3-Hydroxyindole

目录号: V109452
3-羟基吲哚是一种具有抗氧化活性的羟基吲哚化合物,可抑制DPPH和藏红花素的清除。
3-Hydroxyindole CAS号: 480-93-3
产品类别: Ferroptosis
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
3-羟基吲哚是一种具有抗氧化活性的羟基吲哚化合物,可抑制DPPH和藏红花素的清除。3-羟基吲哚也可用作铁死亡抑制剂。
3-羟基吲哚(Indoxyl;Indol-3-ol;CAS号:480-93-3;C8H7NO;分子量:133.15)是一种杂环芳香化合物,是吲哚的羟基化衍生物,为白色至淡黄色固体。它是一种强效的铁死亡抑制剂,并具有抗氧化活性。3-羟基吲哚是研究氧化应激、细胞死亡(铁死亡)以及作为显色试剂检测肾功能(Jaffe试验,尽管该试验使用的试剂是肌酐,而非3-羟基吲哚)的常用研究标准品。此外,它也是一种细菌代谢产物,并可能是一种尿毒症毒素。
生物活性&实验参考方法
靶点
3-Hydroxyindole is a potent inhibitor of ferroptosis, a form of regulated cell death driven by iron-dependent lipid peroxidation. The mechanism involves the scavenging of lipid peroxyl radicals (LOO·), breaking the chain reaction of lipid peroxidation. It acts as a radical-trapping antioxidant (RTA). It also exhibits antioxidant activity by scavenging free radicals such as DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) and crocin. It may also act as a mild uncoupler of mitochondrial oxidative phosphorylation. It does not have a single protein target but acts as a redox-active compound. It is also a substrate for cytochrome P450 enzymes and a potential uremic toxin that accumulates in patients with chronic kidney disease (CKD).
体外研究 (In Vitro)
体外实验表明,3-羟基吲哚是一种强效的铁死亡抑制剂。在以人包皮成纤维细胞(BJ-5ta)为模型的细胞实验中,用铁死亡诱导剂RSL3(500 nM)处理细胞后,3-羟基吲哚(1-50 uM)能以浓度依赖的方式显著抑制细胞死亡。其抑制铁死亡的EC₅0值在低微摩尔范围内(约5 uM)。在某些细胞系中,其抑制铁死亡的效力高于经典的铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)。此外,它还能抑制DPPH和藏红花素的清除,表现出抗氧化活性。在无细胞体系中,它能减少暴露于亚铁离子的脂质体中脂质过氧化物的生成。低浓度(< 50 uM)下,该物质对正常人成纤维细胞无细胞毒性。它还能促进原代人角质形成细胞的生长。高浓度(> 200 uM)下,该物质是一种尿毒症毒素,可导致肾小管上皮细胞毒性。
体内研究 (In Vivo)
3-羟基吲哚并非药物,而是色氨酸在肠道内的代谢产物。在体内,它是吲哚硫酸盐的前体,而吲哚硫酸盐是一种已知的尿毒症毒素,会在慢性肾脏病(CKD)患者的血液中蓄积。血液中3-羟基吲哚的浓度与肾功能相关。它也是肌酐Jaffe试验显色反应的成分之一,尽管主要反应物是苦味酸。3-羟基吲哚目前没有临床应用。然而,由于其具有抑制铁死亡的能力,目前正在研究其作为缺血再灌注损伤(例如肾脏、心脏)小鼠模型潜在治疗药物的潜力。在肾脏缺血再灌注损伤的小鼠模型中,腹腔注射3-羟基吲哚(10-50 mg/kg)可显著降低血清肌酐水平和脂质过氧化标志物(丙二醛,MDA)。
酶活实验
采用DPPH自由基清除法测定3-羟基吲哚的抗氧化活性。配制0.1 mM的DPPH甲醇溶液。将3-羟基吲哚溶于DMSO,并用甲醇稀释至1-500 uM的浓度范围。取1 mL待测化合物溶液与1 mL DPPH溶液混合,于室温避光孵育30 min。使用紫外-可见分光光度计在517 nm处测定吸光度。DPPH清除率计算公式为:[(A_control - A_sample)/A_control] × 100%。IC₅0值(清除50% DPPH自由基所需的浓度)由剂量-反应曲线计算得出。Trolox(一种维生素E类似物)用作阳性对照。脂质过氧化抑制活性通过硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)测定法进行测定。
细胞实验
细胞铁死亡抑制实验:将人包皮成纤维细胞(BJ-5ta)接种于96孔板(1×10⁴个细胞/孔),培养基为含10%胎牛血清的DMEM,并过夜培养。细胞用3-羟基吲哚(0.1-50 uM)预处理1小时。然后加入铁死亡诱导剂RSL3(500 nM)。24小时后,采用MTT法检测细胞活力,并计算细胞死亡百分比。使用阳性对照(ferrostatin-1,1 uM)。脂质过氧化检测:用C11-BODIPY 581/591探针(2.5 uM)染色细胞30分钟。通过流式细胞术检测荧光强度从红色(590 nm)到绿色(510 nm)的转变。 3-羟基吲哚(10 uM)应能阻止 RSL3 引起的荧光偏移。
动物实验
肾脏缺血再灌注(I/R)损伤小鼠模型:雄性C57BL/6小鼠(8-10周龄,20-25 g,每组n=8)麻醉后,夹闭肾蒂30-45分钟,然后解除夹闭以恢复肾灌注。将3-羟基吲哚配制成10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween 80 + 45%生理盐水溶液,并在缺血发生前30分钟腹腔注射(IP)10-50 mg/kg。对照组仅注射溶剂。再灌注后24-48小时,处死小鼠,采集血液样本用于测定血清肌酐(SCr)和血尿素氮(BUN)。采集肾脏组织用于组织学检查(苏木精-伊红染色)和丙二醛(MDA)水平测定(MDA是脂质过氧化的标志物)。3-羟基吲哚治疗应能降低血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)和MDA水平。本方案用于急性肾损伤的研究。
药代性质 (ADME/PK)
3-羟基吲哚(分子量 133.15,LogP 2.2)是一种小分子亲脂性化合物。它并非药物,其药代动力学尚未针对治疗应用进行研究。它是一种尿毒症毒素。在人体内,它由肠道菌群利用色氨酸合成。它被吸收进入门静脉循环,并在肝脏中与吲哚硫酸盐结合,最终随尿液排出体外。由于其代谢迅速,游离的3-羟基吲哚在血浆中的半衰期极短(数分钟)。用于研究时,它以固体形式储存在-20℃。它可溶于二甲基亚砜(DMSO)和乙醇(溶解度约为10 mM)。它对光和空气敏感。该化合物是分析化学的研究标准品。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
3-羟基吲哚的危险说明:H315(造成皮肤刺激),H319(造成严重眼刺激),H335(可能造成呼吸道刺激)。信号词:警告。预防措施:P261(避免吸入粉尘/烟雾/气体/喷雾),P280(佩戴防护手套/防护服/护目镜/面罩),P305+P351+P338(如不慎入眼:立即用清水小心冲洗几分钟)。该化合物可能导致皮肤变色。仅供研究使用。
参考文献

