| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Enitociclib (VIP152; BAY-1251152) is a highly potent and selective inhibitor of cyclin-dependent kinase 9 (CDK9) in complex with cyclin T1 (CycT1), a core component of positive transcription elongation factor b (P-TEFb).
- Ki for human CDK9/CycT1: 0.3 nM (surface plasmon resonance, SPR) [3]
- IC₅₀ for human CDK9/CycT1 kinase activity: 0.8 nM (homogeneous time-resolved fluorescence, HTRF assay) [3] - High selectivity over other CDKs/kinases: IC₅₀ > 1000 nM for CDK1/CycB, CDK2/CycE, CDK4/CycD1, CDK6/CycD3, CDK7/CycH; inhibition rate < 10% for 290+ other kinases at 100 nM [3] - In cellular assays, it inhibits P-TEFb-mediated phosphorylation of RNA polymerase II (RNAPII) at Ser2 with IC₅₀ = 1.2 nM [3] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
1. 跨癌种抗增殖活性：
- 血液系统恶性肿瘤（文献3）：IC₅₀（72小时CellTiter-Glo实验）——MV-4-11（急性髓系白血病AML，0.9 nM）、Raji（伯基特淋巴瘤，1.2 nM）、Jurkat（T细胞白血病，1.5 nM）、U266（多发性骨髓瘤MM，2.3 nM）[3]
- MYC⁺淋巴瘤细胞（文献5）：IC₅₀——SU-DHL-4（0.8 nM）、OCI-Ly10（1.1 nM）、Farage（1.3 nM）；维奈托克耐药SU-DHL-4细胞（IC₅₀=0.9 nM，与亲本细胞相当）[5] - 多发性骨髓瘤（MM）细胞（文献6）：IC₅₀——RPMI-8226（1.1 nM）、U266（1.5 nM）、MM.1S（1.8 nM）；患者来源CD138⁺原代MM细胞（IC₅₀范围：1.2–3.5 nM）[6] - 实体瘤（文献3）：IC₅₀——HCT116（结直肠癌，3.5 nM）、A549（肺癌，4.8 nM）、MDA-MB-231（乳腺癌，5.2 nM）[3] 2. 转录调控与癌蛋白下调： - MYC⁺淋巴瘤细胞（SU-DHL-4，文献5）：1 nM 埃尼托昔利布处理4小时，p-RNAPII（Ser2）降低70%，MYC蛋白降低65%（蛋白质印迹法）；5 nM处理8小时，MCL1降低70%，BCL2降低60%[5] - MM细胞（RPMI-8226，文献6）：2 nM处理6小时，p-RNAPII（Ser2）降低65%，MCL1降低60%，BCL2降低55%；qPCR显示短半衰期转录本（MYC、MCL1）降低40–50%，对管家基因（GAPDH、ACTB）无影响[6] - AML细胞（MV-4-11，文献3）：5 nM处理8小时，MYC降低70%，MCL1降低65%[3] 3. 凋亡诱导： - SU-DHL-4细胞（文献5）：1 nM处理24小时，Annexin V⁺细胞比例达35%；5 nM处理达80%（流式细胞术）；5 nM浓度下caspase-3/7活性升高4.2倍[5] - RPMI-8226细胞（文献6）：2 nM处理24小时，Annexin V⁺细胞达55%；5 nM处理48小时，TUNEL⁺细胞增加70%（免疫荧光）[6] - MV-4-11细胞（文献3）：10 nM处理24小时，Annexin V⁺细胞达85%[3] 4. 早期数据（文献1、2、4）： - WO2014076091A1：埃尼托昔利布（当时称“化合物X”）抑制CDK9/CycT1（IC₅₀<5 nM）及Raji细胞增殖（IC₅₀<5 nM）[1] - Cancer Res 2017/AACR 2017：对AML细胞具有强效P-TEFb抑制活性（IC₅₀<1 nM）及MYC下调作用[2][4] |
| 体内研究 (In Vivo) |
1. MYC⁺淋巴瘤异种移植模型（文献5）：
- 模型：SU-DHL-4细胞（1×10⁶个）皮下接种于NSG小鼠；肿瘤体积达100–150 mm³时开始给药。
- 药效：静脉注射（IV）埃尼托昔利布（10、20 mg/kg，每周1次，连续3周，溶解于10% DMSO/40% PEG400/50%生理盐水）：
- 10 mg/kg：肿瘤生长抑制率（TGI）=85%，无完全消退（CR）；
- 20 mg/kg：TGI=98%，6只小鼠中5只实现CR（肿瘤<50 mm³持续>28天）；
- 机制：20 mg/kg组肿瘤组织中p-RNAPII（Ser2）降低75%，MYC降低80%（vs溶媒组）[5]
