| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
- In canine osteosarcoma cells (D17 and HMPOS), the primary target of pamidronate disodium is associated with the regulation of cell viability, though no specific IC50, Ki, or EC50 values were reported [1]
- In human bone marrow mesenchymal stem cells (hBMSCs), pamidronate disodium targets the Wnt/β-Catenin signaling pathway, suppressing its activity; no specific IC50, Ki, or EC50 values were provided [2] - In rabbit osteoarthritic subchondral bone and cartilage, pamidronate disodium targets the expression balance of osteoprotegerin (OPG) and receptor activator of nuclear factor-κB ligand (RANKL) |
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| 体外研究 (In Vitro) |
1. 对犬骨肉瘤细胞的作用：将犬骨肉瘤细胞系（D17、HMPOS）用浓度为1、10、50、100μM的帕米膦酸钠处理24、48、72小时，采用MTT法检测细胞活力。对于D17细胞，24小时时各浓度均未显著降低细胞活力；48小时时仅100μM浓度组细胞活力略有下降（约为对照组的85%）；72小时时50μM和100μM浓度组细胞活力分别降至对照组的70%和60%。对于HMPOS细胞，24小时时细胞活力未受影响；48小时时100μM浓度组细胞活力降至对照组的80%；72小时时50μM和100μM浓度组细胞活力分别为对照组的75%和55%。流式细胞术检测显示，用最高100μM的帕米膦酸钠处理72小时后，两种细胞系均未检测到凋亡变化[1]
2. 对人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）的作用：用10、50、100μM的帕米膦酸钠处理hBMSCs。在7天和14天时检测成骨分化标志物碱性磷酸酶（ALP）活性：7天时50μM和100μM浓度组ALP活性分别为对照组的60%和40%；14天时分别为对照组的50%和30%。21天后通过茜素红染色检测矿化结节形成，结果显示药物处理组矿化结节显著减少，100μM浓度组结节数量仅为对照组的20%。Western blot分析表明，Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白（β-Catenin、Runx2、Osterix）的表达水平下调：100μM浓度组中β-Catenin表达量为对照组的30%，Runx2为40%，Osterix为35%。流式细胞术分析显示，hBMSCs的凋亡率随药物浓度升高而增加：100μM浓度组凋亡率约为25%，而对照组约为5%[2] 3. 对兔骨关节炎细胞及组织的作用：用50、100μM的帕米膦酸钠处理原代兔软骨细胞和软骨下骨细胞。实时荧光定量PCR（Real-time PCR）结果显示，在软骨下骨细胞中，与骨关节炎模型组相比，50μM和100μM浓度组OPG mRNA表达量分别上调1.5倍和2.0倍，RANKL mRNA表达量分别下调0.6倍和0.4倍；在软骨细胞中，与模型组相比，50μM和100μM浓度组Ⅱ型胶原mRNA表达量分别上调1.3倍和1.6倍，基质金属蛋白酶13（MMP-13）mRNA表达量分别下调0.7倍和0.5倍。兔骨关节炎软骨切片的免疫组化染色显示，帕米膦酸钠处理可增加软骨下骨区域OPG蛋白表达，降低RANKL蛋白表达[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
- 兔骨关节炎模型实验：采用新西兰大白兔，通过前交叉韧带切断术（ACLT）建立骨关节炎模型。术后2周，将兔子随机分为3组：模型组、帕米膦酸钠低剂量组（10μM，每关节0.2mL）、帕米膦酸钠高剂量组（100μM，每关节0.2mL）。药物通过关节腔内注射给药，每周1次，连续给药4周。术后8周，显微计算机断层扫描（micro-CT）分析显示，高剂量组软骨下骨矿物质密度（BMD）为模型组的1.2倍，骨小梁数量（Tb.N）为模型组的1.3倍，骨小梁间距（Tb.Sp）为模型组的0.8倍。软骨组织学评分（Mankin评分）显示，高剂量组评分为4.5分左右，显著低于模型组的8.0分左右。软骨下骨免疫组化检测显示，药物处理组OPG蛋白表达上调、RANKL蛋白表达下调，且高剂量组效果更显著[3]
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| 酶活实验 |
