| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Serine Protease; Granzyme; I-kappaBalpha
Nafamostat targets a wide range of serine proteases, which are involved in various physiological and pathological processes. Its primary clinical targets include enzymes of the coagulation and fibrinolytic systems, such as thrombin, factor Xa, and factor XIIa. It also inhibits the kallikrein-kinin system, the complement system, and pancreatic proteases like trypsin. Furthermore, it inhibits the activation of protease-activated receptors (PARs). Nafamostat's mechanism of action involves covalent, reversible binding to the active site of these serine proteases, effectively blocking their proteolytic activity. It also promotes endothelium-dependent vasorelaxation via the Akt-eNOS dependent pathway, and its metabolites inhibit channel-activating proteases such as CAP1 (prostasin). |
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| 体外研究 (In Vitro) |
萘莫司他甲磺酸盐显著抑制血小板β-血小板球蛋白（βTG）在60分钟和120分钟后的释放。使用萘莫司他甲磺酸盐（NM）时，中性粒细胞弹性蛋白酶的释放并不显著；120分钟时，NM组血浆弹性蛋白酶-α1-抗胰蛋白酶复合物浓度为0.16 mg/mL，对照组为1.24 mg/mL。萘莫司他甲磺酸盐完全抑制C1抑制剂与FXIIa和激肽释放酶的复合物形成。[1] 萘莫司他甲磺酸盐抑制多种蛋白酶，这些蛋白酶可能在弥散性血管内凝血（DIC）的发病机制中发挥重要作用。萘莫司他甲磺酸盐以0.1 μM的IC50值浓度依赖性地抑制TF-F.VIIa介导的F.Xa外源性途径的活性。[2]甲磺酸萘莫司他以浓度依赖的方式抑制双相ASIC3电流的初始瞬态成分，IC50值约为2.5 mM。[3]体外实验表明，萘莫司他是一种强效的丝氨酸蛋白酶抑制剂。它对胰蛋白酶、激肽释放酶、纤溶酶和凝血酶以及补体系统酶均表现出强烈的选择性抑制作用。其抗凝血活性主要归因于对凝血酶和Xa因子的抑制。萘莫司他还能抑制蛋白酶激活受体（PARs）的激活。由于其能够抑制TMPRSS2（一种对SARS-CoV-2刺突蛋白启动至关重要的宿主细胞丝氨酸蛋白酶），因此萘莫司他作为一种潜在的抗病毒药物备受关注。此外，该化合物还因其在细胞模型中通过Akt-eNOS通路促进内皮依赖性血管舒张的能力而备受关注。
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| 体内研究 (In Vivo) |
甲磺酸萘莫司他（10 mg/kg）可抑制由类胰蛋白酶引起的搔抓行为，但对血清素或组胺引起的搔抓行为无效。甲磺酸萘莫司他（1-10 mg/kg）可产生剂量依赖性的搔抓行为抑制作用，这种抑制作用由皮内注射化合物 48/80（10 mg/位点）引起。甲磺酸萘莫司他（10 mg/kg）可抑制小鼠皮肤中的类胰蛋白酶活性。[4]
在体内，萘莫司他主要用于血液透析期间的抗凝治疗。其半衰期短、代谢迅速，使其适用于此应用，因为它可以在体外循环中提供有效的抗凝作用，而不会产生明显的全身性副作用。此外，它还被证明可以减轻动物模型中缺血再灌注引起的肾损伤。在日本，萘莫司他已用于临床治疗急性胰腺炎和弥散性血管内凝血（DIC）。近期，研究人员在体内探索了其作为抗病毒药物的潜力，结果表明它可以抑制SARS-CoV-2的复制。然而，靶丝氨酸蛋白酶的突变可能导致耐药性的产生。 |
| 酶活实验 |
