| 靶点 |
The molecular target of (1R,9S)-Dxd is topoisomerase I (Top1), a nuclear enzyme that relieves torsional stress in DNA during replication and transcription. As a camptothecin analog, (1R,9S)-Dxd stabilizes the cleavable complex formed between topoisomerase I and DNA, preventing religation. This results in the accumulation of persistent DNA single-strand breaks that are converted to double-strand breaks during S-phase, ultimately leading to replication fork collapse, DNA damage, cell cycle arrest in G2/M phase, and apoptosis. The (1R,9S) stereochemistry influences the stability and potency of the compound. (1R,9S)-Dxd is structurally optimized for ADCs, possessing a linker attachment site for conjugation to monoclonal antibodies.
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| 体外研究 (In Vitro) |
ADC 由抗体和 ADC 细胞毒素通过 ADC 连接子连接而成。
作为抗体药物偶联物（ADC）的有效载荷，(1R,9S)-Dxd 不以游离药物的形式进行标准体外细胞毒性试验。其母体化合物 DXd（依沙替康衍生物）是一种强效的拓扑异构酶 I 抑制剂，对多种人类癌细胞系（例如乳腺癌、肺癌、卵巢癌、胃癌）的 IC₅0 值通常在低纳摩尔至亚纳摩尔范围内。当通过可裂解或不可裂解的连接子与抗体偶联时，ADC 会被靶癌细胞内化，有效载荷被释放，从而导致选择性细胞杀伤。如果对游离的 (1R,9S)-Dxd 进行测试，它将表现出强效的抗增殖活性，其 IC₅0 值与 DXd 相当（例如 0.1-5 nM）。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，以(1R,9S)-Dxd为有效载荷的抗体药物偶联物(ADC)在多种癌症的异种移植小鼠模型中展现出强大的抗肿瘤疗效。例如，将抗HER2 ADC与(1R,9S)-Dxd（通过蛋白酶可切割的连接子）偶联，静脉注射（例如，1-10 mg/kg，单次给药或每周一次，持续2-3周）后，可在HER2阳性乳腺癌和胃癌异种移植模型中诱导持久的肿瘤消退，甚至达到完全缓解。该化合物是某些ADC（例如，DS-8201a/曲妥珠单抗德鲁替康）的活性代谢物，在ADC内化和溶酶体降解后释放到细胞内。旁观者效应（有效载荷扩散至邻近的抗原阴性细胞）有助于其在异质性肿瘤中的疗效。 (1R,9S)-Dxd 是临床阶段 ADC 的关键组成部分。
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| 酶活实验 |
体外拓扑异构酶I活性通常采用DNA松弛试验进行测定。将纯化的人类拓扑异构酶I（0.5-1 U）与0.5 ug超螺旋pBR322 DNA以及不同浓度的(1R,9S)-Dxd（或释放的有效载荷，0.001-1000 nM）在反应缓冲液（10 mM Tris-HCl pH 7.5、50 mM KCl、5 mM MgCl2、0.1 mM EDTA、15 ug/mL BSA）中于37℃孵育15-30分钟。反应用0.5% SDS终止。DNA产物经琼脂糖凝胶电泳分离，并用溴化乙锭染色显影。IC₅0是抑制50% DNA松弛所需的浓度，通过密度扫描法定量。由于 (1R,9S)-Dxd 是一种稳定的异构体，可以直接使用 LC-MS/MS 对其进行纯度测试。
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| 细胞实验 |
细胞毒性试验采用两步抗体药物偶联物（ADC）机制。对于游离有效载荷，将癌细胞（例如，SK-BR-3乳腺癌细胞、NCI-N87胃癌细胞）接种于96孔板（5000个细胞/孔），培养基为含10%胎牛血清（FBS）的RPMI-1640，并过夜培养。加入(1R,9S)-Dxd（0.01-1000 nM），继续培养72-120小时。采用MTT或CellTiter-Glo法检测细胞活力。根据剂量反应曲线计算IC₅0值。对于ADC评估，使用靶点阳性细胞和靶点阴性细胞来评估选择性。加入不同浓度（0.001-10 ug/mL）的ADC，培养96-120小时。计算选择性指数（靶标阳性细胞的EC₅0/靶标阴性细胞的EC₅0）。通过caspase-3/7活性检测确认细胞凋亡。
