| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
(+/-)-Stachydrine targets the nuclear factor kappa-B (NF-kappaB) signaling pathway, a central mediator of inflammatory responses. Stachydrine inhibits the activation of NF-kappaB by preventing the degradation of IkappaBalpha (inhibitor of kappaBalpha) and thereby reducing the nuclear translocation of p65 subunit. Downstream, this leads to decreased expression of pro-inflammatory cytokines such as TNF-alpha, IL-1beta, IL-6, and iNOS. Stachydrine also exhibits cardioprotective effects by activating PI3K/Akt/eNOS pathway, leading to increased nitric oxide (NO) production. The racemic (+/-)-form is commonly used, and both enantiomers may contribute to activity. Stachydrine is the main active constituent of Motherwort (Leonurus japonicus), traditionally used for cardiovascular disorders. It is also an endogenous metabolite, as betaines are found in various tissues.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，(+/-)-水苏碱在多种细胞模型中均表现出抗炎活性。在脂多糖 (LPS) 激活的 RAW 264.7 巨噬细胞中，水苏碱 (10-200 microM) 处理可降低 NO 的生成（通过 Griess 试剂测定）并减少促炎细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）（通过 ELISA 测定）。NO 抑制的 IC50 值约为 50-100 microM。Western blot 分析显示，水苏碱以浓度依赖的方式降低 iNOS 和 COX-2 蛋白的表达。此外，它还能抑制 IκBα 的磷酸化和降解以及 p65 的核转位，证实了其对 NF-κB 的抑制作用。在暴露于缺氧/复氧条件下的H9c2心肌细胞中，水苏碱（10-100 microM）可降低乳酸脱氢酶（LDH）的释放并提高细胞活力（MTT法）。它能激活Akt（Ser473位点磷酸化）和内皮型一氧化氮合酶（eNOS，Ser1177位点磷酸化）。在心脏成纤维细胞中，水苏碱（10-200 microM）可抑制TGF-β1诱导的胶原合成（Sircol法），并降低α-SMA的表达。在这些细胞类型中，浓度高达200 microM时，该化合物无细胞毒性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，(+/-)-水苏碱已在心血管疾病和炎症的动物模型中展现出保护作用。在大鼠心肌缺血再灌注（I/R）损伤模型（左前降支冠状动脉闭塞30分钟，随后进行2小时再灌注）中，水苏碱（50、100、200 mg/kg，缺血前30分钟静脉或腹腔注射）可缩小梗死面积（TTC染色），降低血清CK-MB和LDH水平，并改善心脏功能（超声心动图测量射血分数）。这种心脏保护作用与细胞凋亡减少（TUNEL染色）、氧化应激降低（MDA、SOD染色）以及PI3K/Akt/eNOS信号通路激活有关。在LPS诱导的小鼠脓毒症模型（腹腔注射LPS，10 mg/kg）中，水苏碱（腹腔注射LPS前1小时，50-200 mg/kg）可降低血清中TNF-α、IL-6和IL-1β的水平，并提高存活率（72小时时从20%提高到60%）。在压力负荷诱导的大鼠心脏肥大模型（横向主动脉缩窄术，TAC）中，水苏碱（口服，100 mg/kg/天，持续4周）可降低心脏重量/体重比值，减少心肌细胞横截面积，并减轻心肌纤维化（天狼星红染色）。该化合物在这些剂量下耐受性良好，未观察到毒性。
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| 酶活实验 |
不适用：(+/-)-水苏碱是一种生物碱，但无细胞酶抑制试验并非该化合物的标准检测方法。通常通过基于细胞的信号传导试验来研究其作用机制。然而，为了进行筛选，可以使用一种假设的NF-κB DNA结合ELISA方法。将LPS处理的RAW 264.7细胞的活化核提取物与生物素标记的NF-κB共识寡核苷酸在96孔链霉亲和素包被的板中孵育。加入水苏碱（0.1-1000 uM），用抗p65抗体检测结合的p65，随后用HRP标记的二抗进行检测。这种无细胞试验可以测量水苏碱对NF-κB-DNA结合的影响，但目前尚无相关文献数据。因此，主要的检测指标是细胞水平的。或者，可以进行脯氨酰羟化酶抑制试验（因为水苏碱是脯氨酸类似物），但这并非已知的靶点。需要说明的是，目前尚无针对该化合物的标准无细胞结合试验。请使用下文所述的细胞试验来表征其生物活性。由于水苏碱是一种小的亲水性分子，在无细胞体系中未经代谢可能无法直接与纯化蛋白结合，因此细胞试验对水苏碱更为适用。
