| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Human acetyl-CoA carboxylase
Firsocostat (S enantiomer) targets acetyl‑CoA carboxylase 1 (ACC1) and acetyl‑CoA carboxylase 2 (ACC2). IC50 values: hACC1 = 2.1 ± 0.2 nM (n=7); hACC2 = 6.1 ± 0.8 nM (n=15) [1]. |
||
|---|---|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
ND-630（又名GS-0976；NDI-010976；firsocostat）是一种强效的ACC（乙酰辅酶A羧化酶）抑制剂。作为一种强效的变构蛋白-蛋白相互作用抑制剂，ND-630与ACC的磷酸肽受体和二聚化位点相互作用，阻止二聚化，从而抑制两种ACC同工酶的酶活性，降低培养细胞和动物体内的脂肪酸合成并促进脂肪酸氧化，并表现出良好的类药特性。ND-630抑制hACC1（IC50=2.1±0.2 nM）和hACC2（IC50=6.1±0.8 nM）。这种抑制作用是可逆的，并且对ACC具有高度特异性。ND-630通过与酶的磷酸肽受体和二聚化位点相互作用来抑制ACC活性，从而阻止二聚化。 ND-630 在 HepG2 细胞中抑制脂肪酸合成，EC50 值为 66 nM，且不改变细胞总数、细胞蛋白浓度以及乙酸盐掺入胆固醇的情况。
激酶活性测定：ND-630 抑制人 ACC1 和 ACC2 的 IC50 值分别为 2.1 nM 和 6.1 nM。 细胞实验：ND-630 与 ACC 磷酸肽受体和二聚化位点相互作用，阻止二聚化并抑制两种 ACC 同工酶的酶活性，减少培养细胞和动物体内的脂肪酸合成并刺激脂肪酸氧化，表现出良好的类药特性。 Firsocostat（S 对映体） 抑制重组以可逆的方式高特异性地抑制 hACC1 和 hACC2 的活性。在 10 μM 浓度下，该化合物对 101 种酶、受体、生长因子、转运蛋白和离子通道的活性均无影响（Ricerca DrugMatrix Panel）[1]。 机制：Firsocostat（S 对映体） 与 ACC 二聚化位点结合，阻止二聚化。在非变性 PAGE 电泳中，hACC2 BC 在没有该化合物存在的情况下以二聚体形式迁移，而在有该化合物存在的情况下（摩尔比分别为 1:2、1:1 和 2:1），则以单体形式迁移。 ND-646（Firsocostat 的伯酰胺）与 hACC2 BC 的共晶结构（2.6 Å）显示其与 Arg277、Val587、Tyr683 等残基相互作用，并填充了 Val587 和 Tyr683 附近的一个狭窄深口袋 [1]。 在 HepG2 细胞中，Firsocostat（S 对映体）抑制 [¹⁴C]乙酸盐掺入脂肪酸，EC50 值分别为 66 nM（含 10% 血清的细胞）和 8.7 nM（无血清培养基），且不影响细胞数量、蛋白质浓度或 [¹⁴C]乙酸盐掺入胆固醇 [1]。 在 C2C12 细胞中，Firsocostat（S 对映体）促进 [¹⁴C]棕榈酸酯的氧化（包括 ¹⁴CO₂）。以浓度依赖的方式释放和 ¹⁴C 酸可溶物质的产生）[1]。 |
||
| 体内研究 (In Vivo) |
对饮食诱导肥胖大鼠长期给予 ND-630 可减轻肝脂肪变性，改善胰岛素敏感性，减少体重增加而不影响食物摄入，并对血脂异常产生有利影响。对 Zucker 糖尿病肥胖大鼠长期给予 ND-630 可减轻肝脂肪变性，改善葡萄糖刺激的胰岛素分泌，并降低糖化血红蛋白 A1c（降低 0.9%）。ND-630 的水溶性为 594 μM，人血浆蛋白结合率和鼠血浆蛋白结合率分别为 98.5% 和 98.6%。对雄性 Sprague-Dawley 大鼠进行 ND-630 的药代动力学评价[静脉注射 3 mg/kg；口服（po）10 mg/kg] 的血浆半衰期为 4.5 小时，生物利用度为 37%，清除率为 33 mL/min/kg，分布容积为 1.9 L/kg，口服达到最大血浆浓度的时间为 0.25 小时。
