| 规格 | 价格 | |
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| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
As a conjugate, Cyclosporin A-OVA serves research applications based on its two components: the OVA carrier facilitates antigen presentation, while the Cyclosporin A moiety provides pharmacological activity. Regarding the mechanism of Cyclosporin A, its primary target is the intracellular protein calcineurin. Cyclosporin A binds to cyclophilin, and the resulting complex inhibits calcineurin phosphatase activity, thereby blocking NFAT dephosphorylation and nuclear translocation, ultimately suppressing the transcription of IL-2 and other lymphokines. In terms of antigen presentation, studies have shown that Cyclosporin A inhibits both MHC class I-restricted cross-presentation and MHC class II-restricted presentation of exogenous OVA in dendritic cells (DCs), with IC50 values of approximately 65 nM and 60 nM, respectively, for normal DCs. This inhibitory effect occurs at the antigen processing step rather than affecting MHC molecule expression or phagocytic activity. Cyclosporin A also inhibits the classic MHC class I presentation pathway for endogenous OVA.
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| 体外研究 (In Vitro) |
关于游离Cyclosporin A在OVA相关抗原呈递系统中的体外抑制活性有详细研究。在树突状细胞（DC2.4细胞系）中，CsA抑制OVA交叉呈递的IC50约为850 nM，抑制内源性OVA的经典MHC I类呈递的IC50约为230 nM。在原代骨髓来源树突状细胞（BMDC）中，CsA抑制OVA交叉呈递的IC50约为65 nM，抑制OVA MHC II类呈递的IC50约为60 nM。CsA浓度高达3000 nM时对DC的吞噬活性无抑制作用，对MHC I类分子（H-2Kb）表达水平也无影响。此外，CsA不抑制外源性OVA肽段SIINFEKL的呈递，证实其作用于抗原加工事件而非肽段-MHC结合。他克莫司抑制交叉呈递的活性比CsA强约80-100倍，而雷帕霉素无抑制作用。
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| 体内研究 (In Vivo) |
大量研究使用了游离Cyclosporin A 联合 OVA免疫的动物模型。在OVA免疫的DO11.10 TCR转基因小鼠中，CsA可显著减少脾脏CD4+CD25+调节性T细胞及CD4+CD25+Foxp3+T细胞的百分数，提示CsA在抑制免疫应答的同时也可能抑制免疫耐受的诱导。在大鼠模型中，CsA（25 mg/kg/天）从OVA免疫时开始给药，完全抑制抗OVA抗体的产生，包括IgE。环磷酰胺诱导的嗜酸性粒细胞增多可被CsA抑制，提示IgE合成与嗜酸性粒细胞增殖受不同T细胞亚群调控。在OVA诱导的哮喘小鼠模型中，CsA抑制气道高反应性、嗜酸性粒细胞浸润和T细胞活性。在豚鼠中，CsA给药方案不同可产生相反效果：免疫后持续给药抑制迟发型超敏反应，而仅免疫后早期给药（第0-4天）反而增强DTH反应。
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| 酶活实验 |
Cyclosporin A-OVA在体外主要作为检测系统中的包被抗原或标准品使用。在建立Cyclosporin A免疫检测方法（如ELISA）时，典型的实验流程包括：将Cyclosporin A-OVA稀释于碳酸盐缓冲液（0.05 M，pH 9.6）中，浓度为1-10 μg/mL，每孔100 μL加入酶标板，4°C包被过夜，再用封闭液（如含1% BSA的PBS）封闭。随后加入待测样品或Cyclosporin A标准品以及抗Cyclosporin A抗体，孵育后加入酶标二抗，最后加入底物显色，测定OD值。检测原理基于板上的Cyclosporin A-OVA与溶液中的游离Cyclosporin A竞争结合有限量的特异性抗体。