1. hBMSCs中ALP活性检测：将hBMSCs在含不同浓度帕米膦酸钠的成骨诱导培养基中培养7天和14天。用PBS清洗细胞后，加入裂解缓冲液裂解细胞。细胞裂解液在4℃下以12000×g离心10分钟，收集上清液。采用ALP检测试剂盒检测活性：将上清液与底物溶液（对硝基苯磷酸酯，pNPP）混合，在37℃下孵育30分钟，加入终止液终止反应，用酶标仪在405nm波长处测定吸光度。根据对硝基苯酚标准曲线计算ALP活性，并通过BCA法测定上清液蛋白浓度对ALP活性进行归一化处理[2]
2. 兔软骨下骨中OPG和RANKL蛋白的ELISA检测：将兔软骨下骨组织在含蛋白酶抑制剂的RIPA裂解缓冲液中匀浆。匀浆液在4℃下以10000×g离心15分钟，收集上清液。采用BCA法测定蛋白浓度。ELISA实验时，将100μL上清液（稀释至适宜浓度）加入预包被抗OPG或抗RANKL抗体的ELISA板孔中，37℃孵育1小时。用洗涤缓冲液清洗平板3次后，加入100μL辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗，37℃孵育30分钟。再次清洗平板后，加入100μL TMB底物溶液，在37℃避光条件下显色15分钟，加入终止液终止反应，在450nm波长处测定吸光度。根据标准曲线计算OPG和RANKL的浓度[3] |
| 细胞实验 |
1. 犬骨肉瘤细胞活力的MTT检测：将D17和HMPOS细胞以每孔5×10³个细胞的密度接种于96孔板，过夜培养。向孔中加入帕米膦酸钠，使终浓度分别为1、10、50、100μM，每个浓度设3个复孔。细胞在37℃、5%CO₂培养箱中孵育24、48、72小时。孵育结束后，每孔加入20μL MTT溶液（5mg/mL），继续孵育4小时。吸弃培养基，每孔加入150μL二甲基亚砜（DMSO）溶解甲臜结晶，用酶标仪在490nm波长处测定吸光度，细胞活力按（药物组吸光度/对照组吸光度）×100%计算[1]
2. hBMSCs中Wnt/β-Catenin通路蛋白的Western blot检测：用帕米膦酸钠处理hBMSCs 7天后，用PBS清洗细胞，加入含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA裂解缓冲液裂解细胞。细胞裂解液在4℃下以12000×g离心15分钟，收集上清液。BCA法测定蛋白浓度后，取等量蛋白（每泳道30μg）通过10%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分离，转移至聚偏氟乙烯（PVDF）膜。膜用含5%脱脂牛奶的Tris缓冲盐溶液（TBST）室温封闭1小时，随后加入抗β-Catenin、Runx2、Osterix和GAPDH（内参）的一抗，4℃孵育过夜。用TBST清洗膜3次后，加入HRP标记的二抗，室温孵育1小时。采用增强化学发光（ECL）检测试剂盒显影蛋白条带，用ImageJ软件定量各条带的灰度值，各蛋白的相对表达量以GAPDH为内参进行归一化[2] 3. 兔细胞中OPG、RANKL、Ⅱ型胶原和MMP-13的Real-time PCR检测：采用TRIzol试剂从经帕米膦酸钠处理的兔软骨细胞和软骨下骨细胞中提取总RNA，用分光光度计检测RNA纯度和浓度（A260/A280比值在1.8-2.0之间）。采用逆转录试剂盒将RNA逆转录为互补DNA（cDNA）。Real-time PCR在PCR仪中进行，使用SYBR Green PCR Master Mix，反应条件为：95℃预变性5分钟，随后40个循环（95℃变性15秒，60℃退火延伸30秒）。设计并合成OPG、RANKL、Ⅱ型胶原、MMP-13和GAPDH（内参）的引物序列，采用2^(-ΔΔCt)法计算目标基因的相对mRNA表达量[3] |
| 动物实验 |
兔骨关节炎模型建立及给药：雄性新西兰白兔（体重2.5-3.0 kg）用戊巴比妥钠（静脉注射，30 mg/kg）麻醉。剃除右膝关节毛发并消毒，在膝关节外侧做纵行切口，暴露关节囊。用手术剪切断前交叉韧带，逐层缝合关节囊和皮肤。术后连续3天肌注青霉素以预防感染。前交叉韧带切断术后两周，将兔子随机分为三组（每组n=6）：（1）模型组：每周一次关节内注射0.2 mL生理盐水，持续4周； （2）低剂量帕米膦酸钠组：每周一次关节内注射0.2 mL 10 μM帕米膦酸钠溶液，持续4周；（3）高剂量帕米膦酸钠组：每周一次关节内注射0.2 mL 100 μM帕米膦酸钠溶液，持续4周。帕米膦酸钠溶液由药物溶于生理盐水配制而成。术后8周（停药后4周），通过静脉注射过量戊巴比妥钠处死兔子。解剖右膝关节，收集股骨髁和胫骨平台，用于微型CT、组织学和免疫组织化学分析[3]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外对人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）的毒性：用浓度分别为 10、50 和 100 μM 的帕米膦酸钠处理 7 天后，hBMSCs 的凋亡率增加。流式细胞术分析显示，对照组的凋亡率约为 5%，而 10 μM、50 μM 和 100 μM 药物组的凋亡率分别约为 10%、18% 和 25%。用浓度高达 100 μM 的帕米膦酸钠处理 72 小时后，在犬骨肉瘤细胞（D17 和 HMPOS）中未观察到明显的细胞毒性（例如细胞膜损伤），这表现为与对照组相比，乳酸脱氢酶 (LDH) 释放量没有显著增加 [1][2]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1. 帕米膦酸钠是一种双膦酸盐类药物，常用于治疗骨质疏松症和骨转移等骨骼相关疾病。本研究旨在探讨其对犬骨肉瘤细胞的潜在抑制作用，为其在犬骨肉瘤治疗中的应用提供理论基础[1]。2. 研究揭示了帕米膦酸钠诱导骨坏死的新机制：该药物通过抑制人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）中的Wnt/β-catenin信号通路，抑制成骨分化（降低碱性磷酸酶活性和矿化作用），并促进细胞凋亡，从而损害骨修复并导致骨坏死。这一发现为理解双膦酸盐的副作用提供了新的视角，并可能有助于制定降低骨坏死风险的策略[2]
