Cyazofamid   中文名称: 氰霜唑

吸收、分布和排泄
在大鼠中，分别单次给予低剂量（0.5 mg/kg）或高剂量（1000 mg/kg）后，药代动力学和代谢研究表明，低剂量组吸收相对较快（tcmax = 0.25-0.5 小时，与剂量无关），消除也较快（t1/2 为 4.4-5.8 小时）；而高剂量组吸收饱和，消除时间延长（t1/2 为 7.6-11.6 小时）。吸收程度（以给药剂量的百分比表示）与剂量高度相关，低剂量组接近 75%，而高剂量组仅约为 5%。低剂量组的主要排泄途径为尿液和粪便，尿液中大部分放射性物质为一种名为 CCBA（4-(4-氯-2-氰基咪唑-5-基)苯甲酸）的代谢物。胆汁排泄实验结果显示，低剂量组放射性标记物的胆汁排泄量差异很大（约为给药剂量的12-39%），而高剂量组则可忽略不计（<2%）。高剂量组大鼠的尿液或胆汁排泄量均较低（均约为2%），其中大部分放射性为CCBA。无论给药方案如何，回收的粪便放射性物质大部分为未改变的母体化合物；主要的粪便代谢物为CCBA和4-氯-5-对甲苯咪唑-2-腈（CCIM），二者含量均低于给药剂量的5%。给药后168小时、1/2时间点、1/2时间点和168小时的组织负荷表明，放射性标记物清除迅速，组织负荷低，提示几乎没有生物蓄积或滞留。

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代谢/代谢物
在低剂量（0.5 mg/kg）下，尿液和粪便是大鼠体内主要的排泄途径，尿液中大部分放射性物质为一种名为 CCBA（4-(4-氯-2-氰基咪唑-5-基)苯甲酸）的代谢物。……无论给药方案如何，粪便中回收的大部分放射性物质均为未改变的母体化合物；主要的粪便代谢物为 CCBA 和 4-氯-5-对甲苯基咪唑-2-腈 (CCIM)，二者含量均低于给药剂量的 5%。尿液和粪便中的主要代谢物均已鉴定。未检测到苯基和咪唑取代基之间发生显著裂解的产物。低剂量给药后，大部分给药的放射性物质被吸收，但仍有 16% 至 20% 的给药放射性物质以未改变的活性成分 (ai) 的形式存在于粪便中。接受低剂量治疗的雄性动物尿液中标记物的排泄量高于粪便（约2:1），而雌性动物的尿液和粪便中标记物的比例约为1:1。这种差异可能反映了雌性动物通过胆汁排泄吸收物质的量高于雄性动物。高剂量组的吸收率极低，86-87%的给药标记物以未改变的形式存在于粪便中。所有已鉴定的代谢物均显示咪唑环上的N,N-二甲基磺酰胺基团发生水解裂解。剩余的取代基中，苯环上的甲基要么被氧化成羧酸（主要的尿液代谢物），要么与谷胱甘肽（GSH）结合并进一步修饰形成一系列代谢物。其中两种主要的代谢物是α-(甲亚磺酰基)-对甲苯基和α-(甲磺酰基)-对甲苯基衍生物，这两种衍生物主要存在于低剂量组雌性动物的尿液中。标记物从血液和其他组织中的清除速度很快。在低剂量组大鼠中，给药后0.5小时的峰值浓度与给药后5.5小时的下一次采样相比，通常下降约10倍。每组三只胆管插管大鼠（雌雄各半），分别灌胃给予低剂量或高剂量氰唑胺（0.5或1000 mg/kg）：苯基标记的((14)C-Bz)-IKF-916或咪唑标记的((14)C-Im)-IKF-916。尿液中唯一显著的峰值（雄性大鼠占给药剂量的50%，雌性大鼠占38%）是CCBA。低剂量插管大鼠粪便中的标记物几乎全部为母体氰唑胺。胆汁中氰唑胺的含量占给药剂量的12-22%（雄性大鼠）或29-39%（雌性大鼠）。胆汁的高效液相色谱图谱相当复杂，主要显示极性成分。研究人员在本文脚注中合理地得出结论，这些结构“主要为CCIM（4-氯-5-对甲苯咪唑-2-腈）谷胱甘肽结合物的分解代谢产物”。苯甲酸代谢物CCBA也是胆汁的重要组成部分（约占男性和女性给药剂量的4%）。经葡萄糖醛酸酶处理和酸化后，胆汁提取物的复杂高效液相色谱图谱逐渐简化为几个主要峰。经此处理后，低剂量男性胆汁的色谱图谱显示，胆汁中CHCN的含量占标记物的19%，CCBA的含量较处理前略有增加。CHCN是CCIM苯环上的甲基被氧化为羟甲基的产物。 CHCN 和 CCIM 共占所处理胆汁提取物的 46%，其余放射性标记物几乎全部存在于两个相对极性物质的峰中……由此可见，除了谷胱甘肽的结合作用外，胆汁产物与葡萄糖醛酸苷的结合也是一个重要的定量过程。核心代谢研究发现，CH3SO2-CCIM 和 CH3SO-CCIM（谷胱甘肽加成和后续修饰的两种产物）在未插管雌性大鼠的尿液中含量丰富；然而，本研究中无论雌雄，插管大鼠的尿液中除 CCBA 外均未检测到其他常见代谢物。这表明这两种代谢物是胆汁中的谷胱甘肽衍生物。有机腈在肝脏中经细胞色素 P450 酶的作用转化为氰离子。氰离子被迅速吸收并分布于全身。氰化物主要通过硫氰酸酶或3-巯基丙酮酸硫转移酶代谢为硫氰酸盐。氰化物代谢物经尿液排出。(L96)

