Peramivir (BCX-1812, RWJ-270201, S-021812)

别名: RWJ 270201; RWJ270201; BCX-1812; Rapiacta; 229614-55-5; Peramivir anhydrous; RAPIVAB; Brand name: Rapivab; Rapiacta and Peramiflu; BCX1812; BCX1812; BCX 1812; RWJ270201; 帕拉米韦;帕拉米韦PERAMIVIR;帕拉米韦三水;(1S,2R,3R,4R)-3-(1-乙酰氨基-2-乙基-丁基)-4-(二氨基亚甲基氨基)-2-羟基-环戊烷-1-羧酸; 帕拉米韦标准品
目录号: V9167 纯度: ≥98%
Peramivir(原名RWJ270201;BCX1812;S021812;Rapivab;Rapiacta;Peramiflu)是一种抗病毒药物,作为神经氨酸酶抑制剂,已被批准用于治疗流感。
Peramivir (BCX-1812, RWJ-270201, S-021812) CAS号: 330600-85-6
产品类别: Influenza Virus
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
帕拉米韦(曾用名:RWJ270201;BCX1812;S021812;Rapivab;Rapiacta;Peramiflu)是一种抗病毒药物,作为神经氨酸酶抑制剂发挥作用,已被批准用于治疗流感。作为一种过渡态类似物,它对神经氨酸酶的抑制作用IC50中值为0.09 nM。
生物活性&实验参考方法
靶点
NA/neuraminidase(IC50 = 0.9-4.3 nM); IKK-α;STAT3;ERK1;ERK2
Influenza virus neuraminidase (NA). Peramivir (BCX-1812, RWJ-270201, S-021812) demonstrated an IC50 of 1.1 nM against influenza B virus (B/Brisbane/60/2008, BR/08) in a fluorescence-based NA inhibition assay [2].
- The anti-cytokine storm effect is mediated partly through intervention of NF-κB activity in LPS-induced macrophage models [1].
体外研究 (In Vitro)
对于巨噬细胞,帕拉米韦(0.3125–40 μM,4 小时)无毒性。在 LPS 诱导的人外周血单核细胞 (hPBMC) 中,帕拉米韦(2–10 μM,6–12 小时)可抑制细胞因子的释放[1]。
细胞培养中的抗病毒活性[5] 奥司他韦羧酸盐和帕拉米韦联合使用,在 MDCK 细胞培养物中评估了对病毒产量的抑制作用,剂量范围为 0.32 至 100 μM(表 1)。单独使用奥司他韦羧酸盐,在 100 μM 浓度下可使病毒产量降低 4.4 log10。帕拉米韦在 32 和 100 μM 浓度下可使病毒产量降低 ≥ 5 log10,低于检测限。在三种特定条件下,当10 μM奥司他韦羧酸盐分别与3.2 μM或10 μM帕拉米韦联合使用,以及两种抑制剂均为3.2 μM时,病毒滴度均出现超过预期10倍的抑制。图1展示了数据的三维MacSynergy图,图中显示了高于和低于预期值的情况。在1 μM和10 μM奥司他韦以及1 μM和10 μM帕拉米韦之间,存在一个显著的协同作用区域,协同作用体积为9.1。当0.32 μM帕拉米韦与3.2-32 μM奥司他韦羧酸盐联合使用时,出现一个轻微的拮抗作用区域,计算出的拮抗作用体积为-1.7。整个表面的净效应为协同作用体积7.4。
