裂解物。在加入0.5mL闪烁液后，使用液体闪烁计数器测定细胞内放射性。实验一式三份。受试化合物的抑制率计算如下：比抑制率¼[1-（CPMtest-CPM0）/（CPMcon-CPM0）]100%其中CPMt是受试组的放射性，CPMcon是对照组的洗脱液内放射性。CPM0是没有hURAT1的空载体细胞的放射性。 化合物对ABCG2、OAT1和GLUT9的抑制作用[1] 对受试化合物对尿酸转运相关转运蛋白（包括GLUT9、ABCG2和OAT1）的抑制作用进行了研究，以评估受试化合物的选择性。GLUT9:500 ng pcDNA3.1（"）-GLUT9质粒用脂质体3000瞬时转染到24孔板中的HEK293细胞中。24小时后，使用全细胞膜片钳技术通过电生理记录电流在HEK293-GLUT9细胞中测定化合物的GLUT9抑制作用。灌注装置持续灌注含有或不含化合物的溶液，实现了快速的溶液交换。如我们之前报道的，电流是用MultiClamp 700B膜片钳放大器/Digidata 1550B数字化仪测量的，并由pClamp 10软件计算。 |
| 细胞实验 |
细胞活力测定（MTT法）[1]
人肾（HK2）细胞用于检测化合物诱导的细胞毒性和细胞存活率。将HK2细胞以5000/孔的密度镀入96孔板中。当细胞融合达到70%时，用一系列浓度的化合物（0e200 mM）处理细胞24小时孵育。向每个孔中加入0.5mg/mL MTT溶液，并将平板在37℃下进一步孵育2小时。此后，取出培养基，向每个孔加入100ml DMSO。将板以250rpm摇动30分钟，溶解甲氮晶体后，在570nm[1]处测定吸光度。 |
| 动物实验 |
体内化合物降尿酸作用的评价[1]
实验前，小鼠饲养一周以适应环境。随后将小鼠随机分为6组：对照组（n=8）、模型组（n=12）、3个化合物组（SG1C、KP、KPH2F，剂量均为10 mg/kg，n=8）和阳性对照组（维利尿酸，剂量均为10 mg/kg，n=8）。高尿酸血症的诱导方法如我们之前报道。将尿酸酶抑制剂氧酸钾（PO）以400 mg/kg的剂量皮下注射到小鼠体内（溶于0.5%羧甲基纤维素钠溶液中）。模型组和化合物组小鼠分别灌胃给予600 mg/kg的次黄嘌呤。PO注射0.5 h后，化合物组小鼠灌胃给予10 mg/kg的化合物，对照组小鼠灌胃给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液。给药3 h后，从小鼠眼眶静脉采集血样。血样经离心（3000×1000 g，10 min）分离血清，用于后续分析。在代谢笼中连续给药24 h后收集尿液样本。采用尿酸检测试剂盒测定血清和尿液中的尿酸水平。体内药代动力学研究[1] 雄性Sprague-Dawley大鼠（300 ± 20 g）由南方医科大学实验动物中心提供。 24只雄性大鼠被随机分为4组，分别静脉注射（5 mg/kg）和口服（5 mg/kg）KPH2F和维利尿酸。KPH2F和维利尿酸均用生理盐水溶解，用于灌胃和静脉给药。分别于给药后2 min、5 min、15 min、30 min、1 h、1.5 h、2 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h和36 h，从眼眶静脉采集0.5 mL血液样本至肝素化试管中。所有样本立即以8000 rpm离心5 min，然后将血浆储存于80℃直至分析。采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）系统对样本进行定量分析。将100 mL血浆样品加入10 mL内标溶液（睾酮，1 mg/mL）。混合物用600 mL乙酸乙酯萃取。连续合并两次上清液，并在40～50℃下蒸干。残余物用400 mL流动相（50%甲醇）复溶，然后在14000 rpm下离心15 min。取300 mL上清液注入LC-MS/MS系统进行分析。使用DAS 2.0软件计算相关药代动力学参数。测定的药代动力学参数包括消除半衰期（t1/2）、达峰时间（Tmax）、最大血浆浓度（Cmax）、浓度-时间曲线下面积（AUC）、平均滞留时间（MRT）和生物利用度（F）。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在SD大鼠中评估了KPH2f和维利诺德的药代动力学特性。结果总结于表5和图5。单次静脉注射5 mg/kg KPH2f后，其半衰期（t1/2）、达峰时间（Tmax）、最大浓度（Cmax）和平均滞留时间（MRT）分别为4.19 h、0.17 h、11093.32 ng/mL和4.80 h。口服5 mg/kg KPH2f后，其吸收迅速，Tmax为0.50 h，t1/2为5.14 h，MRT为3.17 h，Cmax为7649.04 ng/mL，曲线下面积（AUC）为5656.03 ng/mL·h。值得注意的是，KPH2f 的口服生物利用度为 30.13%，明显优于维利尿素（21.47%），足以满足口服候选药物的要求。总体而言，与维利尿素相比，KPH2f 表现出更优异的成药性。[1]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞毒性试验[1]
选择KPH2f通过成熟的MTT法评估其对正常细胞的体外细胞毒性。将人肾HK2细胞与不同浓度的KPH2f孵育24小时，并测定细胞活力。如图6所示，KPH2f对HK2细胞几乎没有细胞毒性，24小时和48小时孵育的IC50值分别为207.56 mM和167.24 mM。而维利尿素的细胞毒性（24小时和48小时孵育的IC50值分别为197.45 mM和108.78 mM）则强于KPH2f。这些结果表明KPH2f具有良好的细胞毒性，在治疗浓度（例如<50 mM）下不太可能引起毒性。 hERG抑制活性测定 [1] 与hERG钾通道高亲和力结合的化合物可能诱发QT间期延长，从而导致严重的心脏毒性。因此，我们采用手动膜片钳技术检测了KPH2f的体外hERG抑制活性。如图7所示，KPH2f在50 mM浓度下对hERG钾通道没有抑制作用，而阳性对照西沙必利在1 mM浓度下即可完全抑制钾通道（电流降低100%），这与之前的报道一致。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