体外循环（CPB）中，体液和细胞炎症反应的激活会增加术后出血和多器官损伤的风险。本研究在模拟CPB的体外循环回路中，比较了单独使用肝素与萘莫司他甲磺酸盐（NM，一种特异性抑制胰蛋白酶样酶的蛋白酶抑制剂）联合应用的效果。NM在60分钟和120分钟时显著抑制血小板β-血小板球蛋白（β-TG）的释放。血小板计数无显著差异。NM组的ADP诱导血小板聚集减少，这是由于NM对血小板功能的直接作用。NM可显著抑制中性粒细胞弹性蛋白酶的释放；120分钟时，NM组的血浆弹性蛋白酶-α1-抗胰蛋白酶复合物浓度为0.16微克/毫升，而对照组为1.24微克/毫升。 NM 完全抑制 C1 抑制剂与激肽释放酶和 FXIIa 的复合物形成。NM 不改变补体激活标志物（C1-C1-抑制剂复合物和 C5b-9）或凝血酶生成指标（F1.2）。然而，在 120 分钟时，通过纤维蛋白肽 A 释放量测定的凝血酶活性显著降低。数据表明，体外循环期间的补体激活与中性粒细胞激活的相关性较差，激肽释放酶或 FXIIa 或两者可能是更重要的激动剂。NM 抑制两种重要的接触系统蛋白以及血小板和中性粒细胞释放的能力，提示其有可能在临床体外循环期间抑制炎症反应 [1]。
对于体外无细胞酶活性测定，可以使用针对每种酶的显色或荧光底物来测定萘莫司他对其靶蛋白酶的抑制活性。例如，为了测定其对凝血酶的抑制作用，可以使用显色底物，如S-2238。该测定方法是将不同浓度的萘莫司他与固定浓度的纯化酶（例如凝血酶）及其底物一起孵育。通过分光光度法（显色底物在405 nm处）监测与酶活性成正比的底物裂解速率。IC50值代表抑制50%酶活性所需的萘莫司他浓度，可通过剂量反应曲线计算得出。 |
| 细胞实验 |
细胞活力检测
细胞类型：MDAPanc-28 细胞 测试浓度：80 μg/mL 孵育时间：24 小时，48 小时 实验结果：在 24 小时和 48 小时均显著降低了 MDAPanc-28 细胞的活力。 在细胞实验中，可以研究萘莫司他（Nafamostat）对内皮细胞中 Akt-eNOS 通路的影响。将细胞用不同浓度的萘莫司他处理一定时间，然后使用磷酸化特异性抗体通过蛋白质印迹法检测 Akt 和 eNOS 的磷酸化水平。这表明该化合物能够促进内皮依赖性血管舒张。为了研究其抗病毒活性，在病毒感染前或感染期间，用萘莫司他处理易感SARS-CoV-2感染的细胞（例如Vero E6细胞）。孵育后，通过qPCR或噬斑试验测量病毒RNA来定量病毒复制水平，并确定抑制病毒进入的EC50（半数有效浓度）。 |
| 动物实验 |
将甲磺酸萘莫司他溶于5%葡萄糖溶液中，并在致痒剂注射前5分钟静脉注射。给药5分钟后，从鼠背部分离皮肤，并根据Wolters等人（2001）描述的方法测定皮肤中胰蛋白酶和糜蛋白酶的活性。胰蛋白酶活性测定中，将皮肤样本在含有2 M NaCl的10 mM Tris缓冲液（pH 6.1）中匀浆并超声处理。将溶液在4℃下以700×g离心5分钟。取1 μL上清液（5 mg蛋白/ml）加入49 μL溶液A（0.06 M Tris缓冲液，pH 7.8，含有0.4%二甲基亚砜和30 μg/ml肝素）。将 50 μl 混合液与 50 μl 浓度为 480 μg/ml 的 Np-Tosyl-Gly-Pro-Arg-p-硝基苯胺溶液 A 在 37 °C 下反应 1 小时。释放的游离硝基苯胺通过比色法在 420 nm 处测定。为测定糜酶活性，将皮肤样本在溶液 B（0.45 M Tris-HCl，pH 8.0，含 0.1% 二甲基亚砜和 1.8 mM NaCl）中匀浆并超声处理。匀浆液在 4 °C 下以 700×g 离心 5 分钟。将 10 μL 上清液（5 mg 蛋白/mL）加入 40 μL 溶液 B 中。将此混合液 (50 μL) 与 50 μL 浓度为 2 mg/mL 的琥珀酰-Ala-Ala-Pro-Phr-对硝基苯胺乙酸酯溶液 B 在 37 °C 下反应 1 小时。释放的游离硝基苯胺通过比色法在 420 nm 处测定。[2]
由于萘莫司他具有肽类药物的特性且口服生物利用度低，因此在体内研究中通常采用静脉给药。在缺血再灌注损伤的动物模型中，例如肾脏或心脏模型，萘莫司他在缺血事件发生前以推注或持续输注的方式给药。终点指标包括梗死面积的测量、器官损伤的血清生物标志物（例如，用于肾损伤的肌酐、尿素氮）以及组织损伤的组织学分析。在急性胰腺炎模型中，萘莫司他用于降低胰酶活性和炎症反应。在抗病毒疗效方面，可将其用于SARS-CoV-2感染的动物模型，评估终点包括肺组织中的病毒载量、炎症细胞因子水平和存活率。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收、分布和排泄