病毒神经氨酸酶抑制研究[5] 表2列出了奥司他韦羧酸盐和帕拉米韦联合用药对神经氨酸酶活性的影响。在10 nM奥司他韦羧酸盐或1至10 nM帕拉米韦处理下,神经氨酸酶活性极低。大多数低剂量组合(0.01至3.2 nM奥司他韦羧酸盐与0.01至0.32 nM帕拉米韦联合用药)的抑制作用强于单独使用任一化合物。当两种抑制剂联合使用时,浓度较高(0.32至10 nM)时,抑制作用低于预期。这是因为帕拉米韦单独使用已对酶活性具有很强的抑制作用,药物联合使用不太可能进一步抑制酶活性。图 2 显示了数据的三维 MacSynergy 图。各组合的增加或减少百分比均较小。低剂量组合区域的协同作用体积为 86(中等协同作用),而高剂量组合区域的拮抗作用体积为 -65(中等拮抗作用),整个表面的净效应为 21(无差异)。在 LPS 诱导的小鼠腹腔巨噬细胞中,10 μM 的帕拉米韦 (BCX-1812、RWJ-270201、S-021812) 抑制了 67.2% 的 TNF-α 释放,在三种神经氨酸酶抑制剂(奥司他韦、扎那米韦和帕拉米韦)中表现出最强的抑制作用。 TNF-α 抑制的 IC50 为 4.3 μM [1]。
- 在 LPS 诱导的健康供体外周血单核细胞 (hPBMC) 中,帕拉米韦 (BCX-1812、RWJ-270201、S-021812)(2.5、5 和 10 μM)显著且呈剂量依赖性地拮抗了 LPS 刺激后 6 小时和 12 小时升高的 TNF-α 水平 [1]。
- 在感染甲型流感病毒 A/NWS/33 (H1N1) 的 MDCK 细胞中,帕拉米韦 (BCX-1812、RWJ-270201、S-021812) 单独使用浓度为 32 和 100 μM 时,病毒产量降低至检测限以下 ≥5 log10 [5]。
- 帕拉米韦(BCX-1812、RWJ-270201、S-021812)在体外能有效抑制甲型流感病毒A/Vietnam/1203/04 (H5N1)的神经氨酸酶(NA)活性,IC50值为0.171 nM [4]。
体内研究 (In Vivo)
帕拉米韦(20–60 mg/kg,腹腔注射,单次给药)可减轻急性肺损伤,预防LPS诱导的细胞因子风暴,并延长细胞因子风暴综合征模型小鼠的生存时间[1]。
在免疫缺陷的B型流感病毒感染小鼠模型中,帕拉米韦(75 mg/kg,肌肉注射,每日一次,连续7天)可使BALB scid小鼠免于BR/08病毒的致死性攻击[2]。
在LPS诱导的细胞因子风暴综合征(CSS)小鼠模型中,预先给予帕拉米韦(BCX-1812,RWJ-270201,S-021812)(60 mg/kg,腹腔注射)可显著降低血清中TNF-α、IFN-α、IFN-γ、MCP-1、GM-CSF、IL-1β、IL-6和IL-12。在支气管肺泡灌洗液 (BALF) 中,它显著降低了 TNF-α 和 IL-6 的水平。它还能减轻急性肺损伤,并延长接受致死剂量 LPS 攻击的小鼠的存活时间 [1]。
- 在感染致死剂量 B 型流感病毒 (B/Brisbane/60/2008, BR/08) 的 BALB/c 小鼠中,使用单剂量 (1×)、双剂量 (2×) 或四剂量 (4×) 的 帕拉米韦 (BCX-1812, RWJ-270201, S-021812) (75 mg/kg/天,肌注) 治疗可提供完全保护 (100% 存活率)。在免疫缺陷的 BALB scid 小鼠中,相同的治疗方案分别导致 40% (1×)、60% (2×) 和 60% (4×) 的存活率 [2]。