其中，化合物KPH2f对URAT1的抑制活性最高，IC50值为0.24 mM，与维利尿酸（IC50 = 0.17 mM）相当。机制研究表明，10 mM的维利尿酸对GLUT9无影响，而KPH2f能有效抑制GLUT9，IC50值为9.37 ± 7.10 mM，提示其作用机制可能同时靶向URAT1和GLUT9。此外，KPH2f对OAT1和ABCG2（两种参与尿酸分泌和多种药物排泄的重要转运蛋白）的抑制作用很小。因此，KPH2f不太可能引起OAT1/ABCG2介导的药物相互作用，也不太可能中和URAT1/GLUT9抑制剂的促尿酸排泄作用。值得注意的是，与维利尿酸（10 mg/kg）相比，KPH2f（10 mg/kg）在降低小鼠高尿酸血症模型中血清尿酸水平方面同样有效，且表现出更高的促尿酸排泄作用。KPH2f更高的促尿酸排泄作用可能归因于其对URAT1/GLUT9的双重靶向作用，而维利尿酸仅靶向URAT1。此外，KPH2f表现出良好的药代动力学特性，口服生物利用度为30.13%，明显优于维利尿酸（21.47%）。而且，KPH2f安全性良好，未引起hERG毒性、体外细胞毒性（低于维利尿酸）和体内肾损伤。最后，利用同源模型进行的分子对接分析表明，KPH2f 和维利尿酸与 URAT1 的结合方式相似，柔性 NH 连接基有助于提高 KPH2f 与 URAT1 的结合亲和力。定点突变研究进一步证实了 KPH2f 与 URAT1 之间的结合相互作用，残基 F358 和 R487 是 KPH2f 与 URAT1 结合所特有的。综上所述，这些结果表明 KPH2f 是一种新型、安全、有效的双重 URAT1/GLUT9 抑制剂，具有良好的成药性，值得作为抗高尿酸血症候选药物进行进一步研究。[1]
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| 分子式 |
C24H17N3NAO2S
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|---|---|
| 分子量 |
434.47
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| 精确质量 |
433.086
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| CAS号 |
2760615-09-4
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| 相关CAS号 |
NA for KPH2f
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| PubChem CID |
163196377
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| 外观&性状 |
Light yellow to light brown solid powder
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| tPSA |
114
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
642
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
N(C1=CN=CC=C1SCC1C=CC=CC=1C(=O)O)C1=CC=C(C2C=CC=CC1=2)C#N.[Na]
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| InChi Key |
VFQCYGPPRZHSKX-UHFFFAOYSA-M
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H17N3O2S.Na/c25-13-16-9-10-21(20-8-4-3-6-18(16)20)27-22-14-26-12-11-23(22)30-15-17-5-1-2-7-19(17)24(28)29;/h1-12,14,27H,15H2,(H,28,29);/q;+1/p-1
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| 化学名 |
sodium;2-[[3-[(4-cyanonaphthalen-1-yl)amino]pyridin-4-yl]sulfanylmethyl]benzoate
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| 别名 |
KPH2f; 2760615-09-4; CHEMBL5202967; URAT1/GLUT9 inhibitor; Sodium 2-(((3-((4-cyanonaphthalen-1-yl)amino)pyridin-4-yl)thio)methyl)benzoate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3017 mL | 11.5083 mL | 23.0165 mL | |
| 5 mM | 0.4603 mL | 2.3017 mL | 4.6033 mL | |
| 10 mM | 0.2302 mL | 1.1508 mL | 2.3017 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
URAT1-IN-15
URAT1 inhibitor 11
Epaminurad hydrochloride
Darbinuradum
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