Luciferase, firefly

别名: 荧光素酶;荧光素酶(萤火虫);荧光素酶 来源于萤火虫;重组型酵素;荧光粉,蓝绿光夜光粉,注塑丝印专用发光粉;荧光粉,天蓝光夜光粉,丝网印刷专用发光粉发光颜料;荧光粉,长余辉夜光粉,黄绿光发光粉;重组级;荧光素酶,北美产萤火虫(萤火虫);荧光素酶 *重组荧光素*;Luciferase from?Photinus pyralis?(firefly), 超纯级,≥98%(SDS-电泳),冻干粉
目录号: V29891 纯度: ≥98%
萤火虫荧光素酶是一种发光酶,负责萤火虫和磕头虫的生物发光。
Luciferase, firefly CAS号: 61970-00-1
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
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产品描述
萤火虫荧光素酶是一种发光酶,负责萤火虫和叩甲的生物发光。
萤火虫荧光素酶(CAS号:61970-00-1)是一种62 kDa的发光酶,负责萤火虫和叩甲的生物发光。它催化萤火虫荧光素的氧化,该过程分为两步,需要ATP、分子氧和杂环化合物荧光素。该酶是由大肠杆菌表达的luc基因产生的重组蛋白,来源于美洲萤火虫(Photinus pyralis)。其活性以相对光单位(RLU)衡量。
生物活性&实验参考方法
靶点
Firefly luciferase targets ATP for bioluminescent detection. The enzyme catalyzes the oxidation of D-luciferin in the presence of Mg2+-ATP and oxygen, resulting in the emission of light. Because of the requirement of ATP, firefly luciferases have been used extensively in biotechnology for ATP detection. The enzyme's activity is dependent on ATP concentration.
体外研究 (In Vitro)
萤火虫和叩甲中引起生物发光的发光酶称为萤火虫荧光素酶。这种酶需要ATP和氧气来催化萤火虫荧光素的氧化。由于萤火虫荧光素酶需要ATP,因此它在生物技术领域得到了广泛应用。在体外,萤火虫荧光素酶在Mg2+-ATP和氧气的存在下催化荧光素产生光。该酶可用于检测痕量ATP。它被用作各种检测中的报告基因,以研究基因表达和细胞代谢。该酶的活性通过发光强度来测量,发光强度与ATP浓度成正比。
体内研究 (In Vivo)
在体内,萤火虫荧光素酶被用作动物模型中的生物发光报告基因,用于非侵入性成像。该酶的表达由特定的启动子驱动,用于研究活体动物的基因表达。基于荧光素酶的成像技术可以实时监测肿瘤生长、基因表达和细胞迁移。该酶需要ATP和荧光素,而荧光素在体内成像时需要外源性给药。
酶活实验
萤火虫荧光素酶的体外酶活性测定包括测量在荧光素、ATP 和 Mg²⁺ 存在下产生的光。将酶与底物在合适的缓冲体系中孵育,并使用发光仪测量发光强度。ATP 浓度通过测量光强度来定量,光强度与 ATP 水平成正比。对于报告基因测定,将表达荧光素酶的细胞裂解并与底物混合,以测量荧光素酶活性。
细胞实验
萤火虫荧光素酶的体外细胞检测是在表达荧光素酶基因的细胞中进行的。细胞在含有5% CO₂的37°C适宜培养基中培养。通过添加荧光素底物并使用发光仪测量发光强度来测定荧光素酶活性。该酶被用作报告基因,用于研究启动子活性、基因表达和细胞信号传导。细胞活力通过标准检测方法进行评估。所有实验均设置了适当的阳性对照和阴性对照。
动物实验
萤火虫荧光素酶的体内研究在小鼠模型中进行,用于生物发光成像。将荧光素底物注射到小鼠体内,并使用生物发光成像系统进行成像。通过测量发光强度来评估基因表达、肿瘤生长或细胞定位。该酶可用作多种疾病模型中的报告基因。研究期间会监测动物的临床症状。所有研究均按照机构动物护理指南进行。
药代性质 (ADME/PK)
萤火虫荧光素酶(分子量 62 kDa)是一种来自 Photinus pyralis 的重组酶。它在 Mg2+-ATP 和氧气存在下催化 D-荧光素的氧化,产生光。该酶可用于 ATP 检测,并作为生物发光检测中的报告基因。它以冻干粉末形式提供,具有高比活性(≥2.0×10^11 RLU/mg 蛋白)。该酶在推荐的储存条件下稳定。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
萤火虫荧光素酶通常被认为作为研究试剂是安全的。该酶是一种重组蛋白,用于生物发光检测和报告基因研究。现有文献中未报道在研究用浓度下存在显著不良反应。该酶仅供研究使用。处理该化合物时应遵循标准的实验室安全操作规程。用于治疗性药物开发需要进行全面的毒理学评估。
其他信息
萤火虫荧光素酶是一种来自萤火虫(Photinus pyralis)的62 kDa发光酶,它能在Mg2+-ATP和氧气存在下催化D-荧光素的氧化,产生光。该酶广泛应用于生物技术领域,用于ATP检测以及作为生物发光检测中的报告基因。萤火虫荧光素酶可用于体内非侵入性成像,以研究基因表达、肿瘤生长和细胞迁移。其活性以相对光单位(RLU)衡量。所有应用均仅限于非人体研究。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子量
0
精确质量
321.158
CAS号
61970-00-1
相关CAS号
Luciferase;9014-00-0
PubChem CID
46213588
外观&性状
White to off-white solid powder
闪点
231.8 °F
LogP
2.7
tPSA
86.2
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
24
分子复杂度/Complexity
454
定义原子立体中心数目
0
SMILES
Cc1cccc(c1)CC(C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)c2ccccc2
InChi Key
CQZVJEKKNHOFNB-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C18H19N5O/c1-12(2)15(11-24)21-17-7-8-18-20-10-16(23(18)22-17)14-5-3-13(9-19)4-6-14/h3-8,10,12,15,24H,11H2,1-2H3,(H,21,22)
化学名
4-[6-[(1-hydroxy-3-methylbutan-2-yl)amino]imidazo[1,2-b]pyridazin-3-yl]benzonitrile
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们