- 在甲型流感 A/NWS/33 (H1N1) 病毒感染的致死性小鼠模型中,肌内注射 (im) 帕拉米韦 (BCX-1812, RWJ-270201, S-021812),剂量为 0.4 和 1 mg/kg/天(每天两次,持续 5 天),可提供 100% 的保护 [5]。当与亚最佳剂量的奥司他韦(0.4 mg/kg/天,口服)联合使用时,帕拉米韦(0.1 和 0.2 mg/kg/天,肌注)可显著提高存活率,分别达到 80% 和 100%,优于单独使用任一药物 [5]。
- 在感染致死剂量高致病性禽流感 A/Vietnam/1203/04 (H5N1) 的小鼠中,暴露后使用帕拉米韦(BCX-1812、RWJ-270201、S-021812)(30 mg/kg,肌注,单次或多次给药)治疗,存活率达到 70-80%,与奥司他韦(70% 存活率)相当,且显著优于载体对照组(36% 存活率)[4]。
- 在感染致死剂量流感 A/Vietnam/1203/04 的雪貂中,在三项试验中的两项中,肌注帕拉米韦(BCX-1812、RWJ-270201、S-021812)(30 mg/kg,多次给药)显著提高了H5N1禽流感病毒的存活率,达到70-75%,而未治疗/仅接受赋形剂治疗的对照组的存活率为11-30%[4]。
酶活实验
病毒神经氨酸酶抑制试验[5]
使用市售试剂盒,在96孔白色实心微孔板中,按照制造商说明书和文献报道的方法(Smee等,2010)测定化合物对病毒神经氨酸酶活性的影响。将化合物以半对数稀释度递增,并与病毒(作为神经氨酸酶来源)一起孵育。每个微孔中甲型流感病毒A/NWS/33 (H1N1)的量约为500个细胞培养感染剂量。在加入化学发光底物之前,将微孔板在37°C下预孵育10分钟。加入底物后,将微孔板在37°C下孵育30分钟。加入NA-Star®加速剂溶液后,立即使用Centro LB 960发光仪(Berthold Technologies,Oak Ridge,TN)检测0.5秒,以评估神经氨酸酶活性。各化合物浓度下的化学发光计数百分比均以未处理条件下的计数标准化为 100% 计算得出。
采用基于荧光的检测方法评估了 B 型流感病毒对神经氨酸酶抑制剂 (NAI) 的敏感性。该方法使用荧光底物。计算了抑制标准化 NA 活性 50% 所需的药物浓度 (IC50)。对于BR/08病毒,帕拉米韦(BCX-1812、RWJ-270201、S-021812)的IC50值为1.1 nM [2]。- 使用商业化的化学发光神经氨酸酶抑制检测试剂盒评估帕拉米韦(BCX-1812、RWJ-270201、S-021812)和奥司他韦羧酸盐单独及联合用药的效果。以甲型流感病毒(A/NWS/33)作为神经氨酸酶(NA)来源。将化合物以半对数稀释度递增的方式与病毒孵育。预孵育后,加入化学发光底物。使用发光仪测量神经氨酸酶活性。在未处理条件下,每种化合物浓度下的化学发光计数百分比均标准化为 100% [5]。
细胞实验
细胞培养抗病毒研究[5]
在MDCK细胞融合培养物中测定了奥司他韦羧酸盐和帕拉米韦的抗病毒活性。实验在96孔微孔板中进行,每个孔接种约50个50%细胞培养感染剂量(CCID50)的病毒,培养三天后通过定量病毒产量进行检测。将样品板冷冻于-80°C。随后将两个微孔的培养基混合,用于制备滴定样品。采用终点稀释法(Reed和Muench,1938),在96孔微孔板中新鲜的MDCK细胞单层上,以10倍稀释递增的方式滴定样品,测定每种抑制剂浓度下的病毒产量,每个稀释度使用四个微孔。在感染后第3天和第6天检查微孔板,观察是否存在病毒细胞病变。病毒滴度以每 0.1 ml 的 log10 CCID50 表示。
