| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TAT-QFNP12 acetate targets the protein-protein interaction between NDRG2 and PPM1A. By blocking this interaction, it prevents PPM1A-mediated dephosphorylation of Smad2/3, thereby modulating TGF-beta signaling. This leads to downregulation of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) production in astrocytes. The TAT domain (derived from HIV-1 Tat protein) enables the peptide to cross cell membranes and reach intracellular targets. The compound operates within the TGF-beta/Smad signaling pathway and the neuroinflammatory cascade, specifically reducing MMP-9 which is a key mediator of BBB disruption after SAH. There is no classical enzyme or receptor binding; the target is a protein complex.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明,TAT-QFNP12 乙酸酯(在原代星形胶质细胞培养物中以 0.1-10 uM 的浓度处理 24-48 小时)可降低星形胶质细胞中 MMP-9 的产生,这通过 ELISA 和明胶酶谱法测定。它能阻断 NDRG2-PPM1A 的相互作用,这通过共免疫沉淀实验得到证实,并导致 Smad2/3 磷酸化水平升高(Western blot)。MTT 或 LDH 释放实验表明,该肽在浓度高达 10 uM 时对细胞活力没有显著影响。在有效浓度下,它对其他基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-3)没有脱靶效应。基于剂量反应研究,MMP-9 降低的 EC50 值约为 1-3 uM。DMSO 溶剂对照浓度 ≤0.1%。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内,TAT-QFNP12 醋酸酯可减轻啮齿动物蛛网膜下腔出血 (SAH) 模型中的血脑屏障 (BBB) 破坏。在一项典型的研究中,使用雄性 C57BL/6 小鼠(20-25 g),对小鼠进行血管内穿孔诱导的 SAH,在 SAH 后立即腹腔注射该肽(1-10 mg/kg),可显著降低 SAH 后 24 小时伊文思蓝外渗(BBB 通透性的标志物)。它还能降低脑内 MMP-9 的活性,并保护紧密连接蛋白(闭合蛋白、claudin-5)。神经功能缺损评分(改良 Garcia 评分)得到改善。该肽不影响全身血压或心率。给药可单次或重复(每日一次,最多 3 天)。10 mg/kg 剂量下未观察到明显的毒性或体重减轻。
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| 酶活实验 |
不适用。TAT-QFNP12 乙酸酯是一种肽,其作用机制是通过破坏细胞内环境中的蛋白质-蛋白质相互作用(NDRG2-PPM1A)来实现的。这种机制需要完整的细胞机制,无法在无细胞系统中重现。传统的非细胞检测方法,例如酶活性抑制(如蛋白酶、激酶),并不适用。然而,理论上表面等离子共振 (SPR) 可以测量该肽与纯化的 NDRG2 或 PPM1A 蛋白之间的结合亲和力,但并未提供此类数据。该化合物的活性完全通过基于细胞和体内的功能性检测来确定。
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| 细胞实验 |
体外细胞实验中,从新生C57BL/6小鼠中分离原代皮层星形胶质细胞,并在含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中培养。将细胞接种于6孔板(5×10⁵个细胞/孔)或96孔板(2×10⁴个细胞/孔)。待细胞汇合度达到80%后,更换为含0.1、1、3和10 uM TAT-QFNP12醋酸盐(由10 mM PBS储备液配制)的无血清培养基。在37℃、5% CO2条件下培养24-48小时。进行免疫共沉淀(co-IP)实验时,用NP-40缓冲液裂解细胞;使用NDRG2抗体进行免疫沉淀,并通过Western blot检测PPM1A蛋白。采用ELISA法(灵敏度约为0.1 ng/mL)检测条件培养基中的MMP-9含量。采用MTT法(0.5 mg/mL,孵育4小时)评估细胞活力。所有实验均设置溶剂对照(PBS),并重复三次。阳性对照:重组TGF-β1(10 ng/mL)可诱导Smad2/3磷酸化。
