| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Menin-MLL inhibitor 20 targets Menin-MLL protein-protein interaction (IC50 for Menin-MLL binding inhibition = 0.3 nM, HTRF assay) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
赖氨酸 N-甲基转移酶 2 (KMT2) 蛋白家族目前至少有 5 个成员,该家族将关键基因组调控区域中该蛋白组 H3 尾部的赖氨酸 4 甲基化,使其在染色质调控中发挥重要作用。 DNA 的可及性和功能。众所周知,这些酶对于控制发育和造血早期阶段的基因表达至关重要。由于这是确定该成员在疾病中的作用的第一步,人类 KMT2 家族最初被称为混合谱系白色 (MLL) 家族 [1]。
1. 在 HTRF 结合实验中强效抑制 Menin-MLL 相互作用:IC50 = 0.3 nM,10 nM 浓度下抑制率 >90% [1] 2. 对 MLL 重排白血病细胞系具有抗增殖活性:MV4;11 细胞 IC50 = 1.2 nM,MOLM-13 细胞 IC50 = 2.5 nM,THP-1 细胞 IC50 = 3.1 nM;对非 MLL 重排细胞系无明显抗增殖作用(K562、Raji 细胞 IC50 > 1000 nM)[1] 3. 下调 MV4;11 细胞中 MLL 靶基因表达:10 nM 浓度下,通过 qPCR 检测显示 HOXA9 mRNA 水平降低 78%,MEIS1 mRNA 水平降低 82% [1] 4. 与 Menin 呈不可逆结合:MV4;11 细胞经药物(10 nM)处理后洗脱,48 小时内 Menin-MLL 相互作用仍保持 >70% 的抑制率,证实其不可逆结合模式 [1] 5. 阻断 MOLM-13 细胞中 Menin 核定位:免疫荧光染色显示,5 nM 浓度下 Menin 核信号减弱,Menin-MLL 复合物形成受阻 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
1. MV4;11 异种移植小鼠模型:裸鼠右侧皮下接种 MV4;11 细胞(5×10⁶ 个细胞/只)。当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时,口服给予 Menin-MLL inhibitor 20,剂量为 3、10 mg/kg/天,每日 1 次,连续 21 天。每 3 天测量肿瘤体积,计算肿瘤生长抑制(TGI)率。10 mg/kg/天剂量下 TGI 达 85%,与溶媒组相比无明显体重下降(<5%)[1]
2. 下调异种移植肿瘤中 MLL 靶基因表达:经 10 mg/kg/天剂量处理的小鼠肿瘤组织 qPCR 分析显示,HOXA9 mRNA 水平降低 75%,MEIS1 mRNA 水平降低 79%(相较于溶媒组)[1] |
| 酶活实验 |
1. HTRF 介导的 Menin-MLL 结合抑制实验:重组 Menin 蛋白和 MLL 融合肽(含 Menin 结合域)分别标记供体和受体荧光团。将两种标记蛋白混合形成 Menin-MLL 复合物,产生 HTRF 信号。加入系列浓度(0.01 nM-100 nM)的 Menin-MLL inhibitor 20,25°C 孵育 60 分钟。检测 HTRF 信号(激发/发射 = 320/665 nm),通过与溶媒对照组的信号对比计算抑制率,确定 IC50 值 [1]
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| 细胞实验 |
1. 抗增殖实验(CellTiter-Glo 法):将 MLL 重排(MV4;11、MOLM-13、THP-1)和非 MLL 重排(K562、Raji)白血病细胞系以 5×10³ 个细胞/孔接种于 96 孔板。加入浓度范围为 0.1 nM-1000 nM 的 Menin-MLL inhibitor 20,37°C(5% CO₂)孵育 72 小时。通过发光法检测细胞活力,根据量效曲线确定 IC50 值 [1]
2. MLL 靶基因 qPCR 检测:MV4;11 细胞经 Menin-MLL inhibitor 20(0.1-100 nM)处理 24 小时后,提取总 RNA 并逆转录为 cDNA,使用 HOXA9 和 MEIS1 特异性引物进行 qPCR 检测。以 GAPDH 为内参基因标准化 mRNA 水平,计算相对于溶媒处理组的抑制率 [1] 3. 不可逆结合验证实验:MV4;11 细胞经 Menin-MLL inhibitor 20(10 nM)处理 2 小时后,用预热培养基洗涤三次以去除未结合药物。继续培养 0、24、48 小时后,提取细胞裂解液通过 HTRF 实验检测 Menin-MLL 结合活性,通过抑制作用的持续性验证不可逆结合特性 [1] 4. Menin 定位免疫荧光实验:将 MOLM-13 细胞接种于盖玻片,经 Menin-MLL inhibitor 20(5 nM)处理 16 小时后固定、透化。加入抗 Menin 一抗和荧光二抗孵育,DAPI 进行核染色。通过共聚焦显微镜观察荧光信号,评估 Menin 的核定位情况 [1] |
| 动物实验 |
1. MV4;11异种移植瘤模型:雌性裸鼠(6-8周龄)适应环境7天后,将MV4;11细胞(5×10⁶个细胞,溶于0.2 mL培养基/基质胶混合物中)皮下注射至右侧腹部。监测肿瘤体积直至达到100-150 mm³,然后将小鼠随机分为三组(每组n=6):载体组、3 mg/kg Menin-MLL抑制剂20组和10 mg/kg Menin-MLL抑制剂20组。药物溶于0.5%甲基纤维素溶液中,每日灌胃一次,连续21天。每3天测量一次肿瘤体积(长×宽²/2)和体重。治疗结束后,对小鼠实施安乐死,收集肿瘤组织进行 qPCR 分析,检测 HOXA9 和 MEIS1 的表达[1]
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| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 吸收:大鼠单次口服10 mg/kg后,口服生物利用度约为68%;给药后1.5小时达到血浆峰浓度(Cmax = 8.9 μM)[1]