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| 细胞实验 |
在细胞抗炎活性检测中，RAW 264.7 巨噬细胞（或原代腹腔巨噬细胞）培养于含 10% FBS 的 DMEM 培养基中。细胞接种于 24 孔板（2 × 10⁵ 个细胞/孔）或 96 孔板（1 × 10⁴ 个细胞/孔）。24 小时后，细胞用 (+/-)-水苏碱（10-200 uM）预孵育 1-2 小时，然后用脂多糖（LPS，1 ug/mL，大肠杆菌 O111:B4）刺激 24 小时。为了定量测定NO，将100 uL细胞培养上清液与100 uL Griess试剂（1%磺胺、0.1% N-(1-萘基)乙二胺二盐酸盐溶于5%磷酸）混合于96孔板中，并在540 nm处测定吸光度。亚硝酸盐浓度使用亚硝酸钠标准曲线测定。为了测定细胞因子，收集上清液并使用商业化的ELISA试剂盒（TNF-α、IL-6、IL-1β）进行分析。对于蛋白质印迹分析，刺激6-24小时后，用RIPA裂解缓冲液裂解细胞。蛋白质经SDS-PAGE分离后转移至PVDF膜。所用抗体：抗iNOS抗体、抗COX-2抗体、抗磷酸化IκBα（Ser32）抗体、抗IκBα抗体、抗NF-κB p65抗体和抗β-肌动蛋白抗体。核转位实验中，使用商业试剂盒制备核提取物和胞质提取物。另一种方法是免疫荧光法：将生长在盖玻片上的细胞用4%多聚甲醛固定，用0.1% Triton X-100透化，然后用抗p65抗体染色，再用Alexa Fluor 488二抗染色。细胞核用DAPI染色。通过共聚焦显微镜观察定位。水苏碱可降低p65的核转位。为检测细胞活力，在平行板上进行MTT实验；水苏碱浓度高达200 uM时未显示细胞毒性。这些实验是评估抗炎药物的标准方法。
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| 动物实验 |
对于体内心肌缺血再灌注模型，雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）用戊巴比妥钠（50 mg/kg，腹腔注射）或异氟烷麻醉。行左侧开胸术，用丝线结扎左前降支（LAD）冠状动脉30分钟（缺血），然后松开结扎线2小时（再灌注）。将(+/-)-水苏碱溶于生理盐水（用于腹腔注射），在缺血前30分钟以50、100或200 mg/kg的剂量腹腔注射。对照组大鼠注射生理盐水。再灌注结束后，采集血液样本，用于测定血清CK-MB和LDH（酶法）。取出心脏，并将左心室切成2 mm厚的切片。将组织切片置于 1% TTC（2,3,5-氯化三苯基四氮唑）溶液中，于 37℃ 孵育 15 分钟。采用面积测量法测量梗死面积（淡白色）和危险区域（红色）。梗死面积以占危险区域的百分比表示。为评估心脏功能，部分大鼠在缺血前和再灌注后接受经胸超声心动图检查，以测量射血分数 (EF) 和短轴缩短率 (FS)。水苏碱可缩小梗死面积（从对照组的约 50% 降至 100 mg/kg 剂量组的约 25-30%）并改善 EF。在 LPS 诱导的脓毒症模型中，将 LPS（10 mg/kg）腹腔注射到 6-8 周龄、18-20 g 的雌性 BALB/c 小鼠体内。在LPS注射前1小时腹腔注射(+/-)-水苏碱（50、100、200 mg/kg）或溶剂，并在LPS注射后6小时再次注射（如需多次注射）。每6小时监测一次存活率，持续72小时。在LPS注射后12小时采集血液进行细胞因子分析（ELISA）。采集肝脏和肺组织进行组织学（H&E染色）和髓过氧化物酶（MPO）活性测定。水苏碱可提高存活率并降低细胞因子水平。在心脏肥大（TAC）模型中，雄性C57BL/6J小鼠（8-10周龄，20-25 g）接受横向主动脉缩窄（TAC）手术以诱导压力负荷过重。从术前1周开始，小鼠通过灌胃给予(+/-)-水苏碱（100 mg/kg/天），持续至术后4周。研究结束时，将小鼠安乐死，称量心脏重量，并用小麦胚芽凝集素 (WGA) 染色以测定心肌细胞横截面积，用苦味酸-天狼星红染色以测定胶原蛋白含量。水苏碱可减轻肥大和纤维化反应。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
(+/-)-水苏碱（游离碱分子量为143.21，属于季铵化合物）。该化合物由于其季铵基团和羧酸根基团（甜菜碱结构）而具有很高的水溶性。它是一种两性离子化合物。已有关于水苏碱在大鼠体内的药代动力学研究报道（针对的是水苏碱，而非其外消旋体）。口服给药（20 mg/kg）后，血药浓度峰值（Cmax）约为1-2 μg/mL，达峰时间（Tmax）约为0.5-1小时，末端半衰期（t1/2）约为2-4小时。由于其良好的溶解性和吸收性，生物利用度较高（F% >70%）。分布容积（Vd）中等（0.5-1 L/kg），表明其主要分布于细胞外液。血浆蛋白结合率较低（<20%）。该化合物代谢不广泛；大部分以原形经尿液排出（24小时内排出60-80%）。肾清除率高，超过肾小球滤过率，表明存在主动肾小管分泌。静脉注射（10 mg/kg）后，半衰期约为1-2小时。该化合物不抑制CYP酶。它在血浆和胃肠液中稳定。外消旋体可能与天然对映体（R-或L-）的行为相似。重复给药无明显蓄积。配制时，溶于水或生理盐水。三氟乙酸盐形式不常见；(+/-)-水苏碱通常以盐酸盐或游离甜菜碱的形式供应。然而，所列产品可能是游离碱或盐酸盐，而非三氟乙酸盐；如果使用三氟乙酸盐，溶解度可能更高。(+/-)-水苏碱粉末在室温下稳定；长期储存于-20℃。水溶液可在4℃下储存数周。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
