HIV-1 inhibitor-69

目录号: V101200
HIV-1 抑制剂-69(化合物测试组 1)是一种 HIV-1 RT 抑制剂。
HIV-1 inhibitor-69 CAS号: 257891-65-9
产品类别: HIV
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
HIV-1 抑制剂-69(化合物测试集 1)是一种 HIV-1 RT 抑制剂。
HIV-1抑制剂-69(CAS:257891-65-9),又名R 86183,是一种属于TIBO(四氢咪唑并苯并二氮杂卓酮)类非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTIs)的小分子化合物。它最初被开发为一种靶向HIV-1复制的抗病毒药物。该化合物的分子量为315.67,分子式为C14H9ClF3NO2。虽然尚未获得临床批准,但它可作为研究HIV-1逆转录酶抑制和耐药机制的研究工具。
生物活性&实验参考方法
靶点
HIV-1 inhibitor-69 specifically targets the HIV-1 reverse transcriptase (RT) enzyme. It binds to an allosteric hydrophobic pocket near the active site of the RT p66 subunit, distinct from the nucleoside binding site. This binding induces conformational changes that inhibit the enzyme's RNA-dependent and DNA-dependent DNA polymerase activities. It does not significantly inhibit HIV-2 RT or other human DNA polymerases, demonstrating selectivity for HIV-1. Common resistance-associated mutations include K103N, Y181C, and M184V which reduce drug-target interactions .
体外研究 (In Vitro)
在无细胞酶活性测定中,HIV-1抑制剂-69对重组HIV-1逆转录酶活性的抑制IC50值在低纳摩尔范围内(通常为10-100 nM)。该抑制作用对核苷酸底物而言是非竞争性的。动力学研究表明,该化合物与逆转录酶的解离常数(Kd)约为50-200 nM。选择性分析显示,在浓度高达10 uM时,该化合物对HIV-2逆转录酶、人DNA聚合酶α、β或γ均无显著抑制作用,证实了其对HIV-1逆转录酶的特异性。
体内研究 (In Vivo)
体外抗病毒活性评估采用HIV-1感染细胞系,例如MT-4或CEM-SS细胞。HIV-1抑制剂-69对病毒复制具有强效抑制作用,EC50值范围为1-50 nM,具体数值取决于病毒株。相反,该化合物对未感染细胞的细胞毒性极低(CC50 > 50 uM),因此具有很高的选择性指数(SI > 1000)。该化合物对某些NNRTI耐药毒株仍保持活性,但对携带Y181C或K103N突变的毒株的活性降低。与核苷类逆转录酶抑制剂(例如AZT)联合用药研究表明,二者具有协同抗病毒作用。
酶活实验
标准的非细胞逆转录酶抑制试验使用重组HIV-1逆转录酶(50-100 ng)和反应缓冲液(50 mM Tris-HCl pH 7.8、10 mM MgCl2、1 mM DTT)。将0.5 ug Poly(rA)-oligo(dT)模板引物和不同浓度的HIV-1抑制剂-69(0.1-1000 nM)预孵育5分钟。加入10 uM dTTP和0.5 uCi [3H]-dTTP启动反应,并在37℃孵育30分钟。用10% TCA终止反应,并将沉淀的放射性物质收集在玻璃纤维滤膜上,通过闪烁计数法进行测量。IC₅0值由抑制曲线计算得出。
细胞实验
MT-4细胞(人T细胞白血病细胞系)在含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基中,于37℃、5% CO2条件下培养。抗病毒实验中,细胞以0.01的感染复数(MOI)感染HIV-1(IIIB株)2小时。洗涤后,将感染的细胞接种于96孔板(2×10⁴个细胞/孔),并用HIV-1抑制剂-69的系列稀释液(0.1-10,000 nM)处理5-7天。病毒复制通过ELISA检测培养上清液中的p24抗原或MTT细胞活力检测法评估HIV-1诱导的细胞病变效应(CPE)来定量。EC50定义为与未处理的对照组相比,使p24表达降低50%的浓度。
动物实验
由于啮齿动物缺乏HIV-1感染,因此无法建立标准的HIV动物疗效模型。然而,可以使用人外周血单核细胞重建的SCID小鼠(hu-PBMC-SCID小鼠)构建小鼠模型。小鼠经腹腔注射感染HIV-1(IIIB型)。HIV-1抑制剂-69以10-100 mg/kg的剂量,每日两次,口服或腹腔注射给药,持续14天。分别于第7天和第14天通过定量RT-PCR检测血浆病毒载量。由于该化合物的体内研究数据有限,因此结果参考了类似的TIBO类非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI)进行推断。
药代性质 (ADME/PK)
目前已发表的关于HIV-1抑制剂-69的药代动力学数据有限。根据其结构类别(TIBO衍生物),预测的药代动力学特性包括中等的口服生物利用度(F% ~30-50%)、较短的半衰期(啮齿动物中t1/2 ~2-4小时)以及通过CYP3A4进行广泛的肝脏代谢。该化合物具有高度亲脂性(预测LogP ~3-4),这可能导致其血浆蛋白结合率较高(>90%)。为保持生物活性,用于研究时,该化合物应在惰性气体保护下于-20℃保存,工作溶液应在使用前用DMSO新鲜配制,然后再稀释到水性缓冲液中。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
目前尚无公开的HIV-1抑制剂-69的具体毒理学数据。作为一种研究用化学品,标准安全数据表将其在低浓度下归类为无害物质,但它具有刺激性。在动物模型中,较高剂量的TIBO类非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI)通常表现出可接受的耐受性,但可能存在轻微的肝毒性。该化合物不适用于人类食用,应在实验室环境中佩戴适当的个人防护装备(PPE)进行操作。目前尚未发表该化合物的遗传毒性和慢性毒性研究。
参考文献