急性体内研究：在喂食标准饲料的雄性 Sprague-Dawley 大鼠中，口服 Firsocostat（S 对映体） 可剂量依赖性地降低肝脏丙二酰辅酶 A（ED50 0.8 mg/kg）、骨骼肌丙二酰辅酶 A（腓肠肌、EDL、比目鱼肌；ED50 3-10 mg/kg）和肝脏脂肪酸合成（ED50 0.14 mg/kg），这些均通过 [¹⁴C]乙酸盐掺入法测定。它还降低了高碳水化合物喂养大鼠的呼吸商（RQ），表明全身脂肪酸氧化增加[1]。 在高蔗糖饮食（HSD）诱导的肥胖（DIO）大鼠中，长期每日一次口服给药4周，可使累积体重增加减少高达20%，且不影响食物摄入量；使血浆瘦素水平恢复正常；减少肝脏脂肪变性（甘油三酯）；降低血浆甘油三酯和游离脂肪酸水平；增加血浆酮体水平；降低血浆胆固醇水平；并在所测试的剂量下改善胰岛素敏感性（降低口服葡萄糖耐量试验中的胰岛素波动和曲线下面积）[1]。 在高脂饮食（HFD）诱导的肥胖（DIO）大鼠中，长期每日一次口服给药2周，可使累积体重增加减少高达26%，且不影响食物摄入量；降低高瘦素血症；降低高胰岛素血症，且不改变血浆葡萄糖水平；降低肝脏甘油三酯（在最高剂量下恢复正常）和肝脏胆固醇水平；并改善胰岛素敏感性（ipGTT 中胰岛素波动和 AUC 降低）[1]。 在 Zucker 糖尿病脂肪 (ZDF) 大鼠（8 周龄，从糖尿病前期到显性糖尿病）中，慢性给药 37 天（每日两次，每次 5、15、30 mg/kg）呈剂量依赖性地降低了肝脏甘油三酯（最高达 64%）、游离脂肪酸（最高达 60%）和胆固醇（最高达 32%），增加了血浆酮体，显著增加了葡萄糖刺激的胰岛素分泌 (GSIS)（第 21 天葡萄糖负荷后 15 分钟最高达 80%），并使糖化血红蛋白 A1c 降低了 0.9%（从 10.2 ± 0.3% 降至 5 mg/kg 每日两次时的 9.3 ± 0.2%，P=0.029）[1]。 |
||
| 酶活实验 |
ACC1 和 ACC2 活性及抑制的测定。[1]
使用发光 ADP 检测法（ADP-Glo 激酶检测试剂盒）评估 ACC 活性，该方法通过定量酶促反应第一半反应中产生的 ADP 来测量酶活性。具体而言，将 4.5 μL 含有重组 hACC1（GenBank 登录号：NM198834；全长，C 端带有 His 标签，270 kDa，在杆状病毒感染的 Sf9 细胞表达系统中表达）或重组 hACC2（GenBank 登录号：NM001093；全长，C 端带有 His 标签，277 kDa，在杆状病毒感染的 Sf9 细胞表达系统中表达）的检测缓冲液加入 384 孔 Optiplate 板的孔中，随后加入 0.5 μL DMSO 或含有抑制剂的 DMSO。将Optiplate在室温下孵育15分钟。然后，每个孔加入5.0 μL底物混合物以启动反应。最终检测浓度为：5 nM hACC1或hACC2，20 μM ATP，10 μM（hACC1检测）或20 μM（hACC2检测）乙酰辅酶A，30 mM（hACC1检测）或12 mM（hACC2检测）NaHCO3，0.01% Brij35，2 mM DTT，5% DMSO，抑制剂浓度以半对数递增，范围从30 μM到0.0001 μM。室温孵育60分钟后，加入10 μL ADP-Glo试剂终止反应，并将反应板在室温下继续孵育40分钟以耗尽剩余的ATP。然后加入20 μL激酶检测试剂，室温孵育40分钟，使ADP转化为ATP。使用PerkinElmer EnVision 2104酶标仪，通过荧光素/荧光素酶反应测定ATP的发光值。 索拉芬置换和热位移分析。[1] 如前所述，评估ND-022对hACC BC中荧光标记的索拉芬A（Soraphen-TAMARA）的置换作用。蛋白质热稳定性测定采用先前描述的方法，使用环境敏感染料SYPRO Orange，并通过实时荧光定量PCR仪采集每1分钟间隔结束时的荧光数据。该仪器以1℃/min的速率将温度从25℃升至100℃。 