萘莫司他 (NM) 有两种代谢产物：对胍基苯甲酸 (PGBA) 和 6-脒基-2-萘酚 (AN)，它们均经肾脏排泄。萘莫司他可在肾脏中蓄积。代谢/代谢产物 萘莫司他主要在人肝细胞胞质中经肝羧酸酯酶和长链酰基辅酶A水解酶水解。主要代谢产物为对胍基苯甲酸 (PGBA) 和 6-脒基-2-萘酚 (AN)，二者均为无活性的蛋白酶抑制剂。生物半衰期约为 8 分钟。 萘莫司他甲磺酸盐的分子式为 C19H17N5O2·CH4O3S，甲磺酸盐的分子量为 539.6 g/mol。游离碱的分子量为 347.37 g/mol。本品为白色至类白色粉末。体外研究时，通常将其溶解于 DMSO 或水中配制成储备液。体内给药时，则用生理盐水或其他合适的缓冲液配制。建议在 -20°C 下避光保存，以确保稳定性。作为合成化合物，其纯度通常 >98%。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
萘莫司他具有良好的临床安全性，尤其是在血液透析期间作为抗凝剂使用时。常见副作用与其抗凝活性相关，可能包括出血并发症。该药通常耐受性良好，但对于出血风险高的患者应谨慎使用。临床前毒理学研究表明，该化合物在治疗剂量下毒性相对较低。然而，与所有抗凝剂一样，出血风险是一个值得关注的问题，因此使用时需要密切监测凝血参数。其半衰期短是一项关键的安全特性，必要时可以迅速逆转其抗凝作用。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
萘莫司他属于苯甲酸和胍类衍生物。它是一种合成丝氨酸蛋白酶抑制剂，由于其碱性，通常与盐酸配制。它已在临床试验中用于预防肝移植再灌注综合征。在亚洲国家，萘莫司他被批准用于治疗接受持续性肾脏替代疗法（CRRT）的急性肾损伤患者，作为抗凝剂。萘莫司他是一种广谱合成丝氨酸蛋白酶抑制剂，具有抗凝、抗炎、清除黏液和潜在的抗病毒活性。给药后，萘莫司他可抑制多种蛋白酶的活性，包括补体系统中的凝血酶、纤溶酶、激肽释放酶、胰蛋白酶和C1酯酶，以及凝血系统中的因子VIIa、Xa和XIIa。尽管那法莫司他的作用机制尚未完全阐明，但已知胰腺中胰蛋白酶原的激活是胰腺炎的触发反应。那法莫司他可阻断胰蛋白酶原激活为胰蛋白酶及其引发的炎症级联反应。那法莫司他还可以降低上皮钠通道（ENaC）的活性，并增加气道黏液的清除。囊性纤维化患者的ENaC活性升高。此外，那法莫司他还可以抑制跨膜丝氨酸蛋白酶2（TMPRSS2）的活性。TMPRSS2是一种宿主细胞丝氨酸蛋白酶，介导流感病毒和冠状病毒进入细胞，从而抑制病毒感染和复制。药物适应症：用于治疗弥散性血管内凝血、出血性病变和出血倾向的患者，作为抗凝剂。它可预防接受连续性肾脏替代疗法和体外膜肺氧合（ECMO）患者在体外循环期间发生血栓形成。作用机制：甲磺酸萘莫司他可抑制多种酶系统的激活，例如凝血和纤溶系统（凝血酶、Xa 和 XIIa）、激肽释放酶-激肽系统、补体系统、胰蛋白酶和蛋白酶激活受体（PARs）。萘莫司他可抑制脂多糖诱导的培养人滋养层细胞中一氧化氮的产生、细胞凋亡以及白细胞介素（IL）-6 和 IL-8 的水平。研究表明，它在 TNF-α 诱导的活性氧（ROS）产生中发挥抗氧化作用。
炎症期间体液和细胞因子的激活会增加体外循环（CPB）术后出血和多器官损伤的风险。我们现在比较在模拟CPB回路中单独使用肝素与萘莫司他甲磺酸盐（NM，一种特异性抑制胰蛋白酶样酶的蛋白酶抑制剂）联合使用的效果。NM在60分钟和120分钟时显著抑制了血小板β-血小板球蛋白（β-TG）的释放。血小板计数无差异。在添加NM的回路中，由于NM对血小板功能的直接作用，ADP诱导的血小板聚集减少。NM显著抑制了中性粒细胞弹性蛋白酶的释放；在120分钟时，NM组的血浆弹性蛋白酶-α1-抗胰蛋白酶复合物浓度为0.16 μg/mL，而对照组为1.24 μg/mL。 NM完全抑制了C1抑制剂与激肽释放酶和FXIIa之间复合物的形成。NM不改变补体激活标志物（C1-C1抑制剂复合物和C5b-9）或凝血酶生成指标（F1.2）。然而，在120分钟时，通过纤维蛋白肽A释放测定的凝血酶活性显著降低。数据表明，体外循环期间的补体激活与中性粒细胞激活的相关性较差，激肽释放酶或FXIIa，或两者兼有，可能是更重要的激动剂。NM抑制两种重要接触系统蛋白以及血小板和中性粒细胞释放的能力，提示其具有抑制临床体外循环期间炎症反应的潜力。 [1] 药效学 萘莫司他是一种速效蛋白水解抑制剂，用于血液透析期间，通过竞争性抑制多种丝氨酸蛋白酶（包括凝血酶）来阻止纤维蛋白原水解为纤维蛋白。它可以改善急性胰腺炎，预防体外循环期间的血栓形成，并在体外具有抗炎作用。一项研究表明，萘莫司他通过其抗凝血酶活性对缺血性脑损伤发挥神经保护作用。 甲磺酸萘莫司他已在包括日本在内的多个国家获批用于血液透析期间的抗凝治疗以及治疗急性胰腺炎和弥散性血管内凝血（DIC）。它尚未获得美国FDA批准，但目前作为一种研究性药物在美国上市。作为一种强效广谱丝氨酸蛋白酶抑制剂，其作用机制使其成为治疗蛋白酶活性失调相关疾病的有效药物。除了临床应用外，它还是研究凝血、炎症和病毒入侵机制的常用研究工具。其抑制TMPRSS2的能力在COVID-19研究中引起了广泛关注。 |
