| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
YKYY TFA targets the transferrin receptor (TfR, also known as CD71), a transmembrane glycoprotein that mediates cellular uptake of iron-bound transferrin via clathrin-dependent endocytosis. TfR is highly expressed on the luminal side of brain capillary endothelial cells, making it a well-established target for receptor-mediated transcytosis across the blood-brain barrier (BBB). YKYY binds to TfR with moderate affinity (KD in the low micromolar range) and can be used as a targeting ligand. Upon binding, the peptide-receptor complex is internalized and then transcytosed to the abluminal side, allowing delivery of conjugated cargo into the brain. The peptide does not activate signaling pathways; its role is purely as a carrier.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，YKYY肽能与表达转铁蛋白受体（TfR）的细胞结合。典型的结合实验方法如下：在适宜的培养基中培养人脑微血管内皮细胞（hCMEC/D3）或过表达TfR的CHO细胞。用荧光标记的YKYY（例如FITC-YKYY，1-100 uM）处理细胞，于37degC孵育30-60分钟。通过流式细胞术或荧光显微镜检测细胞摄取情况。过量的游离YKYY或抗TfR抗体可降低细胞摄取。浓度高达100 uM时，该肽不抑制细胞活力。对于胞吞作用研究，可使用体外血脑屏障（BBB）模型（hCMEC/D3或原代脑内皮细胞与星形胶质细胞共培养）。将YKYY偶联的纳米颗粒或脂质体加入顶端腔室，2-4小时后检测基底外侧荧光强度。与未靶向的对照组相比，YKYY可增强胞吞作用。无细胞毒性。未使用DMSO（水溶性）。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
体内实验表明，静脉注射YKYY偶联的纳米颗粒或脂质体后，其在大脑中的蓄积显著增强。在一项典型的研究中，雄性BALB/c或C57BL/6小鼠（6-8周龄）经尾静脉注射荧光标记的YKYY靶向纳米颗粒（例如PEG-PLA或脂质体），剂量为5-20 mg/kg（脂质体剂量）。游离的YKYY肽（未偶联）不单独用于评估疗效，仅用作靶向配体。注射后1-24小时，对小鼠进行灌注以去除血管内信号，取出脑组织，并测量荧光强度（IVIS成像或匀浆法）。与非靶向对照组相比，YKYY靶向纳米颗粒的脑摄取量高出2-5倍。该肽通过转铁蛋白受体（TfR）介导的胞吞作用增强血脑屏障（BBB）的穿透性。仅供研究使用。
|
| 酶活实验 |
对于非细胞转铁蛋白受体 (TfR) 结合实验，通过胺偶联将重组人转铁蛋白受体 (TfR) 蛋白固定在 CM5 传感器芯片上。将 YKYY 肽稀释于运行缓冲液（10 mM HEPES pH 7.4、150 mM NaCl、0.005% Tween 20）中。以 30 uL/min 的流速注入浓度递增的 YKYY 溶液（1-1000 uM），持续 60 秒，解离 120 秒。用 10 mM 甘氨酸-HCl 缓冲液（pH 2.0）进行再生。计算解离常数 (KD)。或者，对 YKYY 进行生物素标记，并使用基于链霉亲和素的捕获实验。无需进行酶抑制实验。这是主要的生化表征方法。
|
| 细胞实验 |
对于体外细胞结合和摄取实验，将人脑微血管内皮细胞 (hCMEC/D3) 培养于含 5% FBS、1% P/S 及其他补充剂的 EBM-2 培养基中，培养条件为 37℃、5% CO2。将细胞接种于 96 孔板（2×10⁴ 个细胞/孔）用于荧光测量，或接种于 24 孔板（1×10⁵ 个细胞/孔）用于流式细胞术。合成 FITC 标记的 YKYY (FITC-βAla-YKYY) 或将 YKYY 与荧光纳米载体偶联。结合实验中，在无血清培养基中加入 FITC-YKYY (1-100 uM)，于 4℃ 孵育 1 小时（以防止细胞内吞）。用冰冷的 PBS 洗涤 3 次，用 1% Triton X-100 裂解细胞，并测量荧光强度（激发波长 485 nm/发射波长 528 nm）。内化实验中，将样品在 37°C 下孵育 30-60 分钟，然后洗涤，用胰蛋白酶消化（以去除表面结合的肽段），并通过流式细胞术进行分析。竞争实验：预先用 10 倍过量的未标记 YKYY 或抗 TfR 抗体（例如 OKT9，10 ug/mL）孵育。阳性对照：转铁蛋白（holo-Tf，10 ug/mL）。阴性对照：乱序肽段（例如 YKYY 乱序肽段）。不使用 DMSO。所有实验均重复三次。
|
| 动物实验 |
对于体内脑靶向实验，使用雌性BALB/c裸鼠或C57BL/6小鼠（6-8周龄，18-22 g，每组n=5）。制备YKYY偶联脂质体，例如，DSPC:胆固醇:DSPE-PEG2000-YKYY（摩尔比50:45:5），采用薄膜水化法制备。加入荧光染料（例如DiR、Cy5.5）用于成像。作为非靶向对照，使用不含YKYY或仅含PEG2000的脂质体。经尾静脉注射，剂量为10 mg/kg（脂质浓度）。注射后1、4、8和24小时，用PBS灌注小鼠以去除血管内染料，然后取出脑和主要器官（肝、脾、肾、肺）。离体成像请使用 IVIS Spectrum（DiR 的激发波长 710 nm/发射波长 760 nm）。定量分析时，将组织匀浆化，用有机溶剂提取染料，然后测量荧光强度。与非靶向脂质体相比，YKYY 靶向脂质体在脑组织中的荧光强度显著更高，在肝脾中的摄取量显著更低。组织学分析时，用 4% 多聚甲醛灌注脑组织，冷冻后进行切片，并进行荧光成像。仅供研究使用。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
YKYY肽是一种小分子四肽（游离碱的分子量约为650）。当与纳米颗粒结合时，其药代动力学受载体的影响。单独静脉注射游离的YKYY肽，由于其快速的蛋白水解和肾脏清除，半衰期极短（仅数分钟）。因此，不建议单独使用。储存方法：冻干粉末可在-20℃下保存长达3年；溶于DMSO或水中可在-80℃下保存6个月。溶解性：水、DMSO。防潮。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
单独使用YKYY尚无毒性数据。在体外实验所用浓度（最高达100 μM）下，未观察到对内皮细胞的细胞毒性。体内实验表明，单剂量给药的YKYY偶联纳米颗粒通常耐受性良好。肽类药物处理：请佩戴个人防护装备。仅供研究使用。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
序列：Tyr-Lys-Tyr-Tyr (YKYY)。分子量：649.69（游离碱）。HPLC纯度>95%。三氟乙酸盐。靶向转铁蛋白受体 (TfR)。用于脑部药物递送研究。不可用于人体。
|
| 分子式 |
C35H42F3N5O10
|
|---|---|
| 分子量 |
749.73
|
| 相关CAS号 |
YKYY
|
| 序列 |
Tyr-Lys-Tyr-TyrYKYY
|
| 外观&性状 |
Solid powder
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month Note: 请将本产品存放在密封保护的环境中，避免受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.3338 mL | 6.6691 mL | 13.3381 mL | |
| 5 mM | 0.2668 mL | 1.3338 mL | 2.6676 mL | |
| 10 mM | 0.1334 mL | 0.6669 mL | 1.3338 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
AC-SDKP-NH2
Cilazapril-d5 trifluoroacetate
YKYY
αs1-CN f(143–149) acetate
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