2. 多发性骨髓瘤异种移植模型（文献6）： - 皮下模型（RPMI-8226，NSG小鼠）：IV 埃尼托昔利布（15、30 mg/kg，每周1次，连续4周）： - 15 mg/kg：TGI=78%，中位生存期延长30%； - 30 mg/kg：TGI=92%，中位生存期延长50%（从35天延长至53天）； - 骨转移模型（RPMI-8226经尾静脉接种，NSG小鼠）：30 mg/kg IV每周1次，连续4周，溶骨性病变（μCT检测）减少65%，骨髓肿瘤负荷（流式细胞术）减少70%[6] 3. 血液系统/实体瘤异种移植模型（文献3）： - MV-4-11（AML，SCID小鼠）：40 mg/kg IV每周1次，连续3周：TGI=95%，8只小鼠中3只CR； - Raji（淋巴瘤，裸鼠）：20 mg/kg IV每周1次，连续3周：TGI=80%，8只小鼠中1只CR； - HCT116（结直肠癌，裸鼠）：40 mg/kg IV每周1次，连续3周：TGI=78%[3] 4. 药效学（PD）-药代动力学（PK）相关性（文献3、5）： - 给药后血浆浓度>5 nM（高于细胞IC₅₀）持续>24小时，与最大TGI相关；24小时时肿瘤组织药物浓度为血浆浓度的2.3–2.8倍[3][5] |
| 酶活实验 |
1. CDK9/CycT1激酶活性实验（HTRF，文献3）：
- 反应体系（25 μL）：50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、10 mM MgCl₂、1 mM DTT、200 μM ATP、0.5 μg/mL生物素化RNAPII Ser2肽底物、0.1 nM重组人CDK9/CycT1，及埃尼托昔利布（0.01–100 nM）。
- 孵育：37°C孵育60分钟；加入25 μL终止缓冲液（50 mM HEPES pH 7.5、0.2 M EDTA、链霉亲和素-XL665、Eu³⁺标记抗p-RNAPII Ser2抗体）终止反应。
- 检测：测定时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）信号（615 nm为Eu³⁺发射光，665 nm为XL665发射光）；通过剂量-反应曲线计算IC₅₀[3]
2. CDK9/CycT1结合实验（SPR，文献3）： - 重组人CDK9/CycT1（5 μg/mL）通过胺偶联固定于CM5传感芯片。 - 埃尼托昔利布（0.1–100 nM）在运行缓冲液（10 mM HEPES pH 7.4、150 mM NaCl、0.05% Tween-20）中以30 μL/min流速进样。 - 记录结合相（120秒）与解离相（300秒）信号；采用1:1结合模型计算Ki[3] 3. 激酶选择性谱实验（文献3）： - 埃尼托昔利布（100 nM）通过放射性或发光实验检测对290余种激酶的抑制活性；除CDK9外，其他激酶抑制率均<10%[3] |
| 细胞实验 |
1. 细胞活力实验（CellTiter-Glo，文献3、5、6）：
- 细胞以1×10³个/孔接种于384孔板，培养过夜。
- 加入埃尼托昔利布（0.01–100 nM，10点稀释）；37°C、5% CO₂孵育72小时。
- 加入等体积CellTiter-Glo试剂；检测发光值。通过四参数逻辑回归计算IC₅₀[3][5][6]
2. p-RNAPII/癌蛋白蛋白质印迹实验（文献3、5、6）： - 细胞（5×10⁵个/mL）经埃尼托昔利布（0.1–10 nM）处理4–8小时。 - RIPA缓冲液（含蛋白酶/磷酸酶抑制剂）裂解细胞；30 μg蛋白经SDS-PAGE分离后转移至PVDF膜。 - 膜与一抗（抗p-RNAPII Ser2、抗MYC、抗MCL1、抗β-肌动蛋白）及HRP标记二抗孵育；ECL法显影条带，光密度法量化[3][5][6] 3. 凋亡实验（Annexin V/PI，文献3、5、6）： - 细胞经埃尼托昔利布（1–10 nM）处理24小时。 - PBS洗涤后，Annexin V-FITC/PI室温染色15分钟。 - 流式细胞术分析：量化Annexin V⁺/PI⁻（早期凋亡）与Annexin V⁺/PI⁺（晚期凋亡）细胞比例[3][5][6] 4. 原代MM细胞实验（文献6）： - 磁珠分选法从患者骨髓中分离CD138⁺细胞。 - 以5×10⁴个/孔接种，埃尼托昔利布（0.1–10 nM）处理72小时。 - 台盼蓝排斥法检测活力；计算IC₅₀[6] |
| 动物实验 |
1. MYC⁺淋巴瘤异种移植模型（SU-DHL-4，NSG小鼠）：- 将1×10⁶个SU-DHL-4细胞（50% Matrigel/PBS）皮下植入6-8周龄雌性NSG小鼠（18-22 g）。- 随机分为3组（每组n=6）：载体组（10% DMSO/40% PEG400/50%生理盐水）、Enitociclib 10 mg/kg组、20 mg/kg组。- 每周一次经尾静脉注射，持续3周。- 每周两次测量肿瘤体积（V = 0.5×长×宽²）；若肿瘤体积 > 1500 mm³ 或体重减轻 > 20%，则对小鼠实施安乐死 [5]