3. 在兔骨关节炎模型中，帕米膦酸钠通过调节软骨下骨中OPG/RANKL的平衡（上调OPG并下调RANKL）来减少软骨下骨丢失，并通过增加软骨细胞中II型胶原的表达和降低MMP-13的表达来保护软骨，从而对骨关节炎关节发挥保护作用。这表明帕米膦酸钠可能具有治疗骨关节炎的潜力[3] 帕米膦酸钠是合成双膦酸盐帕米膦酸的二钠盐。尽管其作用机制尚未完全阐明，但帕米膦酸钠似乎能吸附于骨骼中的磷酸钙晶体，通过抑制破骨细胞介导的骨吸收来阻止其溶解。该药不抑制骨矿化和骨形成。 一种氨基双膦酸盐，可抑制骨吸收，用于治疗溶骨性病变、骨痛以及与恶性肿瘤相关的严重高钙血症。 另见：帕米膦酸（含有活性部分）。 |
| 分子式 |
C3H9NNA2O7P2
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|---|---|
| 分子量 |
279.03
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| 精确质量 |
235.001
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| 元素分析 |
C, 8.89; H, 5.72; N, 3.46; Na, 11.35; O, 55.29; P, 15.29
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| CAS号 |
57248-88-1
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| 相关CAS号 |
Pamidronic acid;40391-99-9;Pamidronate disodium pentahydrate;109552-15-0;
57248-88-1 (disodium heptahydrate) ; 89131-02-2 (monosodium)
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| PubChem CID |
73351
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 熔点 |
300 °C
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| LogP |
-6.9
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| tPSA |
186.59
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
15
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| 分子复杂度/Complexity |
238
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
OP(O)(C(O)(P(O)(O)=O)CCN)=O.[2Na]
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| InChi Key |
WRUUGTRCQOWXEG-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C3H11NO7P2/c4-2-1-3(5,12(6,7)8)13(9,10)11/h5H,1-2,4H2,(H2,6,7,8)(H2,9,10,11)
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| 化学名 |
(3-amino-1-hydroxy-1-phosphonopropyl)phosphonic acid
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| 别名 |
Aredia; GCP-23339A; Aminomux; APD; GCP23339A.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.5838 mL | 17.9192 mL | 35.8384 mL | |
| 5 mM | 0.7168 mL | 3.5838 mL | 7.1677 mL | |
| 10 mM | 0.3584 mL | 1.7919 mL | 3.5838 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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