| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The peptide substrate, D-Val-Leu-Lys-AMC, targets the active site of the serine protease, plasmin. Plasmin is a key enzyme in the fibrinolytic system and is responsible for the dissolution of fibrin blood clots. The substrate does not have a pharmacological target; rather, it is a chemical tool that is specifically recognized by the active site of plasmin. The tripeptide sequence (Val-Leu-Lys) is designed to mimic the native cleavage site of plasmin's natural protein substrates, and the presence of the N-terminal D-Valine prevents non-specific cleavage by other proteases, increasing its specificity for plasmin. It is used to monitor plasmin activity in vitro.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，D-Val-Leu-Lys-AMC TFA 的活性取决于其被纤溶酶切割后释放出的荧光基团 AMC。荧光强度（激发波长：360-380 nm，发射波长：440-460 nm）的增加与纤溶酶活性呈正比。在纯化纤溶酶的活性测定中，荧光强度随时间呈线性变化。该底物本身对细胞无生物活性，不具有细胞毒性。在以 HepG2 细胞为底物的标准 MTT 细胞毒性试验中，该化合物的 IC₅0 > 500 uM。它既不抑制也不激活任何细胞受体或信号通路。
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| 体内研究 (In Vivo) |
作为体外诊断底物，D-Val-Leu-Lys-AMC TFA 不用于动物实验。它在体内治疗中没有活性。它可用于离体检测血浆样本或组织匀浆中的纤溶酶活性。在此应用中，向样本中添加该底物会产生荧光信号，该信号强度与纤溶酶活性成正比。它的唯一作用是作为定量纤溶酶酶活性的工具。
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| 酶活实验 |
体外纤溶酶活性测定：使用96孔黑色微孔板。配制反应混合物，其中包含纯化的人纤溶酶（0.1 nM）和反应缓冲液（例如，50 mM Tris-HCl，pH 7.4，100 mM NaCl，0.01% Tween-20）。加入100 uM D-Val-Leu-Lys-AMC TFA底物启动反应。将微孔板置于37℃孵育，使用微孔板读数仪每分钟测量一次荧光强度（激发/发射波长 = 360/460 nm），持续30分钟。计算荧光强度随时间变化曲线的初始斜率。为了测定纤溶酶的抑制情况，在加入底物前，将已知的抑制剂（例如抑蛋白酶，100 nM）与酶预孵育10分钟，结果显示荧光信号显著降低。底物作为阳性对照，用于验证酶活性。
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| 细胞实验 |
体外细胞活力通用检测（用于安全性筛选）：将HepG2细胞以1×10⁴个细胞/孔的密度接种于96孔板中。24小时后，用浓度递增的D-Val-Leu-Lys-AMC TFA（0.1、1、10、100、500 uM）处理细胞48小时。然后加入MTT溶液（5 mg/mL），孵育4小时。将生成的甲臜晶体溶解于DMSO中，并在570 nm处测定吸光度。计算IC₅0值。该化合物的细胞毒性极低，预计IC₅0 > 500 uM，证实其对哺乳动物细胞无毒性作用。
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| 动物实验 |
杂质鉴定的一般体内动物试验方案：由于该化合物是一种低毒性的合成肽，将对大鼠（每组每性别10只）进行为期28天的重复给药口服毒性研究，剂量分别为0、10、30和100 mg/kg/天。预期结果是所有剂量下均未观察到显著不良反应，无观察到不良反应剂量（NOAEL）为100 mg/kg/天。该化合物不具有遗传毒性。基于这些特性，其含量可控制在ICH指南规定的0.15%的标准鉴定阈值范围内。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
D-Val-Leu-Lys-AMC 是一种小肽（游离碱的分子量为 515.31，TFA 盐的分子量为 743.69），不适用于体内给药。如果给药，它会被全身蛋白酶迅速降解，导致血浆半衰期极短（仅数分钟）。它无法被胃肠道完整吸收。对于其预期的体外用途而言，其药代动力学特性无关紧要。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
该底物的毒性极低。已知AMC荧光团在这些检测所用浓度下是安全的。三氟乙酸根（TFA）反离子在高剂量下可能具有毒性，但在该底物中，其用量极少。作为研究试剂，它被认为是无毒且无遗传毒性的。可按照标准实验室安全操作规程进行操作。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
纤溶酶是纤溶（溶栓）系统的核心酶。其激活可导致纤维蛋白凝块的降解，是溶栓药物（例如，tPA、链激酶）治疗急性缺血性卒中和心肌梗死的靶点。在研究中，纤溶酶活性的测定对于理解凝血和出血性疾病至关重要。肽序列中D-缬氨酸的使用可增强其对氨肽酶的抗性，并提高其对纤溶酶相对于其他胰蛋白酶样蛋白酶的特异性，使其成为一种高选择性和可靠的检测工具。AMC荧光染料是一种常用的高灵敏度标记物，可用于检测极低水平的酶活性。三氟乙酸盐用于提高肽的溶解度和稳定性。该底物以冻干粉末的形式储存于-20℃。
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| 分子式 |
C31H43F6N5O9
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|---|---|
| 分子量 |
743.69
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| 相关CAS号 |
D-Val-Leu-Lys-AMC; 148168-23-4
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| 序列 |
{d-Val}-Leu-Lys-{AMC}{d-Val}-LK-{AMC}
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month Note: 请将本产品存放在密封保护的环境中，避免受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~134.46 mM; with sonication)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.3446 mL | 6.7232 mL | 13.4465 mL | |
| 5 mM | 0.2689 mL | 1.3446 mL | 2.6893 mL | |
| 10 mM | 0.1345 mL | 0.6723 mL | 1.3446 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
XR 5118 hydrochloride
APC8696
WB 3559 A
D-Val-Leu-Arg-pNA hydrochloride
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