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生物半衰期代谢/代谢物
在给大鼠单次给予低剂量（0.5 mg/kg）或高剂量（1,000 mg/kg）后进行的药代动力学和代谢研究表明，低剂量时吸收相对较快（tcmax = 0.25-0.5 小时，与剂量无关）且消除较快（t1/2 4.4-5.8 小时），而高剂量时吸收饱和且消除时间延长（t1/2 为 7.6-11.6 小时）。

毒性概要
毒理学概述。急性毒性：工业级氰唑菌胺在急性口服、皮肤和吸入试验中显示出轻微至中度的急性毒性，对眼睛和皮肤的刺激性极小，且是一种弱皮肤致敏剂。亚慢性毒性：在多种动物中重复给药后，氰唑菌胺似乎具有轻微或低毒性。雄性大鼠经13周的膳食喂养后，肾脏似乎是靶器官……其肾脏微观病变增加，表现为嗜碱性肾小管数量增多，程度为轻度，此外尿量、尿蛋白和尿pH值也略有增加。同一研究中的雌性大鼠敏感性较低；唯一的变化是尿量和尿pH值略有增加……慢性毒性：在为期18个月的致癌性研究中，雄性大鼠观察到皮肤病变，这可能是由全身性过敏反应引起的。在接近 1000 mg/kg/天的高剂量下，雄性小鼠因抓挠而出现脱毛，尸检证实其体表溃疡（头部、颈部、躯干、四肢和/或尾部）发生率增加，组织学检查显示其与棘层增厚（增生）、慢性活动性皮炎、溃疡和过早死亡的发生率增加相关。……氰唑胺在犬类中的总体毒性似乎有限。在为期 13 周和 1 年的犬类研究中，剂量高达 1000 mg/kg/天时均未发现重大毒性。唯一可能的影响是，在为期一年的研究中，高剂量组观察到雌雄犬甲状旁腺囊肿和雌性犬垂体囊肿增加。……致癌性：没有证据表明氰唑胺具有致癌性，大鼠和小鼠致癌性研究均表明了这一点。根据在大鼠和小鼠中均未发现致癌性证据，该物质被归类为不太可能对人类致癌。发育和生殖毒性：氰唑胺的产前和产后毒理学数据库包括大鼠和兔的发育毒性研究以及大鼠的两代生殖毒性研究。产前发育毒性研究表明，大鼠在子宫内暴露于该物质后，其易感性有所增加；高剂量组胎儿肋骨弯曲发生率增加被认为是不良反应……。在兔的产前发育毒性研究中，在最高剂量（1000 mg/kg/天）下，未观察到任何剂量对母体或发育的影响。在两代生殖毒性研究中，最高测试剂量（>1000 mg/kg/天）未引起母体全身毒性，也未引起生殖毒性或子代毒性。神经毒性：在急性神经毒性研究中，未发现与治疗相关的任何不良神经毒性表现，包括临床症状、定性或定量神经行为学影响、脑重量或肉眼/显微病理学改变。该机构认为，中剂量组和高剂量组雄性动物在第14天出现的轻微运动活性增加微乎其微，不应被视为不良反应。致突变性：根据多项体内和体外研究的阴性结果，氰唑胺似乎不具有致突变性。
有机腈在体内和体外均可分解为氰离子。因此，有机腈的主要毒性机制是产生有毒的氰离子或氰化氢。氰化物是电子传递链第四复合物（位于真核细胞线粒体膜上）中细胞色素c氧化酶的抑制剂。它与该酶中的三价铁原子形成复合物。氰化物与这种细胞色素的结合会阻止电子从细胞色素c氧化酶传递到氧气。结果，电子传递链被破坏，细胞无法再进行有氧呼吸产生ATP供能。主要依赖有氧呼吸的组织，例如中枢神经系统和心脏，受到的影响尤为严重。氰化物还可通过与过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、高铁血红蛋白、羟钴胺素、磷酸酶、酪氨酸酶、抗坏血酸氧化酶、黄嘌呤氧化酶、琥珀酸脱氢酶和铜/锌超氧化物歧化酶结合而产生一些毒性作用。氰化物与高铁血红蛋白的铁离子结合形成无活性的氰化高铁血红蛋白。(L97)

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非人类毒性值
大鼠口服LD50 >5,000 mg/kg
大鼠皮肤给药LD50 >2,000 mg/kg

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毒性数据
LC50（大鼠）>5,500 mg/m3

[1]. Interactions between cyazofamid and human drug transporters. J Biochem Mol Toxicol. 2020 Apr;34(4):e22459.