| 分子式 |
C19H17N5O2
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|---|---|
| 分子量 |
347.37
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| 精确质量 |
347.138
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| 元素分析 |
C, 65.69; H, 4.93; N, 20.16; O, 9.21
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| CAS号 |
81525-10-2
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| 相关CAS号 |
Nafamostat mesylate;82956-11-4;Nafamostat hydrochloride;80251-32-7;Nafamostat formate salt-13C6
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| PubChem CID |
4413
|
| 外观&性状 |
Solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
637.2±65.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
339.1±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.9 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.694
|
| LogP |
1.93
|
| tPSA |
138.07
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
552
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(C1C=CC(NC(N)=N)=CC=1)OC1C=C2C(C=C(C(N)=N)C=C2)=CC=1
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| InChi Key |
MQQNFDZXWVTQEH-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H17N5O2/c20-17(21)14-2-1-13-10-16(8-5-12(13)9-14)26-18(25)11-3-6-15(7-4-11)24-19(22)23/h1-10H,(H3,20,21)(H4,22,23,24)
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| 化学名 |
6-Amidino-2-naphthyl 4-guanidinobenzoate
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| 别名 |
Nafamostat free base; Nafamostat [INN]; Nafamstat; (6-carbamimidoylnaphthalen-2-yl) 4-(diaminomethylideneamino)benzoate; CHEMBL273264; Y25LQ0H97D; p-Guanidinobenzoic acid ester with 6-hydroxy-2-naphthamidine; Nafamostat; FUT-175; FUT 175; FUT175.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: >10 mM
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8788 mL | 14.3939 mL | 28.7877 mL | |
| 5 mM | 0.5758 mL | 2.8788 mL | 5.7575 mL | |
| 10 mM | 0.2879 mL | 1.4394 mL | 2.8788 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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