(+/-)-水苏碱在临床前研究中毒性较低。在小鼠中，急性口服LD50 > 2000 mg/kg。在一项为期28天的大鼠重复给药口服毒性研究中（100、500、1000 mg/kg/天），在≤500 mg/kg剂量下，未观察到与治疗相关的体重、食物消耗量、血液学、临床化学或组织病理学（肝、肾、心、脾、肺）方面的不良反应。在1000 mg/kg剂量下，观察到轻度腹泻和体重增长减少。未见遗传毒性（Ames试验、体内微核试验）的报道。水苏碱不具有皮肤刺激性或致敏性。作为膳食补充剂（存在于益母草茶中），它被认为是安全的。然而，用于研究时，采取标准的实验室防护措施（手套、实验服）即可。该化合物并非管制物质。孕妇应避免服用高剂量（缺乏足够的安全性数据）。仅供研究使用，未获准用于临床治疗。然而，由于水苏碱是内源性代谢产物且存在于食物中，因此其安全性较高。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
(+/-)-水苏碱的CAS号为32039-73-9。其游离碱的分子式为C7H13NO2，分子量为143.18。它也被称为水苏碱（外消旋体）、DL-水苏碱和脯氨酸甜菜碱。它是一种季铵化合物（甜菜碱）。(R)-和(S)-对映异构体具有不同的旋光性。天然异构体为(R)-水苏碱（或(S)-水苏碱，取决于来源；历史上，益母草中的水苏碱具有旋光性）。为了避免对映异构体的成本，研究中通常使用外消旋混合物。盐酸盐（CAS号4136-37-2）更为常见。应用领域包括：炎症研究（NF-κB通路）、心血管保护（心肌缺血、心肌肥大）、抗纤维化（肝脏、心脏、肾脏）和代谢研究。水苏碱是一种源自植物（益母草、柑橘、水苏）的天然产物，也是人体尿液和组织中的内源性代谢产物。经高效液相色谱法（HPLC）测定，纯度>98%。粉末应避光保存于-20℃或4℃。该化合物至少可稳定保存2年。
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| 分子式 |
C7H13NO2
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|---|---|
| 分子量 |
143.18
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| 精确质量 |
143.095
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| CAS号 |
32039-73-9
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| 相关CAS号 |
Stachydrine; 471-87-4
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| PubChem CID |
554
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| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
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| tPSA |
40.1
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 可旋转键数目(RBC) |
0
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| 重原子数目 |
10
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| 分子复杂度/Complexity |
148
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C[N+]1(CCCC1C(=O)[O-])C
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| InChi Key |
CMUNUTVVOOHQPW-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C7H13NO2/c1-8(2)5-3-4-6(8)7(9)10/h6H,3-5H2,1-2H3
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| 化学名 |
1,1-dimethylpyrrolidin-1-ium-2-carboxylate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 6.9842 mL | 34.9211 mL | 69.8422 mL | |
| 5 mM | 1.3968 mL | 6.9842 mL | 13.9684 mL | |
| 10 mM | 0.6984 mL | 3.4921 mL | 6.9842 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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