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| 动物实验 |
体内异种移植模型：将5×10⁶个靶向阳性癌细胞（例如，SK-BR-3 HER2阳性乳腺癌细胞）皮下接种于6-8周龄的雌性BALB/c裸鼠体内，接种液为0.1 mL PBS/Matrigel（1:1）。当肿瘤体积达到约100-150 mm³时，将小鼠随机分组（每组n=6-8）。将基于(1R,9S)-Dxd的抗体偶联药物（ADC）配制于含5%蔗糖的10 mM组氨酸缓冲液（pH 5.5）中，并以1-10 mg/kg的剂量每周一次经尾静脉注射给药，持续2-3周。对照组仅注射载体或未偶联抗体。每2-3天用游标卡尺测量肿瘤体积（体积=长×宽²/2）。监测体重变化以评估毒性反应。在研究终点，切除肿瘤组织，称重，并进行组织病理学（H&E染色）和免疫组织化学（Ki-67用于增殖，cleaved caspase-3用于凋亡）分析。采用Kaplan-Meier分析监测生存期。(1R,9S)-Dxd基抗体药物偶联物(ADC)表现出强效的肿瘤生长抑制作用。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
(1R,9S)-Dxd 不以游离药物形式给药。抗体药物偶联物 (ADC)（例如曲妥珠单抗德鲁替康）的药代动力学由抗体部分决定。ADC 具有较长的血浆半衰期（人体内 3-7 天，啮齿动物体内 1-3 天）。全身给药后，ADC 通过增强的渗透性和滞留性 (EPR) 效应以及主动靶向（如果抗体靶向肿瘤抗原）分布到肿瘤组织。进入靶细胞后，连接子被（组织蛋白酶或其他蛋白酶）切割，释放出 (1R,9S)-Dxd。释放的有效载荷半衰期短（< 24 小时），并通过肾脏排泄清除。该有效载荷是外排转运蛋白（P-gp、BCRP）的底物，但其效力得以保留。用于研究的 (1R,9S)-Dxd 应以粉末形式储存在 -20℃ 下，避光防潮。该化合物可溶于DMSO（20-50 mM）。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
对于 (1R,9S)-Dxd，GHS 危险说明：H302（吞咽有害），H315（造成皮肤刺激），H319（造成严重眼刺激），H335（可能造成呼吸道刺激），H350（可能致癌）。信号词：危险。预防措施：P201（使用前请获取特殊说明），P280（佩戴防护手套/防护服/护目镜/面罩），P301+P312（如吞咽：如果感到不适，请立即致电中毒控制中心/就医），P305+P351+P338（如进入眼睛：用水小心冲洗几分钟）。该化合物是拓扑异构酶 I 抑制剂，具有潜在的遗传毒性；请在通风橱内佩戴适当的个人防护装备 (PPE) 并极其小心地操作。不可食用。储存：粉末在-20℃下可保存3年，在4℃下可保存2年；溶剂在-80℃下可保存1年。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
(1R,9S)-Dxd（CAS号：2766786-58-5）是一种研究级抗体药物偶联物（ADC）有效载荷（拓扑异构酶I抑制剂）。它并非FDA批准的独立用药；它是正在进行临床开发的ADC（例如，曲妥珠单抗德鲁替康、DS-8201a）的化学成分。该化合物可用作抗体药物偶联物合成的结构单元，以及ADC研究的参考标准。(1R,9S)-Dxd也是DXd的异构体，可用于构效关系（SAR）研究。仅供研究使用，不得用于诊断或治疗用途。
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| 分子式 |
C26H24FN3O6
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|---|---|
| 分子量 |
493.48
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| CAS号 |
2766786-58-5
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| 相关CAS号 |
Exatecan mesylate dihydrate; 197720-53-9
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~202.64 mM; with sonication)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0264 mL | 10.1321 mL | 20.2642 mL | |
| 5 mM | 0.4053 mL | 2.0264 mL | 4.0528 mL | |
| 10 mM | 0.2026 mL | 1.0132 mL | 2.0264 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Cyanine7 amine
Basivarsen
ADEP-14
Zarutatug
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