抗炎筛选中,在 10 μM 测试化合物存在下,用 LPS (100 ng/ml) 刺激腹腔巨噬细胞 4 小时。收集细胞上清液,并使用 ELISA 试剂盒测定 TNF-α 的浓度。剩余细胞使用 CCK-8 法检测细胞毒性 [1]。
- 病毒产量降低实验中,将 96 孔板中汇合的 MDCK 细胞用甲型流感病毒 A/NWS/33 (H1N1)(约 50 CCID50)感染。帕拉米韦 (BCX-1812, RWJ-270201, S-021812) 和奥司他韦羧酸盐的浓度范围为 0.32 至 100 μM。培养三天后,将培养板冷冻保存。然后采用终点稀释法,在新鲜的MDCK细胞上测定上清液中的病毒滴度。病毒滴度以每0.1 ml的log10 CCID50表示[5]。
- 使用细胞计数试剂盒-8 (CCK-8) 法评估经帕拉米韦(BCX-1812、RWJ-270201、S-021812)处理的巨噬细胞的活力。将细胞接种于96孔板中。处理后,向每个孔中加入CCK-8溶液,并在37°C下孵育1小时。在450 nm处测量吸光度。在浓度高达 40 μM 时未观察到明显的细胞毒性 [1]。
- 对于 NF-κB 荧光素酶活性检测,将稳定转染 NF-κB 反应性荧光素酶构建体的 RAW264.7 细胞接种于 96 孔板中。细胞预先用帕拉米韦 (BCX-1812, RWJ-270201, S-021812)处理 1 小时,然后用 LPS (100 ng/ml) 刺激 6 小时。之后收集细胞,并使用荧光素酶检测系统测定荧光素酶活性 [1]。
- 通过蛋白质印迹法评估帕拉米韦 (BCX-1812, RWJ-270201, S-021812)对 LPS 诱导的 NF-κB 和 MAPK 通路激活的影响。蛋白质样品经SDS-PAGE电泳分离后,转移至NC膜上,并用针对p65、IκBα、p38、Erk1/2等蛋白磷酸化形式和总蛋白形式的特异性一抗进行孵育,随后用HRP标记的二抗进行孵育。信号通过化学发光法检测[1]。
动物实验
动物实验设计[5]
雌性 BALB/c 小鼠(18-20 g)经腹腔注射氯胺酮(100 mg/kg)麻醉后,进行鼻内给药。用 50 μl 流感病毒悬液感染小鼠;感染接种量约为 104.5 CCID50/只小鼠,相当于三个 50% 小鼠致死剂量 (MLD50)。化合物通过灌胃(奥司他韦)或肌肉注射(帕拉米韦)给药,每日两次,间隔 12 小时,持续 5 天,从病毒攻击前 2 小时开始给药。安慰剂组小鼠同时接受灌胃和肌肉注射给药。每天观察 10 只药物治疗的感染小鼠和 10 只安慰剂对照组小鼠的死亡情况,持续 21 天。治疗期间死亡的小鼠不计入总数。每隔一天测量一次体重。
药代动力学 (PK) 分析[4]
在雪貂和小鼠中获得 PK 数据,具体方法如下。雄性雪貂(每组 3 只)肌肉注射 1、3 或 9 mg/kg 帕拉米韦。在给药前(时间 0)以及给药后 0.083 至 72 小时的时间间隔内,采集约 0.5 ml 的血样,并通过液相色谱-串联质谱法 (LS/MS/MS) 进行分析。小鼠的药代动力学 (PK) 数据基于 10 mg/kg 肌注剂量的模型生成。PK 参数的计算和建模均使用 WinNonlin® 5.0.1 软件完成。雪貂(每组 3 只)单次肌注 1、3 或 9 mg/kg 帕拉米韦后获得 PK 数据。在 72 小时内监测动物血浆中帕拉米韦的浓度。
小鼠[4]
