Menin-MLL inhibitor 20

别名: Menin-MLL inhibitor 20; MRN73473; MRN-73473; MRN 73473;
目录号: V2515 纯度: ≥98%
Menin-MLL 抑制剂 20 是 menin-MLL 相互作用的不可逆抑制剂,具有抗肿瘤活性(WO2020142557A1,中间体 6)。
Menin-MLL inhibitor 20 CAS号: 2448173-47-3
产品类别: Epigenetic Reader Domain
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
10mg
25mg
50mg
100mg
250mg
Other Sizes
点击了解更多
  • 与全球5000+客户建立关系
  • 覆盖全球主要大学、医院、科研院所、生物/制药公司等
  • 产品被大量CNS顶刊文章引用
InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
Menin-MLL 抑制剂 20 是 menin-MLL 相互作用的不可逆抑制剂,具有抗肿瘤活性(WO2020142557A1,中间体 6)。
生物活性&实验参考方法
靶点
Menin-MLL inhibitor 20 targets Menin-MLL protein-protein interaction (IC50 for Menin-MLL binding inhibition = 0.3 nM, HTRF assay) [1]
体外研究 (In Vitro)
赖氨酸 N-甲基转移酶 2 (KMT2) 蛋白家族目前至少有 5 个成员,该家族将关键基因组调控区域中该蛋白组 H3 尾部的赖氨酸 4 甲基化,使其在染色质调控中发挥重要作用。 DNA 的可及性和功能。众所周知,这些酶对于控制发育和造血早期阶段的基因表达至关重要。由于这是确定该成员在疾病中的作用的第一步,人类 KMT2 家族最初被称为混合谱系白色 (MLL) 家族 [1]。
1. 在 HTRF 结合实验中强效抑制 Menin-MLL 相互作用:IC50 = 0.3 nM,10 nM 浓度下抑制率 >90% [1]
2. 对 MLL 重排白血病细胞系具有抗增殖活性:MV4;11 细胞 IC50 = 1.2 nM,MOLM-13 细胞 IC50 = 2.5 nM,THP-1 细胞 IC50 = 3.1 nM;对非 MLL 重排细胞系无明显抗增殖作用(K562、Raji 细胞 IC50 > 1000 nM)[1]
3. 下调 MV4;11 细胞中 MLL 靶基因表达:10 nM 浓度下,通过 qPCR 检测显示 HOXA9 mRNA 水平降低 78%,MEIS1 mRNA 水平降低 82% [1]
4. 与 Menin 呈不可逆结合:MV4;11 细胞经药物(10 nM)处理后洗脱,48 小时内 Menin-MLL 相互作用仍保持 >70% 的抑制率,证实其不可逆结合模式 [1]
5. 阻断 MOLM-13 细胞中 Menin 核定位:免疫荧光染色显示,5 nM 浓度下 Menin 核信号减弱,Menin-MLL 复合物形成受阻 [1]
体内研究 (In Vivo)
1. MV4;11 异种移植小鼠模型:裸鼠右侧皮下接种 MV4;11 细胞(5×10⁶ 个细胞/只)。当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时,口服给予 Menin-MLL inhibitor 20,剂量为 3、10 mg/kg/天,每日 1 次,连续 21 天。每 3 天测量肿瘤体积,计算肿瘤生长抑制(TGI)率。10 mg/kg/天剂量下 TGI 达 85%,与溶媒组相比无明显体重下降(<5%)[1]
2. 下调异种移植肿瘤中 MLL 靶基因表达:经 10 mg/kg/天剂量处理的小鼠肿瘤组织 qPCR 分析显示,HOXA9 mRNA 水平降低 75%,MEIS1 mRNA 水平降低 79%(相较于溶媒组)[1]
酶活实验
1. HTRF 介导的 Menin-MLL 结合抑制实验:重组 Menin 蛋白和 MLL 融合肽(含 Menin 结合域)分别标记供体和受体荧光团。将两种标记蛋白混合形成 Menin-MLL 复合物,产生 HTRF 信号。加入系列浓度(0.01 nM-100 nM)的 Menin-MLL inhibitor 20,25°C 孵育 60 分钟。检测 HTRF 信号(激发/发射 = 320/665 nm),通过与溶媒对照组的信号对比计算抑制率,确定 IC50 值 [1]
细胞实验
1. 抗增殖实验(CellTiter-Glo 法):将 MLL 重排(MV4;11、MOLM-13、THP-1)和非 MLL 重排(K562、Raji)白血病细胞系以 5×10³ 个细胞/孔接种于 96 孔板。加入浓度范围为 0.1 nM-1000 nM 的 Menin-MLL inhibitor 20,37°C(5% CO₂)孵育 72 小时。通过发光法检测细胞活力,根据量效曲线确定 IC50 值 [1]
2. MLL 靶基因 qPCR 检测:MV4;11 细胞经 Menin-MLL inhibitor 20(0.1-100 nM)处理 24 小时后,提取总 RNA 并逆转录为 cDNA,使用 HOXA9 和 MEIS1 特异性引物进行 qPCR 检测。以 GAPDH 为内参基因标准化 mRNA 水平,计算相对于溶媒处理组的抑制率 [1]
3. 不可逆结合验证实验:MV4;11 细胞经 Menin-MLL inhibitor 20(10 nM)处理 2 小时后,用预热培养基洗涤三次以去除未结合药物。继续培养 0、24、48 小时后,提取细胞裂解液通过 HTRF 实验检测 Menin-MLL 结合活性,通过抑制作用的持续性验证不可逆结合特性 [1]
4. Menin 定位免疫荧光实验:将 MOLM-13 细胞接种于盖玻片,经 Menin-MLL inhibitor 20(5 nM)处理 16 小时后固定、透化。加入抗 Menin 一抗和荧光二抗孵育,DAPI 进行核染色。通过共聚焦显微镜观察荧光信号,评估 Menin 的核定位情况 [1]
动物实验
1. MV4;11异种移植瘤模型:雌性裸鼠(6-8周龄)适应环境7天后,将MV4;11细胞(5×10⁶个细胞,溶于0.2 mL培养基/基质胶混合物中)皮下注射至右侧腹部。监测肿瘤体积直至达到100-150 mm³,然后将小鼠随机分为三组(每组n=6):载体组、3 mg/kg Menin-MLL抑制剂20组和10 mg/kg Menin-MLL抑制剂20组。药物溶于0.5%甲基纤维素溶液中,每日灌胃一次,连续21天。每3天测量一次肿瘤体积(长×宽²/2)和体重。治疗结束后,对小鼠实施安乐死,收集肿瘤组织进行 qPCR 分析,检测 HOXA9 和 MEIS1 的表达[1]
药代性质 (ADME/PK)
1. 吸收:大鼠单次口服10 mg/kg后,口服生物利用度约为68%;给药后1.5小时达到血浆峰浓度(Cmax = 8.9 μM)[1]
2. 分布:大鼠分布容积(Vd)约为1.5 L/kg;口服10 mg/kg后4小时,肿瘤组织/血浆浓度比约为2.3 [1]
3. 代谢:在肝微粒体中代谢极少;在大鼠血浆中检测到的药物中,超过85%以原药形式存在 [1]
4. 排泄:大鼠消除半衰期(t1/2)约为7.2小时;约60%的剂量经粪便排泄,约35%经尿液排泄 [1]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
1. 急性毒性:小鼠口服LD50 > 2000 mg/kg;剂量高达1000 mg/kg时,未见死亡或明显的毒性症状(嗜睡、腹泻)[1]
2. 亚急性毒性:在为期28天的大鼠口服毒性研究中(剂量高达30 mg/kg/天),未观察到体重、血液学、临床化学(ALT、AST、BUN、Scr)或主要器官(肝脏、肾脏、心脏)组织病理学方面的显著变化[1]
3. 血浆蛋白结合率:大鼠血浆中约为91%,人血浆中约为93%(1 μM平衡透析)[1]
参考文献