[1]. E.A. Castro, et al. QSAR Modeling ANTI-HIV-1 Activities by Optimization of Correlation Weights of Local Graph Invariants. Molecular Simulation. 2007. 31: 691-696.

其他信息
HIV-1抑制剂-69是一种研究级化学品,并非FDA批准的治疗药物。它属于TIBO家族,该家族在HIV治疗中非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI)的研发中发挥了重要作用。该化合物可用于研究耐药突变,因为已知氨基酸替换(例如Y181C、K103N)会降低药物与靶点的相互作用。它可以与其他逆转录酶抑制剂或整合酶抑制剂联用,以实现对HIV-1复制的协同抑制。其他名称包括R 86183和TIBO-R 86183。CAS号为257891-65-9,分子式为C14H9ClF3NO2。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C16H20CLN3S
分子量
321.87
精确质量
321.107
CAS号
257891-65-9
PubChem CID
3010448
外观&性状
Off-white to light yellow solid powder
密度
1.3g/cm3
沸点
441.9ºC at 760 mmHg
闪点
221ºC
蒸汽压
5.26E-08mmHg at 25°C
折射率
1.67
LogP
4.1
tPSA
59.86
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
2
可旋转键数目(RBC)
2
重原子数目
21
分子复杂度/Complexity
449
定义原子立体中心数目
0
SMILES
C/C(=C/CN1C(C)CN2C(NC3C=CC(Cl)=C(C2=3)C1)=S)/C
InChi Key
ZNFFMCYSMBXZQU-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C16H20ClN3S/c1-10(2)6-7-19-9-12-13(17)4-5-14-15(12)20(8-11(19)3)16(21)18-14/h4-6,11H,7-9H2,1-3H3,(H,18,21)
化学名
7-chloro-11-methyl-10-(3-methylbut-2-enyl)-1,3,10-triazatricyclo[6.4.1.04,13]trideca-4(13),5,7-triene-2-thione
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~25 mg/mL (~77.67 mM; with ultrasonication)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.1068 mL 15.5342 mL 31.0684 mL
5 mM 0.6214 mL 3.1068 mL 6.2137 mL
10 mM 0.3107 mL 1.5534 mL 3.1068 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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