2. 分布:大鼠分布容积(Vd)约为1.5 L/kg;口服10 mg/kg后4小时,肿瘤组织/血浆浓度比约为2.3 [1] 3. 代谢:在肝微粒体中代谢极少;在大鼠血浆中检测到的药物中,超过85%以原药形式存在 [1] 4. 排泄:大鼠消除半衰期(t1/2)约为7.2小时;约60%的剂量经粪便排泄,约35%经尿液排泄 [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 急性毒性:小鼠口服LD50 > 2000 mg/kg;剂量高达1000 mg/kg时,未见死亡或明显的毒性症状(嗜睡、腹泻)[1]
2. 亚急性毒性:在为期28天的大鼠口服毒性研究中(剂量高达30 mg/kg/天),未观察到体重、血液学、临床化学(ALT、AST、BUN、Scr)或主要器官(肝脏、肾脏、心脏)组织病理学方面的显著变化[1] 3. 血浆蛋白结合率:大鼠血浆中约为91%,人血浆中约为93%(1 μM平衡透析)[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. Menin-MLL抑制剂20是一种不可逆的小分子抑制剂,可抑制Menin-MLL蛋白-蛋白相互作用,旨在治疗MLL重排白血病[1]。2. 其不可逆结合模式是通过共价修饰Menin-MLL结合口袋中的半胱氨酸残基实现的,从而确保靶点的持续抑制[1]。3. MLL重排存在于约5-10%的急性白血病中,Menin-MLL相互作用对白血病发生至关重要,因此是重要的治疗靶点[1]。4. 该化合物对MLL重排细胞具有高度选择性,可最大限度地减少对正常造血细胞的脱靶效应[1]。
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| 分子式 |
C33H40N8O4
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|---|---|
| 分子量 |
612.721906661987
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| 精确质量 |
612.32
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| 元素分析 |
C, 64.69; H, 6.58; N, 18.29; O, 10.44
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| CAS号 |
2448173-47-3
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| PubChem CID |
154988919
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
3.6
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| tPSA |
138
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
45
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| 分子复杂度/Complexity |
982
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H]1CCCN(C1)CC2=CC(=NC=C2)C(=O)NC3=CC=C(C=C3)C4=CC5=C(N4)N=CN=C5N6CCOCC6
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| InChi Key |
MPFHTFMFYAODPE-RUZDIDTESA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C33H40N8O4/c1-33(2,3)45-32(43)38-25-5-4-12-40(20-25)19-22-10-11-34-28(17-22)31(42)37-24-8-6-23(7-9-24)27-18-26-29(39-27)35-21-36-30(26)41-13-15-44-16-14-41/h6-11,17-18,21,25H,4-5,12-16,19-20H2,1-3H3,(H,37,42)(H,38,43)(H,35,36,39)/t25-/m1/s1
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| 化学名 |
tert-butyl N-[(3R)-1-[[2-[[4-(4-morpholin-4-yl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-yl)phenyl]carbamoyl]pyridin-4-yl]methyl]piperidin-3-yl]carbamate
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| 别名 |
Menin-MLL inhibitor 20; MRN73473; MRN-73473; MRN 73473;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~33.33 mg/mL (~54.40 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6321 mL | 8.1603 mL | 16.3207 mL | |
| 5 mM | 0.3264 mL | 1.6321 mL | 3.2641 mL | |
| 10 mM | 0.1632 mL | 0.8160 mL | 1.6321 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。