[1]. Irreversible inhibitors of menin-mll interaction. WO2020142557A1.

其他信息
1. Menin-MLL抑制剂20是一种不可逆的小分子抑制剂,可抑制Menin-MLL蛋白-蛋白相互作用,旨在治疗MLL重排白血病[1]。2. 其不可逆结合模式是通过共价修饰Menin-MLL结合口袋中的半胱氨酸残基实现的,从而确保靶点的持续抑制[1]。3. MLL重排存在于约5-10%的急性白血病中,Menin-MLL相互作用对白血病发生至关重要,因此是重要的治疗靶点[1]。4. 该化合物对MLL重排细胞具有高度选择性,可最大限度地减少对正常造血细胞的脱靶效应[1]。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C33H40N8O4
分子量
612.721906661987
精确质量
612.32
元素分析
C, 64.69; H, 6.58; N, 18.29; O, 10.44
CAS号
2448173-47-3
PubChem CID
154988919
外观&性状
Light yellow to yellow solid powder
LogP
3.6
tPSA
138
氢键供体(HBD)数目
3
氢键受体(HBA)数目
9
可旋转键数目(RBC)
9
重原子数目
45
分子复杂度/Complexity
982
定义原子立体中心数目
1
SMILES
CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H]1CCCN(C1)CC2=CC(=NC=C2)C(=O)NC3=CC=C(C=C3)C4=CC5=C(N4)N=CN=C5N6CCOCC6
InChi Key
MPFHTFMFYAODPE-RUZDIDTESA-N
InChi Code
InChI=1S/C33H40N8O4/c1-33(2,3)45-32(43)38-25-5-4-12-40(20-25)19-22-10-11-34-28(17-22)31(42)37-24-8-6-23(7-9-24)27-18-26-29(39-27)35-21-36-30(26)41-13-15-44-16-14-41/h6-11,17-18,21,25H,4-5,12-16,19-20H2,1-3H3,(H,37,42)(H,38,43)(H,35,36,39)/t25-/m1/s1
化学名
tert-butyl N-[(3R)-1-[[2-[[4-(4-morpholin-4-yl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-yl)phenyl]carbamoyl]pyridin-4-yl]methyl]piperidin-3-yl]carbamate
别名
Menin-MLL inhibitor 20; MRN73473; MRN-73473; MRN 73473;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~33.33 mg/mL (~54.40 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
View More

注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
View More

口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.6321 mL 8.1603 mL 16.3207 mL
5 mM 0.3264 mL 1.6321 mL 3.2641 mL
10 mM 0.1632 mL 0.8160 mL 1.6321 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
+
+

计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

相关产品
联系我们