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| 动物实验 |
对于体内蛛网膜下腔出血(SAH)模型,雄性C57BL/6小鼠(8-10周龄,20-25 g,每组n=8-10)用异氟烷麻醉。采用单丝缝线对左侧大脑中动脉进行血管内穿孔,诱导SAH。假手术组小鼠接受相同的操作,但不进行穿孔。将TAT-QFNP12醋酸盐溶解于无菌PBS中,配制成0.5 mg/mL的溶液,并在SAH诱导后立即腹腔注射(IP)1、3和10 mg/kg(10 mL/kg体重)的剂量。对照组注射溶剂(PBS)。SAH后24小时,处死小鼠,用PBS灌注脑组织,并在处死前2小时静脉注射伊文思蓝染料(2%生理盐水,4 mL/kg),以评估血脑屏障通透性。将脑组织在甲酰胺中匀浆,于 60℃ 孵育 24 小时,并测量 620 nm 处的吸光度。24 小时后,由不知晓分组情况的观察者评估神经功能评分(改良 Garcia 评分,3-18 分)。采用明胶酶谱法分析脑匀浆中的 MMP-9 活性。进行蛋白质印迹实验时,裂解脑组织并检测 occludin、claudin-5 和 MMP-9 的表达。所有实验操作均遵循动物福利指南。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚无TAT-QFNP12醋酸酯的详细药代动力学数据。作为一种由21个氨基酸组成的肽(分子量约为3006 g/mol),由于血清蛋白酶的快速蛋白水解作用,预计其血浆半衰期较短(t½可能为10-30分钟)。TAT结构域可增强细胞摄取,但不会延长循环时间。腹腔注射后,吸收相对较快,血浆峰浓度可在30-60分钟内达到。该肽可能经肾脏和肝脏清除。口服生物利用度极低,必须注射给药。目前尚无组织分布研究报道。该化合物以冻干粉末形式储存于-80℃时稳定。长期储存(最长2年)应将粉末置于-80℃,最长1年应置于-20℃,并避光防潮。溶解性:水或PBS。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
尚未对TAT-QFNP12乙酸酯进行正式的毒性研究。体外试验表明,该肽在浓度高达10 μM时对原代星形胶质细胞无细胞毒性(通过LDH释放和MTT试验测定,细胞活力>90%对照组)。在急性动物研究(蛛网膜下腔出血模型)中,腹腔注射剂量高达10 mg/kg耐受性良好,未观察到体重减轻、行为异常或死亡。未见器官毒性(肝脏、肾脏、脾脏)的报道。已知TAT结构域具有低免疫原性。应遵循标准实验室安全预防措施:避免吸入、摄入和皮肤/眼睛接触;使用个人防护装备(手套、实验服、护目镜);处理粉末时在通风橱内操作。仅供研究使用,不得用于人体诊断或治疗。请根据当地生物和化学废物处理法规处置废物。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
该肽序列为 Tyr-Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg-Val-Lys-Lys-Glu-Ala-Glu-Leu-Asp-Lys-Tyr-Leu-Glu (YGRKKRRQRRRVKKEAELDKYLE),包含 TAT 结构域(氨基酸残基 1-11)以及靶向 NDRG2-PPM1A 相互作用的抑制序列。分子量:3006.47 g/mol(游离碱)。纯度通常 >95%(HPLC 法)。以冻干醋酸盐形式提供。储存:密封,防潮,-80℃ 可长期保存(2 年),-20℃ 可保存长达 1 年。仅供研究使用。通路:TGF-β/Smad 信号通路,神经炎症。用于研究蛛网膜下腔出血、血脑屏障破坏和神经保护疗法。不可用于人体。也称为TAT-NDRG2-PPM1A抑制肽。
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| 分子式 |
C130H225N47O35.XC2H4O2
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| 分子量 |
3006.47 (free base)
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| 相关CAS号 |
TAT-QFNP12
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| 序列 |
Tyr-Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg-Val-Lys-Lys-Glu-Ala-Glu-Leu-Asp-Lys-Tyr-Leu-GluYGRKKRRQRRRVKKEAELDKYLE
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| 外观&性状 |
white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month Note: 请将本产品存放在密封保护的环境中,避免受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。