2. 多发性骨髓瘤异种移植模型： - 皮下模型（RPMI-8226，NSG 小鼠）：皮下植入 2×10⁶ 个细胞（50% Matrigel/PBS）。静脉注射给药（15、30 mg/kg，每周一次，持续 4 周）；肿瘤/体重监测方法同上 [6] - 骨转移模型（RPMI-8226，NSG 小鼠）：尾静脉注射 5×10⁵ 个细胞。静脉注射给药（30 mg/kg，每周一次，持续 4 周）；采用μCT评估骨病变，采用流式细胞术评估骨髓肿瘤负荷[6] 3. AML/淋巴瘤/实体瘤异种移植： - MV-4-11（SCID小鼠）：皮下植入5×10⁶个细胞（50% Matrigel/PBS）；静脉注射Enitociclib（10–40 mg/kg，每周一次，持续3周）[3] - Raji（裸鼠）：皮下植入1×10⁷个细胞（PBS）；静脉注射20 mg/kg，每周一次，持续3周[3] - HCT116（裸鼠）：皮下植入5×10⁶个细胞（50% Matrigel/PBS）；每周静脉注射 40 mg/kg，持续 3 周 [3] 4. 药代动力学研究：- 雌性 CD-1 小鼠（每时间点 n=3）静脉注射 Enitociclib 20 mg/kg。- 给药后 0.083–24 小时采集血样；离心分离血浆。- 采用液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 测定药物浓度；药代动力学参数：t₁/₂ = 6.8 小时，CL = 12.3 mL/min/kg，Vss = 5.2 L/kg [3] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
对雌性 CD-1 小鼠（每时间点 n=3）静脉注射 Enitociclib 20 mg/kg。- 于给药后 0.083–24 小时采集血样；通过离心分离血浆。- 采用 LC-MS/MS 测定药物浓度；药代动力学参数：t₁/₂ = 6.8 h，CL = 12.3 mL/min/kg，Vss = 5.2 L/kg [3]
ADME/药代动力学：1. 啮齿动物/犬的临床前药代动力学：- 小鼠（静脉注射 20 mg/kg）：t₁/₂ = 6.8 h，CL = 12.3 mL/min/kg，Vss = 5.2 L/kg [3] - 大鼠（静脉注射 10 mg/kg）：t₁/₂ = 8.2 h，CL = 9.5 mL/min/kg，Vss = 4.8 L/kg [3] - 犬（静脉注射 5 mg/kg）：t₁/₂ = 12.5 h，CL = 5.1 mL/min/kg，Vss = 3.9 L/kg [3] 2. 口服生物利用度：- 口服吸收率低：小鼠 F < 5%，大鼠 F < 3%，原因是溶解度差和首过代谢；选择静脉给药进行临床开发[3] 3. 组织分布：- 小鼠（静脉注射 20 mg/kg，给药后 2 小时）：药物浓度（ng/g）- 肝脏 (1200)、肾脏 (850)、肿瘤 (SU-DHL-4, 620) 与血浆 (270 ng/mL) 相比[3][5] 4. 代谢/排泄：- 主要由人 CYP3A4 代谢；主要代谢物无活性（100 nM 时无 CDK9 抑制）[3] - 大鼠（静脉注射）：72 小时内 65% 经粪便排泄（30% 为原形），20% 经尿液排泄（5% 为原形）[3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 重复给药毒性：- 大鼠（静脉注射 2、5、10 mg/kg，每日一次，持续 14 天）：无观察到不良反应剂量 (NOAEL) = 5 mg/kg；10 mg/kg 导致短暂性体重减轻 (≤10%)、轻度胃黏膜增生和血小板减少 (≤20%) [3]
- 犬（静脉注射 1、3、6 mg/kg，每周一次，持续 4 周）：无观察到不良反应剂量 (NOAEL) = 3 mg/kg；6 mg/kg 导致轻度贫血（血红蛋白 ↓15%）、淋巴细胞减少 (↓25%) 和可逆性 ALT 升高 (×2) [3] 2. 心脏/遗传毒性：- 无 hERG 抑制（IC₅₀ > 10 μM，膜片钳法）；犬类未见QT间期延长（≤6 mg/kg）[3] - Ames试验、体外微核试验和体内彗星试验结果均为阴性[3] 3. 血浆蛋白结合率：- 98.5%（人血浆），97.8%（小鼠血浆），98.2%（犬血浆）（平衡透析）[3] 4. 疗效研究中的毒性：- MYC⁺淋巴瘤模型（20 mg/kg 静脉注射）：无体重减轻（>初始体重的95%）或器官组织病理学改变（肝脏、肾脏、心脏）[5] - 多发性骨髓瘤模型（30 mg/kg 静脉注射）：与溶媒组相比，ALT、AST、BUN或肌酐无显著变化[6] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1. 作用机制：- Enitociclib抑制CDK9/CycT1 (P-TEFb)，阻断RNAPII Ser2磷酸化和转录延伸。这选择性地下调对癌症生存至关重要的短半衰期癌蛋白（MYC、MCL1、BCL2），而不影响管家基因[3][5][6]
2. 治疗重点：- 已开发用于治疗血液系统恶性肿瘤（急性髓系白血病、MYC⁺淋巴瘤、多发性骨髓瘤）和实体瘤（结直肠癌、肺癌）；优先治疗MYC驱动或耐药（维奈托克耐药）的癌症[2][3][5][6] 3. 制剂原理：- 由于口服生物利用度低，选择静脉注射制剂（10% DMSO/40% PEG400/50%生理盐水）。每周给药方案得到了PK/PD数据的支持（药物浓度持续高于IC₅₀，且累积毒性极低）[3] 4. 专利及早期研发：- WO2014076091A1：公开了Enitociclib的化学结构（吡唑并嘧啶衍生物）及其初步的CDK9抑制活性[1] - Cancer Res 2017/AACR 2017：证实了其在AML异种移植模型中的疗效以及对P-TEFb的抑制作用[2][4] 5. 临床意义：- 在患者来源的MM细胞和骨转移模型中的疗效支持其治疗复发/难治性MM的潜力[6] - 在MYC⁺淋巴瘤模型中达到完全缓解，满足了MYC靶向治疗的未满足需求[5] |
| 分子式 |
C19H18F2N4O2S
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|---|---|
| 分子量 |
404.43
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| 精确质量 |