10 周龄小鼠(每组 10-11 只)经鼻内感染 6 × 10² TCID₅₀ 的在 MDCK 细胞中培养的甲型 H5N1 流感病毒 (A/Vietnam/1203/04)。随后,小鼠在接种后 1 小时(+1 小时)接受单剂量帕拉米韦(30 mg/kg)治疗,或通过肌注接受多次剂量(+1 小时,从第 +1 天到第 +4 天每天一次)治疗。作为对照,小鼠在+1小时接受药物稀释剂(“载体”)处理,并于+1至+4天每天进行一次。作为比较,小鼠在+1小时接受奥司他韦(10 mg/kg/天)口服(per os,po)处理,并于+1至+4天每天进行一次。每天监测动物15天,观察其死亡、疾病发展和体温。在图例所示的日期记录体重。重症定义为体重下降≥20%。
雪貂[4]
使用病毒原液,经鼻内感染6至8周龄的雪貂,感染剂量分别为1.5 × 10³ TCID₅₀(试验1)、1.5 × 10⁴ TCID₅₀(试验2)或1.7 × 10⁴ TCID₅₀的甲型H5N1流感病毒(A/Vietnam/1203/04)。在 MDCK 细胞(试验 1)或鸡胚(试验 2 和 3)中制备病毒。随后,雪貂接受多次帕拉米韦(30 mg/kg)治疗,或作为对照,在感染后 1 小时以及第 1 天至第 4 天每天接受载体治疗(试验 1 和 3),或不接受治疗(试验 2)。感染和药物治疗后,每天监测动物在感染后 16-18 天内的死亡和疾病发展情况。每日进行体温遥测监测。在试验 3 中,每组随机预先选择 5 只动物,分别在感染后第 4 天和第 6 天处死,用于器官采集和感染性病毒滴度测定。
动物模型:细胞因子风暴综合征模型小鼠[1]
剂量:20 mg/kg,60 mg/kg
给药途径:腹腔注射 (ip)
结果:8 种细胞因子水平降低,包括 GM-CSF、IL-1β、 IL-6、IL-12、趋化因子(MCP-1)、TNF-α、IFN-α 和 IFN-γ 均表现出出血点或充血减少、肺泡轻度增厚以及炎症细胞浸润,对肺组织具有显著的保护作用。

小鼠细胞因子风暴综合征 (CSS) 模型:通过单次腹腔注射 (ip) LPS (15 mg/kg) 诱导 CSS。在注射 LPS 前 1 小时腹腔注射帕拉米韦 (BCX-1812, RWJ-270201, S-021812) (60 mg/kg)。小鼠在注射 LPS 后 4 小时处死以收集血清,或在注射 LPS 后 8 小时处死以收集支气管肺泡灌洗液 (BALF) 和肺组织。在生存研究中,使用致死剂量小鼠接受LPS(30 mg/kg)刺激,并在LPS刺激前1小时腹腔注射低剂量(20 mg/kg)或高剂量(60 mg/kg)帕拉米韦。每2小时监测一次小鼠存活率,持续40小时[1]。
- 小鼠流感B病毒感染模型:将6周龄雌性BALB/c、NOD scid和BALB scid小鼠经鼻内接种流感B病毒(MA/12、PH/13或BR/08)。帕拉米韦(BCX-1812、RWJ-270201、S-021812)以75 mg/kg/天的剂量进行肌内注射。治疗方案包括:感染后24小时单次给药(1×)、感染后24小时和72小时双次给药(2×)或四次给药。分别于感染后24、72、120和168小时(hpi)给予剂量(共4次)。对照组动物给予无菌水。每日监测小鼠的体重变化、临床症状和存活情况,直至感染后30天(dpi)[2]。
- 甲型流感病毒A/NWS/33 (H1N1)小鼠模型:雌性BALB/c小鼠经鼻内感染病毒(约3个MLD50)。帕拉米韦(BCX-1812、RWJ-270201、S-021812)肌注(im),每日两次,间隔12小时,持续5天,从病毒攻击前2小时开始。药物用无菌生理盐水配制。奥司他韦通过灌胃(po)给药。每组使用10只小鼠,观察21天以监测死亡情况。每隔一天记录体重。 [5].