ACC酶活性采用发光ADP检测法（ADP-Glo激酶检测试剂盒）测定。将重组全长hACC1（C端His标签）或hACC2（C端His标签）与化合物在DMSO中于384孔板中室温孵育15分钟。加入底物混合物（ATP、乙酰辅酶A、NaHCO₃、Brij35、DTT）启动反应。最终测定浓度：5 nM 酶，20 μM ATP，10 μM (ACC1) 或 20 μM (ACC2) 乙酰辅酶A，30 mM (ACC1) 或 12 mM (ACC2) NaHCO₃，0.01% Brij35，2 mM DTT，5% DMSO。60 分钟后，加入 ADP-Glo 试剂终止反应并耗尽剩余的 ATP（40 分钟）。加入激酶检测试剂（40 分钟）并读取发光值 [1]。 hACC2 BC 的表达和结晶：在大肠杆菌中表达带有 N 端 His 标签的 hACC2 BC（氨基酸残基 217-775），纯化后，使用悬滴气相扩散法，以 ND-646（Firsocostat 的伯酰胺）为结晶剂进行结晶。晶体衍射分辨率为 2.6 Å；通过分子置换法解析结构[1]。 |
||
| 细胞实验 |
培养细胞中脂肪酸合成 (FASyn) 和脂肪酸氧化 (FAOxn) 的测定。[1]
在 HepG2 细胞中，通过测定 [2-14C]乙酸盐掺入细胞脂质的情况来评估 FASyn。在 C2C12 细胞中，通过测定 [14C]O2 的释放以及 [1-14C]棕榈酸酯生成 [14C]酸溶性物质的情况来评估 FAOxn。 HepG2 细胞中的脂肪酸合成 (FASyn)：将细胞培养在含 10% FBS 的 DMEM 培养基或无血清培养基中。加入 Firsocostat（S 对映体）和 [2-14C]乙酸盐，孵育 4 小时。提取脂质并进行放射性计数。计算了 EC50 值 [1]。 C2C12 细胞中的脂肪酸氧化 (FAOxn)：用 Firsocostat (S 对映体) 和 [1-¹⁴C]棕榈酸酯处理细胞 6 小时。释放的 ¹⁴CO₂ 被 NaOH 捕获，酸溶性物质沉淀并计数 [1]。 |
||
| 动物实验 |
|
||
| 药代性质 (ADME/PK) |
水溶性：594 μM。血浆蛋白结合率：人 98.5%，大鼠 98.6%。在雄性 Sprague-Dawley 大鼠中，静脉注射 (3 mg/kg) 和口服 (10 mg/kg) 后：t₁/₂ = 4.5 小时；口服生物利用度 = 37%；清除率 (Cl) = 33 mL/min/kg；稳态分布容积 (Vdss) = 1.9 L/kg；达峰时间 (口服) = 0.25 小时；AUC₀‑∞ (口服) = 1,932 ng·h/mL；血浆峰浓度 (Cmax) = 6.0 μM；肝脏峰浓度 (Cmax) = 81 μM；股四头肌峰浓度 (Cmax) = 0.6 μM；达峰时肝脏:血浆:股四头肌暴露比 = 135:10:1。Firsocostat（S 对映体） 不能穿过血脑屏障 [1]。
|
||
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
最大耐受剂量（单次口服）：给予 100、300 或 1000 mg/kg 的大鼠（每组 n=6）在体重、血液学、凝血或临床化学方面均无显著差异[1]。
大鼠 28 天重复口服给药（每日一次）（10 只雄性和 10 只雌性，剂量高达 60 mg·kg⁻¹·d⁻¹，428× FASyn ED50）：未观察到与化合物相关的临床症状、体重、食物消耗、血液学、凝血或临床化学的变化；无靶器官毒性，无死亡病例[1]。 比格犬（4只雄性，4只雌性）心血管安全性：在治疗前、口服给药1天后和4周后（100 mg·kg⁻¹·d⁻¹，达峰时间1-4小时）进行心电图记录（I、II、III、aVR、aVL、aVF导联）。所有犬均维持窦性心律；未观察到药物对心率、RR间期、PR间期、QRS间期和QT/QTc间期的影响[1]。 在超治疗剂量（例如，428×ED50）下未观察到不良心脏反应[1]。 |
||
| 参考文献 |
Proc Natl Acad Sci U S A.2016 Mar 29;113(13):E1796-805.