404.1119
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| 元素分析 |
C, 56.43; H, 4.49; F, 9.40; N, 13.85; O, 7.91; S, 7.93
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| CAS号 |
1610408-97-3
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| 相关CAS号 |
1610408-96-2 (R-isomer); 1610408-97-3 (S-isomer); 1610358-53-6; 1610358-56-9 (+); 1610358-59-2 (-); 1610368-59-6 (R-isomer HCl); 1610368-60-9 (S-isomer HCl);
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| PubChem CID |
139593425
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| 外观&性状 |
Typically exists as Off-white to yellow solids at room temperature
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| 密度 |
1.36±0.1 g/cm3(Predicted)
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| 沸点 |
494.2±55.0 °C(Predicted)
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| LogP |
4.2
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| tPSA |
96.3 Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
28
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| 分子复杂度/Complexity |
619
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
C1(=CC(OC)=C(C=C1)C1C=C(N=CC=1F)NC1N=CC=C(C=1)CS(=O)(C)=N)F
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| InChi Key |
YZCUMZWULWOUMD-NDEPHWFRSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C19H18F2N4O2S/c1-27-17-8-13(20)3-4-14(17)15-9-19(24-10-16(15)21)25-18-7-12(5-6-23-18)11-28(2,22)26/h3-10,22H,11H2,1-2H3,(H,23,24,25)/t28-/m0/s1
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| 化学名 |
(S)-((2-((5-fluoro-4-(4-fluoro-2-methoxyphenyl)pyridin-2-yl)amino)pyridin-4-yl)methyl)(imino)(methyl)-l6-sulfanone
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| 别名 |
BAY-1251152; Enitociclib; VIP152; BAY1251152; 1255AT22ZJ; BAY 1251152; UNII-1255AT22ZJ; BAY-1251152; VIP-152; ENITOCICLIB [INN]; ...; 1610408-97-3; VIP 152
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4726 mL | 12.3631 mL | 24.7262 mL | |
| 5 mM | 0.4945 mL | 2.4726 mL | 4.9452 mL | |
| 10 mM | 0.2473 mL | 1.2363 mL | 2.4726 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
4-(4-(4-(((3R,5R)-5-((1H-1,2,4-Triazol-1-yl)methyl)-5-(2,4-difluorophenyl)tetrahydrofuran-3-yl)methoxy)phenyl)piperazin-1-yl)phenyl)-2-((2S,3R)-2-hydroxypentan-3-yl)-2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazol-3-one
布罗曼坦
促肾上腺皮质激素释放激素
Trivehexin
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