- 小鼠和雪貂H5N1甲型流感病毒模型:10周龄小鼠经鼻内感染致死剂量(6×10^2 TCID50)的A/Vietnam/1203/04 (H5N1)病毒。帕拉米韦(BCX-1812、RWJ-270201、S-021812)以30 mg/kg的剂量肌注,于感染后1小时单次给药,或分多次给药(第1天至第4天每日一次)。作为对照,奥司他韦以10 mg/kg/天的剂量口服给药。6-8周龄雪貂经鼻内感染致死剂量(1.5×10^3至1.7×10^4 TCID50)的相同病毒,并多次肌注帕拉米韦(30 mg/kg)。感染后1小时(+1 hpi)以及感染后第1天至第4天(+1 d-4)每日进行检测。对照组动物接受载体或未接受任何治疗。对动物的存活率和疾病发展情况进行15-18天的监测[4]。
0.025 mg/kg/d、0.05 mg/kg/d 和 0.1 mg/kg/d
小鼠
药代性质 (ADME/PK)
研究人员还评估了帕拉米韦在非近交系动物(雪貂)中的暴露后治疗效果,因为对雪貂进行帕拉米韦药代动力学分析表明,该药物在肌内注射后能迅速进入血液。药代动力学分析还表明,注射用帕拉米韦在小鼠肌内注射后也能迅速进入血液。 https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC2680697/
在小鼠中,单次肌内注射10 mg/kg帕拉米韦(BCX-1812、RWJ-270201、S-021812)后,血浆浓度立即达到峰值,消除半衰期超过24小时,支持每日一次给药[2]。
-在雪貂中,单次肌内注射1、3或9 mg/kg帕拉米韦(BCX-1812、RWJ-270201、S-021812)后,帕拉米韦迅速被吸收入血液循环。达到的最大血浆浓度 (Cmax) 比 H5N1 分离株的 IC50 值高出 20,000 倍 [4]。
- 在人体内,口服帕拉米韦的生物利用度较低 (≤3%)。健康受试者单次静脉注射 600 mg 帕拉米韦后,其消除半衰期约为 20 小时。帕拉米韦几乎完全通过肾脏排泄,其中 90% 的药物以原形排出。当肌酐清除率 (CrCl) 低于 115 mL/min 时,清除率与 CrCl 呈线性关系。肾功能不全患者需要调整剂量(例如,CrCl 为 30-49 mL/min 时为 200 mg,CrCl 为 10-29 mL/min 时为 100 mg)[3]。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
肝毒性
尽管帕拉米韦应用广泛,但几乎没有证据表明单次静脉输注推荐剂量的帕拉米韦会导致肝损伤,无论是血清酶升高还是临床上明显的肝病。一些流感患者在急性期可能会出现轻度血清酶升高,但这似乎与治疗无关,也不会因帕拉米韦而加重。概率评分:E(不太可能是临床上明显的肝损伤的原因)。妊娠和哺乳期影响 ◉ 哺乳期用药概述 由于帕拉米韦口服吸收不良,不太可能以具有临床意义的浓度进入婴儿血液。然而,由于目前尚无关于哺乳期使用帕拉米韦的信息,因此可能更倾向于选择其他药物,特别是对于母乳喂养的新生儿或早产儿。 ◉ 对母乳喂养婴儿的影响 截至修订日期,未找到相关的已发表信息。 ◉ 对哺乳和母乳的影响 截至修订日期,未找到相关的已发表信息。
在巨噬细胞的细胞活力检测(CCK-8)中,帕拉米韦(BCX-1812、RWJ-270201、S-021812) 在浓度高达 40 μM 时未显示出明显的细胞毒性 [1]。
- 在临床研究中,帕拉米韦(BCX-1812、RWJ-270201、S-021812) 显示出良好的耐受性和安全性。最常见的不良事件为轻度至中度,包括胃肠道疾病(腹泻、恶心、呕吐)和中性粒细胞计数减少,这些不良事件均可自行缓解。未观察到奥司他韦或金刚烷胺存在显著的药物相互作用[3]。
- 在雪貂模型中,多次注射帕拉米韦(30 mg/kg,肌注)未观察到显著毒性[4]。
参考文献

[1]. Peramivir, an anti-influenza virus drug, exhibits potential anti-cytokine storm effects [J]. Frontiers in Immunology, 2022, 13: 856327.