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| 细胞实验 |
大量研究使用游离CsA在细胞水平评估其对OVA抗原呈递的抑制作用。典型的体外细胞实验流程如下：使用小鼠树突状细胞系DC2.4或原代骨髓来源树突状细胞（BMDC），将细胞接种于96孔板（约1×10⁵细胞/孔）中。加入微囊化OVA（使用FDA批准的生物可降解聚合物PLA制备）作为抗原源，同时加入不同浓度的CsA（0-10,000 nM）或他克莫司（0-100 nM）处理。37°C孵育2小时后，洗涤细胞去除未结合的抗原和药物。对于交叉呈递检测，使用OVA（257-264）肽段（SIINFEKL）-H-2Kb复合物特异性T细胞杂交瘤B3Z作为指示细胞，B3Z细胞（1×10⁵/孔）加入后孵育过夜，通过检测β-半乳糖苷酶活性（使用CPRG底物，570 nm读取OD值）定量呈递复合物的数量。对于MHC II类呈递检测，使用从DO11.10转基因小鼠脾脏分离的OVA特异性CD4+ T细胞作为指示细胞。
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| 动物实验 |
大量研究使用CsA处理OVA免疫的动物模型。典型实验流程如下：以OVA诱导的哮喘小鼠模型为例，6-8周龄雌性BALB/c小鼠在第0天和第14天腹腔注射OVA（20 μg，用氢氧化铝佐剂）致敏。从第21天开始，小鼠接受雾化OVA（1% w/v in PBS，每天30分钟，连续3天）激发。CsA（5-25 mg/kg）在每次激发前1小时通过灌胃给予。最后一次激发后24小时进行气道高反应性测定（使用乙酰甲胆碱激发），随后处死小鼠收集支气管肺泡灌洗液进行细胞分类计数，肺组织进行H&E染色和Masson三色染色评估炎症和重塑。血清通过ELISA检测OVA特异性IgE和总IgE。在另一研究中，DO11.10 TCR转基因小鼠经尾静脉注射OVA（500 μg）免疫，CsA（20 mg/kg/天）在免疫前3天开始连续4天腹腔注射。免疫后第7天处死小鼠，取脾脏通过流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞比例。在大鼠和豚鼠模型中，CsA（25 mg/kg）经口服或腹腔注射给药，从免疫前开始持续2周。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
由于该偶联物为OVA载体蛋白与半抗原的缀合物，主要作为免疫试剂使用而非治疗药物，其药代动力学信息通常不在产品说明中提供。游离Cyclosporin A作为已上市药物（商品名Sandimmune、Neoral等），其药代动力学特征已有充分研究：口服生物利用度约30%，达峰时间约1.5-4小时，半衰期约5-18小时（随制剂不同而异），主要经肝脏CYP3A4代谢，经胆汁排泄。然而，Cyclosporin A-OVA偶联物因分子量显著增加（OVA约45 kDa，偶联物总分子量>46 kDa），在体内不太可能被吸收进入体循环，预计主要保留在注射或接触部位，或被抗原呈递细胞摄取加工。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于该偶联物主要作为研究试剂用于体外检测和免疫学实验，而非用于人体治疗，其系统毒理学评估通常不是产品开发的重点。然而，组成成分的毒性特征可分别考虑：OVA（鸡卵白蛋白）本身为低毒性蛋白质，在常规实验浓度下（-1 mg/mL）无已知明显毒性。Cyclosporin A部分在小鼠中的急性毒性LD50值（口服）约为2000-3000 mg/kg，临床治疗中主要副作用包括肾毒性（血清肌酐升高）、高血压、肝毒性（胆红素升高）、神经毒性（震颤）和牙龈增生。由于Cyclosporin A-OVA偶联物中Cyclosporin A的摩尔比例较低（每个OVA分子可能偶联数个至数十个CsA分子），且偶联物分子量大不易吸收，预期游离态小分子药物的系统毒性风险较低。但具体毒性数据需参考供应商提供的材料安全数据表。
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| 参考文献 |
| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
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|---|---|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
MEDI7814
Bisphenol A bissulfate disodium
Factor B-IN-6
Factor B-IN-7
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