|
||
| 其他信息 |
同时抑制乙酰辅酶A羧化酶（ACC）同工酶ACC1和ACC2可以同时抑制脂肪酸合成并促进脂肪酸氧化，从而可能对肥胖、糖尿病和脂肪肝相关的发病率和死亡率产生有益影响。我们采用基于结构的药物设计方法，鉴定出一系列强效的变构蛋白-蛋白相互作用抑制剂，例如ND-630。这些抑制剂与ACC磷酸肽受体和二聚化位点相互作用，从而阻止二聚化并抑制两种ACC同工酶的酶活性，在培养细胞和动物中减少脂肪酸合成并促进脂肪酸氧化，并表现出良好的类药性。长期给予饮食诱导的肥胖大鼠ND-630可减轻肝脂肪变性，提高胰岛素敏感性，在不影响食物摄入的情况下减少体重增加，并改善血脂异常。长期给予Zucker糖尿病肥胖大鼠ND-630可减轻肝脂肪变性，改善葡萄糖刺激的胰岛素分泌，并降低糖化血红蛋白A1c水平（降低0.9%）。这些数据共同表明，该系列化合物对ACC的抑制作用可能有助于治疗多种代谢性疾病，包括代谢综合征、2型糖尿病和脂肪肝。[1]
Firsocostat（S对映体） (ND-630) 是一种首创的变构ACC抑制剂，它与二聚化结构域（BC结构域）结合，并模拟AMPK对ACC的生理抑制作用。与靶向活性位点的CT结构域抑制剂不同，其抑制作用不受餐后柠檬酸盐水平升高或脂肪酰辅酶A反馈抑制解除的影响。结合位点的亲水性使得筛选具有良好理化性质的抑制剂成为可能。 Firsocostat（S对映体）不穿过血脑屏障，因此不会影响下丘脑丙二酰辅酶A或增加食物摄入量。它在代谢综合征、2型糖尿病、非酒精性脂肪肝及相关疾病的治疗中具有潜在的应用价值。该化合物的制备方法参见美国专利US 2013/0123231 [1]。 |
| 分子式 |
C28H31N3O8S
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
569.626046419144
|
|
| 精确质量 |
569.18318
|
|
| 元素分析 |
C, 59.04; H, 5.49; N, 7.38; O, 22.47; S, 5.63
|
|
| CAS号 |
2128714-16-7
|
|
| 相关CAS号 |
|
|
| PubChem CID |
124672214
|
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
|
| LogP |
3.2
|
|
| tPSA |
160Ų
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
10
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
9
|
|
| 重原子数目 |
40
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
947
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
|
| SMILES |
CC1=C(SC2=C1C(=O)N(C(=O)N2C[C@H](C3=CC=CC=C3OC)OC4CCOCC4)C(C)(C)C(=O)O)C5=NC=CO5
|
|
| InChi Key |
ZZWWXIBKLBMSCS-HXUWFJFHSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C28H31N3O8S/c1-16-21-24(32)31(28(2,3)26(33)34)27(35)30(25(21)40-22(16)23-29-11-14-38-23)15-20(39-17-9-12-37-13-10-17)18-7-5-6-8-19(18)36-4/h5-8,11,14,17,20H,9-10,12-13,15H2,1-4H3,(H,33,34)/t20-/m1/s1
|
|
| 化学名 |
2-[1-[(2S)-2-(2-methoxyphenyl)-2-(oxan-4-yloxy)ethyl]-5-methyl-6-(1,3-oxazol-2-yl)-2,4-dioxothieno[2,3-d]pyrimidin-3-yl]-2-methylpropanoic acid
|
|
| 别名 |
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7555 mL | 8.7776 mL | 17.5553 mL | |
| 5 mM | 0.3511 mL | 1.7555 mL | 3.5111 mL | |
| 10 mM | 0.1756 mL | 0.8778 mL | 1.7555 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 |
|---|
 |
 |
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
