| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
(1R)-BMS-986408 directly binds to and inhibits diacylglycerol kinase alpha (DGKalpha) and diacylglycerol kinase zeta (DGKzeta) with high selectivity. DGKalpha and DGKzeta are negative regulators of T-cell receptor (TCR) signaling that convert diacylglycerol (DAG) to phosphatidic acid (PA). Inhibition of DGKalpha/zeta results in accumulation of DAG, which activates downstream RasGRP1-Ras-ERK signaling and protein kinase C (PKC) pathways, leading to enhanced T-cell proliferation, cytokine production, and cytotoxic activity. This compound restores T-cell-mediated anti-tumor immunity.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在以原代人T细胞或T细胞系为基础的细胞实验中，(1R)-BMS-986408可增强TCR刺激（抗CD3/CD28）后的T细胞活化。浓度为0.1-10 microM的(1R)-BMS-986408处理可增加IL-2和IFN-γ的产生，该结果通过ELISA检测。CFSE稀释或3H-胸苷掺入实验表明，T细胞增殖得到增强。加入化合物后30分钟内，磷酸化ERK水平升高2-3倍。该化合物还可增强CD8+ T细胞在共培养实验中对肿瘤细胞的细胞毒活性。根据实验方法的不同，T细胞活化增强的EC50值通常在低纳摩尔至微摩尔范围内。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在同源小鼠肿瘤模型中，每日一次或两次口服10-50 mg/kg的(1R)-BMS-986408可增强肿瘤内T细胞的浸润和活化。在MC38结肠腺癌和CT26结肠癌等模型中观察到肿瘤生长抑制(TGI)。与抗PD-1或抗CTLA-4免疫检查点抑制剂联合使用可提高抗肿瘤疗效，优于单药治疗。组织学分析显示肿瘤微环境中颗粒酶B阳性CD8+ T细胞增多，调节性T细胞减少。在某些模型中观察到持久的肿瘤消退。在有效剂量下未观察到明显的体重减轻或全身毒性。
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| 酶活实验 |
采用磷酸酶偶联的DGK活性测定法测定DGKα酶活性。将重组人DGKα酶（10 nM）与不同浓度的(1R)-BMS-986408（0.1-1000 nM）在室温下于20 mM HEPES（pH 7.4）、100 mM NaCl、5 mM MgCl2、1 mM DTT和0.05% Triton X-100缓冲液中孵育。预孵育20分钟后，加入100 uM DAG（溶于0.5 mg/mL Triton X-100）和1 mM ATP启动反应。60分钟后，加入孔雀绿试剂终止反应，并在620 nm处测定吸光度。IC₅0值通过非线性回归计算。DGKζ的测定采用相同的方案。在 10 uM 化合物浓度下，使用一组人类激酶（≥50 种激酶）评估其选择性。结合亲和力通过表面等离子共振（SPR）法测定，所用激酶为固定化的 DGKα 蛋白。
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| 细胞实验 |
将 Jurkat T 细胞（5×10⁵ 个细胞/mL）用 (1R)-BMS-986408 (0.01-10 uM) 或 DMSO 处理 2 小时。然后用包被于培养板上的抗 CD3 抗体 (1 ug/mL) 和可溶性抗 CD28 抗体 (0.5 ug/mL) 刺激细胞 5-30 分钟。收集细胞裂解液，并通过 Western blot 分析 p-ERK、p-AKT 和 p-PKC 的表达。对于细胞因子分析，通过阴性选择从健康供体外周血单核细胞 (PBMC) 中纯化原代人 CD3⁺ T 细胞。将细胞（1×10⁵ 个细胞/孔）用 (1R)-BMS-986408 (0.1-10 uM) 处理 30 分钟，然后用包被抗 CD3/CD28 抗体的磁珠刺激 48 小时。收集上清液，并用ELISA法检测IL-2、IFN-γ和TNF-α的含量。对于增殖实验，用CFSE标记的T细胞进行类似处理，96小时后用流式细胞术分析CFSE的稀释情况。
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| 动物实验 |
将5×10⁵个MC38肿瘤细胞皮下接种于6-8周龄、18-22克重的雌性C57BL/6小鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到约100 mm³（第7-10天）时，将小鼠随机分为治疗组（n=8-10）。(1R)-BMS-986408配制于0.5%甲基纤维素或5% DMSO/5% Kolliphor EL/90% PBS溶液中。小鼠每日口服给药一次或两次，剂量为10-50 mg/kg，持续14-21天。对照组给予溶剂。每周两次用游标卡尺测量肿瘤体积。为进行药代动力学/药效学分析，分别于给药后2、6、12和24小时采集血浆和肿瘤组织样本。肿瘤样本经流式细胞术（检测CD8+、CD4+ T细胞浸润、活化标志物CD44、CD69、颗粒酶B）、qPCR（检测Ifng、Il2、Gzmb、Prf1）和免疫组织化学（检测切割型caspase-3）处理。每日记录体重，并采集血清进行临床化学分析。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
在临床前药代动力学研究中，(1R)-BMS-986408 在啮齿动物中表现出良好的口服生物利用度（F% = 50-80%）。口服给药（10 mg/kg）后，血药浓度峰值（Cmax）在 0.5-2 小时内达到，末端半衰期为 3-6 小时，清除率较低至中等。在小鼠和人血浆中，血浆蛋白结合率均 >90%。该化合物主要通过 CYP3A4 代谢。脑渗透性中等，与一定的中枢神经系统活性相符。AUC 和 Cmax 在 5-50 mg/kg 剂量范围内呈剂量比例关系。组织分布研究表明，该化合物在淋巴器官（脾脏、淋巴结）和肿瘤组织中蓄积。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在临床前安全性研究中，(1R)-BMS-986408 耐受性良好，具有良好的安全范围。在大鼠和小鼠中，无观察到不良反应剂量 (NOAEL) 为 >50 mg/kg。在有效剂量下，未观察到体重、食物消耗量或临床症状的显著变化。hERG 检测未观察到 QTc 间期延长（IC50 >30 μM）。Ames 试验未观察到遗传毒性。在高剂量 (>200 mg/kg) 下观察到轻微的短暂性肝酶升高。未报告免疫毒性或细胞因子释放综合征。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
(1R)-BMS-986408 的 CAS 编号为 2618418-11-2，分子式为 C27H31F3N6O，分子量为 512.57。1R 构型表示手性中心的特定立体化学构型。该化合物以粉末形式储存于 -20℃，避光保存。用于体内研究时，在 4℃ 下，该化合物在甲基纤维素悬浮液中可稳定保存长达 7 天。
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| 分子式 |
C27H31F3N6O
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|---|---|
| 分子量 |
512.57
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| CAS号 |
2618418-11-2
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| 相关CAS号 |
BMS-986408
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9510 mL | 9.7548 mL | 19.5095 mL | |
| 5 mM | 0.3902 mL | 1.9510 mL | 3.9019 mL | |
| 10 mM | 0.1951 mL | 0.9755 mL | 1.9510 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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