[2]. Biological properties of the novel fungicide cyazofamid against Phytophthora infestans on tomato and Pseudoperonospora cubensis on cucumber. Pest Manag Sci. 2002 Feb;58(2):139-45.

[3]. "Antifungal activity of the novel fungicide cyazofamid against Phytophthora infestans and other plant pathogenic fungi in vitro." Pesticide biochemistry and physiology 70.2 (2001): 92-99.

氰唑菌胺是一种咪唑类化合物，其1、2、4和5位分别带有二甲基磺酰胺基、氰基、氯基和4-甲苯基取代基。它是一种主要用于防治马铃薯和番茄卵菌病和根腐病的杀菌剂。氰唑菌胺对皮肤和眼睛有刺激性，对鸟类、大多数水生生物、蜜蜂和蚯蚓有中等毒性。它是一种线粒体细胞色素bc1复合物抑制剂和抗真菌农药。氰唑菌胺是一种腈类化合物，属于咪唑类、有机氯化合物、磺酰胺类、磺酰胺类杀菌剂和咪唑类杀菌剂。其作用机制是通过抑制叶面和土壤活性，并具有一定的残留活性和呼吸抑制作用。它水溶性低，不易渗入地下水，且不挥发。它在土壤或水生系统中不持久存在。虽然它对哺乳动物毒性较低，但人们对其生物累积性仍存在一些担忧。它对皮肤和眼睛有刺激性。它对鸟类、大多数水生生物、蜜蜂和蚯蚓具有中等毒性。
一种杀菌剂；结构见第一来源

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作用机制
为了阐明氰唑菌胺高选择性杀菌活性的背景……我们研究了该杀菌剂在目标菌种棘腐霉（Pythium spinosum）中的生化作用模式。氰唑菌胺在含明胶的琼脂培养基、水琼脂培养基和马铃薯葡萄糖琼脂培养基上均能以约1 μM的浓度抑制棘腐霉菌丝的生长。在水杨酰羟肟酸（SHAM，一种线粒体替代氧化酶抑制剂）存在的情况下，菌丝生长抑制作用显著增强。用4 μM氰唑菌胺处理棘腐霉菌丝后，其耗氧量降低了约60%。处理60分钟后，耗氧量恢复，但呼吸作用对氰化钾具有抗性，对SHAM敏感。
通过对棘孢霉（P. spinosum）线粒体电子传递活性的氰唑菌胺研究发现，该杀菌剂特异性地干扰细胞色素bc1复合物（复合物III）的活性（I50：0.04 μM）。然而，氰唑菌胺对从其他生物来源（如灰葡萄孢菌、酿酒酵母、大鼠肝脏和马铃薯块茎）分离的线粒体中的复合物III活性没有抑制作用。因此，氰唑菌胺的高选择性活性似乎是由于靶酶对抑制剂的敏感性差异所致。为了确定氰唑菌胺在复合物III中的结合位点，我们利用棘孢霉线粒体研究了细胞色素b血红素的还原动力学。结果表明，添加氰唑菌胺后，细胞色素b血红素立即被还原，且还原程度高于未添加氰唑菌胺的情况。氰唑菌胺和嘧菌酯（Qo中心抑制剂）联合使用可显著抑制β血红素的还原。这些结果表明，氰唑菌胺与复合物III的Qi中心结合。据报道，氰唑菌胺抑制复合物III，但作用于Qi位点（抗霉素位点），这与其他近期作用于Qo位点的复合物III杀菌抑制剂不同。据称，氰唑菌胺对卵菌线粒体的抑制作用具有特异性。

C13H13CLN4O2S

324.79

324.045

120116-88-3

9862076

White to off-white solid powder

1.4±0.1 g/cm3

498.2±37.0 °C at 760 mmHg

152.7 °C

255.1±26.5 °C

0.0±1.3 mmHg at 25°C

1.634

1.75

87.37

0

5

3

21

516

0

CC1=CC=C(C=C1)C2=C(Cl)N=C(C#N)N2S(=O)(=O)N(C)C

YXKMMRDKEKCERS-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C13H13ClN4O2S/c1-9-4-6-10(7-5-9)12-13(14)16-11(8-15)18(12)21(19,20)17(2)3/h4-7H,1-3H3

4-chloro-2-cyano-N,N-dimethyl-5-(4-methylphenyl)imidazole-1-sulfonamide

Cyazofamid; IKF-916

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。