[2]. Pathogenicity and peramivir efficacy in immunocompromised murine models of influenza B virus infection [J]. Scientific reports, 2017, 7(1): 7345.

[3]. Peramivir: a novel intravenous neuraminidase inhibitor for treatment of acute influenza infections [J]. Frontiers in microbiology, 2016, 7: 450.

[4]. Virology.2008 Apr 25;374(1):198-209.

[5]. Antiviral Res.2010 Oct;88(1):38-44.

其他信息
帕拉米韦属于胍类药物,其三水合物用于治疗18岁及以上症状持续不超过两天的急性单纯性流感。它是一种抗病毒药物,也是一种EC 3.2.1.18(外切α-唾液酸酶)抑制剂。帕拉米韦属于环戊醇、乙酰胺、胍和3-羟基单羧酸类化合物。它含有帕拉米韦水合物。帕拉米韦是由Biocryst Pharmaceuticals公司开发的一种用于治疗甲型/乙型流感的抗病毒药物。帕拉米韦的研发得到了美国卫生与公众服务部的支持,作为政府应对流感大流行的一部分。作为一种流感病毒神经氨酸酶抑制剂,帕拉米韦的作用机制是阻止新病毒从感染细胞中释放出来。由于口服生物利用度低,强生公司此前已停止生产该药物的口服制剂。 2017年9月,美国食品药品监督管理局(FDA)批准了注射用帕拉米韦用于治疗2岁及以上儿童的急性单纯性流感,且症状持续时间不超过两天。帕拉米韦是一种流感病毒神经氨酸酶抑制剂,用于治疗甲型和乙型流感。在帕拉米韦治疗期间,未观察到血清酶升高或具有临床意义的肝损伤。帕拉米韦是一种环戊烷衍生物,对甲型和乙型流感病毒均有效。作为一种神经氨酸酶抑制剂,帕拉米韦可阻止病毒颗粒的正常加工,从而阻止病毒从感染细胞中释放。药物适应症:帕拉米韦适用于治疗6个月及以上患者,且症状持续时间不超过两天的急性单纯性流感。FDA标签:帕拉米韦适用于治疗2岁及以上成人和儿童的单纯性流感。帕拉米韦治疗流感的作用机制:帕拉米韦是一种流感病毒神经氨酸酶抑制剂,可阻止新的病毒颗粒离开受感染的细胞。
帕拉米韦(BCX-1812、RWJ-270201、S-021812)是一种新型环戊烷类神经氨酸酶抑制剂。它于2014年12月获得美国食品药品监督管理局(FDA)批准,用于治疗18岁及以上患者的急性单纯性流感。本品以单次静脉注射(IV)600 mg给药[3]。
- 在2009年H1N1流感大流行期间,FDA发布了紧急使用授权(EUA),允许对已批准的抗病毒药物无反应或无法采用其他给药途径的住院成人和儿童患者使用静脉注射帕拉米韦[3]。
- 帕拉米韦(BCX-1812、RWJ-270201、S-021812)独特的结构(环戊烷环,带有胍基和疏水侧链)使其能够与NA活性位点中保守的精氨酸残基形成八个强氢键,从而导致其结合紧密且解离速率慢(t1/2 > 24 h),而奥司他韦和扎那米韦的t1/2则为1.25 h[3]。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C15H28N4O4
分子量
328.41
精确质量
328.211
元素分析
C, 54.86; H, 8.59; N, 17.06; O, 19.49
CAS号
330600-85-6
相关CAS号
Peramivir trihydrate;1041434-82-5
PubChem CID
154234
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.4±0.1 g/cm3
折射率
1.614
LogP
-1.37
tPSA
151.03
氢键供体(HBD)数目
5
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
7
重原子数目
23
分子复杂度/Complexity
460
定义原子立体中心数目
5
SMILES
O[C@H]1[C@]([C@H](C(CC)CC)NC(C)=O)([H])[C@H](NC(N)=N)C[C@@H]1C(O)=O
InChi Key
XRQDFNLINLXZLB-CKIKVBCHSA-N
InChi Code
InChI=1S/C15H28N4O4/c1-4-8(5-2)12(18-7(3)20)11-10(19-15(16)17)6-9(13(11)21)14(22)23/h8-13,21H,4-6H2,1-3H3,(H,18,20)(H,22,23)(H4,16,17,19)/t9-,10+,11+,12-,13+/m0/s1
化学名
(1S,2S,3R,4R)-3-((S)-1-acetamido-2-ethylbutyl)-4-guanidino-2-hydroxycyclopentanecarboxylic acid
别名
RWJ 270201; RWJ270201; BCX-1812; Rapiacta; 229614-55-5; Peramivir anhydrous; RAPIVAB; Brand name: Rapivab; Rapiacta and Peramiflu; BCX1812; BCX1812; BCX 1812; RWJ270201;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.0450 mL 15.2249 mL 30.4497 mL
