| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
BTR2000 is not a drug; its "target" is the Kelch domain of the E3 ubiquitin ligase adapter protein, KLHL20. It acts as a high-affinity ligand, binding with specificity to KLHL20. As a ligand for a component of the CUL3-KLHL20 E3 ubiquitin ligase complex, it serves as the "warhead" that recruits this enzyme to a target of interest. In the context of the BTR2004 PROTAC, a linker is attached to BTR2000, which is then connected to a BRD2/3/4 inhibitor. This multi-functional molecule brings the E3 ligase into close proximity with the target protein, leading to its ubiquitination and subsequent degradation by the proteasome. BTR2000 is a tool to study KLHL20-mediated targeted protein degradation.
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| 体外研究 (In Vitro) |
BTR2000 的体外活性取决于其与 KLHL20 Kelch 结构域的结合亲和力。在诸如表面等离子共振 (SPR) 或等温滴定量热法 (ITC) 等生物物理分析中，可测定 BTR2000 与 KLHL20 相互作用的平衡解离常数 (Kd)，结果表明其结合亲和力在低纳摩尔范围内。在细胞分析中，使用 BTR2004 PROTAC，其活性通过 BRD2/3/4 的降解来测定。在处理细胞的蛋白质印迹分析中，BTR2004 会导致 BRD2/3/4 蛋白水平呈浓度依赖性下降（例如，DC50 < 100 nM）。而缺乏靶标结合部分的 BTR2000 本身则不显示降解活性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，BTR2000 不用于治疗，而是作为研究工具用于构建 PROTAC。BTR2004 PROTAC 已证实具有体内活性，能够降解小鼠组织中的 BRD2/3/4，并在异种移植模型中表现出抗肿瘤活性。BTR2000 本身不具有体内活性。作为一种构建模块，其用途在于理解 E3 连接酶-配体相互作用，以及用于构建降解其他目标蛋白的化学工具。
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| 酶活实验 |
体外结合实验（表面等离子共振，SPR）：将重组KLHL20 Kelch结构域蛋白固定在传感器芯片上。将一系列浓度的BTR2000（0.1-100 nM）溶于流动缓冲液中，流经芯片。测量结合速率常数（ka）和解离速率常数（kd），并计算平衡解离常数（Kd），公式为kd/ka。BTR2000的Kd值应在低纳摩尔范围内，证实其具有高亲和力。使用已知不与KLHL20结合的对照化合物来评估非特异性结合。
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| 细胞实验 |
体外PROTAC活性检测（Western Blot）：将HEK293T细胞接种于6孔板（5×10⁵个细胞/孔），并用BTR2004 PROTAC（0.1-1000 nM）处理6-24小时。作为对照，细胞仅用BTR2000（1000 nM）或溶剂（DMSO）处理。处理后，裂解细胞，并通过SDS-PAGE分离蛋白裂解液。用抗BRD2、抗BRD3或抗BRD4抗体以及抗GAPDH内参抗体进行膜探针检测。BTR2004 PROTAC可导致靶蛋白水平呈剂量依赖性降低，而单独使用BTR2000则无此作用。计算DC50（50%降解所需的浓度）。
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| 动物实验 |
BTR2004 PROTAC（非BTR2000）的一般体内动物实验方案：将BTR2004 PROTAC溶解于合适的溶剂（例如，10% DMSO、40% PEG300、5% Tween-80、45%生理盐水）中，并以0、10、30和100 mg/kg的剂量，每隔一天腹腔注射给携带异种癌细胞系（例如，5×10⁶ MV-4-11细胞）的雌性NCr nu/nu裸鼠。每周测量两次肿瘤体积。PROTAC将引起剂量依赖性的肿瘤生长抑制（TGI）。在为期28天的重复给药毒理学研究中，将PROTAC以0、5、15和50 mg/kg/天的剂量给予大鼠，以确定无可见不良反应剂量（NOAEL）。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
BTR2000 是一种小分子（分子量 765），用作 PROTAC 的结构单元。BTR2000 本身的药代动力学尚未进行表征；而是测定了最终 PROTAC 分子 BTR2004 的性质。作为一种合成中间体，它不适用于体内给药。因此，未对 BTR2000 进行正式的 ADME 研究。其溶解度和稳定性已进行表征，用于合成。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
作为一种研究工具，BTR2000 尚未经过正式的毒性测试。其三氟乙酸盐形式可能具有一定的低毒性，但并不被认为是具有遗传毒性的杂质。最终 PROTAC（BTR2004）的潜在毒性才是药物研发的关键所在。作为参考标准品，BTR2000 按照标准危险化学品进行处理。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
BTR2000 是 KLHL20（Kelch 样蛋白 20）的特异性配体，KLHL20 是 Cullin3-RING 泛素连接酶 (CRL3) 复合物的底物适配蛋白。KLHL20 具有重要意义，因为它在某些癌症中过表达，并参与肿瘤抑制因子的降解。BTR2000 的发现促成了 BTR2004 的开发，BTR2004 是一种 PROTAC 降解剂，可降解溴结构域和末端外结构域 (BET) 家族蛋白（BRD2、BRD3、BRD4）。这项工作代表了靶向蛋白降解领域的一项进步，它超越了常用的配体（如 CRBN 和 VHL），转而针对一种新的 E3 连接酶（KLHL20）。这扩展了用于开发降解剂的工具箱，以降解那些可能无法通过传统方法有效靶向的蛋白质。BTR2000 TFA 以粉末形式储存于 -20°C，可溶于 DMSO。
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| 分子式 |
C31H43F3N6O9S2
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| 分子量 |
764.83
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| 相关CAS号 |
BTR2000
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~62.5 mg/mL (~81.72 mM; with sonication)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.3075 mL | 6.5374 mL | 13.0748 mL | |
| 5 mM | 0.2615 mL | 1.3075 mL | 2.6150 mL | |
| 10 mM | 0.1307 mL | 0.6537 mL | 1.3075 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
CRBN ligand-848
CRBN ligand-76
KLHDC2 ligand 1
CRBN ligand-389
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