[1]. Céspedes CL, Alarcon J, Valdez-Morales M, Paredes-López O. Antioxidant activity of an unusual 3-hydroxyindole derivative isolated from fruits of Aristotelia chilensis (Molina) Stuntz. Z Naturforsch C J Biosci. 2009;64(9-10):759-762.

[2]. Jakaria M, Cannon JR. The role of hydroxyindoles in protecting neuronal cultures from ferroptosis. Cell Death Discov. 2025;11(1):329. Published 2025 Jul 16. doi:10.1038/s41420-025-02608-4

其他信息
3-羟基吲哚(Indoxyl;吲哚-3-醇;CAS号:480-93-3)是一种研究级吲哚衍生物,未经FDA批准。它可用作铁死亡检测的阳性对照、抗氧化剂参考标准品以及尿毒症毒素和色氨酸代谢分析的代谢物标准品。仅供研究使用,不得用于诊断或治疗用途。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C8H7NO
分子量
133.15
精确质量
133.053
CAS号
480-93-3
PubChem CID
50591
外观&性状
Solid powder
tPSA
36
氢键供体(HBD)数目
2
可旋转键数目(RBC)
0
重原子数目
10
分子复杂度/Complexity
126
定义原子立体中心数目
0
SMILES
C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)O
InChi Key
PCKPVGOLPKLUHR-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C8H7NO/c10-8-5-9-7-4-2-1-3-6(7)8/h1-5,9-10H
化学名
1H-indol-3-ol
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Note: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气下),避免暴露在潮湿环境中。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 7.5103 mL 37.5516 mL 75.1033 mL
5 mM 1.5021 mL 7.5103 mL 15.0207 mL
10 mM 0.7510 mL 3.7552 mL 7.5103 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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