5 mM 0.6090 mL 3.0450 mL 6.0899 mL
10 mM 0.3045 mL 1.5225 mL 3.0450 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

临床试验信息
NCT Number Recruitment interventions Conditions Sponsor/Collaborators Start Date Phases
NCT00957996 COMPLETEDWITH RESULTS Drug: Peramivir
Drug: Peramivir
Cough
Fatigue
Headache
Myalgia
BioCryst Pharmaceuticals 2009-10 Phase 3
NCT02635724 COMPLETEDWITH RESULTS Drug: Peramivir Influenza BioCryst Pharmaceuticals 2015-12 Phase 3
NCT02665351 COMPLETED Drug: Peramivir Influenza Chinese University of Hong Kong 2011-02 Phase 2
Phase 3
NCT01063933 WITHDRAWN Drug: Peramivir Influenza National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID) 2011-08 Phase 1
Phase 2
NCT00297050 COMPLETED Drug: Peramivir Influenza National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID) 2006-02-23 Phase 1
生物数据图片
  • Identification of peramivir as anti-inflammatory agents. (A) Chemical structures of peramivir, oseltamivir and zanamivir. (B) Peramivir showed the strongest TNF-α inhibitory effect compared with oseltamivir and zanamivir, **P < 0.01, ***P < 0.001 vs peramivir. (C) The dose-response curves for the TNF-α inhibitions of peramivir exhibited IC50s of 4.3 µM. (D) Cell viabilities of macrophages with peramivir treatment at different concentrations. N = 3.[1].Peramivir, an anti-influenza virus drug, exhibits potential anti-cytokine storm effects [J]. Frontiers in Immunology, 2022, 13: 856327.
  • Peramivir has a significant effect on some cytokines in mouse serum and bronchoalveolar lavage fluid (BALF). (A–H) Serum cytokines. (I, J) BALF cytokines. *P < 0.05, **P <0.01, ***P < 0.001, ****P < 0.0001. N = 8-10.[1].Peramivir, an anti-influenza virus drug, exhibits potential anti-cytokine storm effects [J]. Frontiers in Immunology, 2022, 13: 856327.
  • The weak effect of peramivir on some cytokines in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF) of mice. (A, B) BALF cytokines: IFN-γ, IFN-β. (C) BALF chemokines: MCP-1. (D) BALF cytokines: GM-CSF. (E–J) BALF cytokines: IL-1α, IL-1β, IL-10, IL-17A, IL-27, IL-23. ns, no significance. N = 8-10.[1].Peramivir, an anti-influenza virus drug, exhibits potential anti-cytokine storm effects [J]. Frontiers in Immunology, 2022, 13: 856327.
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