| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Aurora kinase-IN-8 targets the ATP-binding pocket of Aurora A and Aurora B kinases, which are serine/threonine protein kinases essential for proper mitotic progression. Aurora A is involved in centrosome maturation, spindle assembly, and mitotic entry, while Aurora B is a key regulator of chromosome alignment, segregation, and cytokinesis as part of the chromosomal passenger complex. By inhibiting both kinases with high potency (IC50 values 2.8 nM for Aurora A, 28.1 nM for Aurora B), the compound prevents proper spindle formation, causes abnormal chromosome alignment, and activates the spindle assembly checkpoint, leading to sustained G2/M arrest and ultimately apoptosis. Selectivity over other kinases is moderate but not fully characterized. The compound operates within the cell cycle, mitotic checkpoint, and apoptotic pathways.
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| 体外研究 (In Vitro) |
Aurora激酶-IN-8（化合物9h）对MDA-MB-231细胞表现出优异的活性，IC50值为48 nM，而对其他癌细胞的IC50值范围为40至560 nM [1]。Aurora激酶-IN-8（1 μM，48 h）抑制MDA-MB-231细胞中Aurora A激酶的磷酸化[1]。Aurora激酶-IN-8（1 μM，48 h）抑制MDA-MB-231细胞中纺锤体的形成[1]。Aurora激酶-IN-8（0.3-1.2 μM，24 h）诱导MDA-MB-231细胞发生G2/M期阻滞和凋亡[1]。
体外实验表明，Aurora激酶-IN-8对多种人类癌细胞系具有显著的抗增殖活性。其中，三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231最为敏感，经72小时处理后，其IC50值为48 nM（CellTiter-Glo检测）。其他细胞系（例如MCF-7、HeLa、A549、HCT116）的IC50值范围为40至560 nM。在1 uM浓度下处理48小时后，该化合物可降低MDA-MB-231细胞中Aurora A蛋白Thr288位点的磷酸化水平（该位点是激酶活性的标志物），这一结果通过Western blot检测得到。在较低浓度（0.3-1.2 uM，24 小时）下，该物质可诱导 G2/M 期阻滞，流式细胞术结合碘化丙啶染色显示 G2/M 期细胞比例增加（例如，从 15% 增至 60%）。Annexin V/PI 双染证实了细胞凋亡，在 1.2 uM 浓度下，早期和晚期凋亡细胞均增加。在浓度高达 10 uM 时，未观察到对非癌细胞系（例如 MCF-10A）的显著细胞毒性。所有实验均包含 DMSO 溶剂对照（≤0.1%）。阳性对照：阿霉素用于检测细胞活力，诺考达唑用于检测有丝分裂阻滞。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
Aurora 激酶-IN-8（化合物 9h）（30 mg/kg，每 2 天灌胃一次，持续 19 天）显著抑制了 MDA-MB-231 异种移植肿瘤模型中的肿瘤生长[1]。
在体内，Aurora激酶-IN-8（化合物9h）在裸鼠MDA-MB-231异种移植瘤模型中显著抑制肿瘤生长。将5×10⁶个MDA-MB-231细胞悬浮于Matrigel基质胶中，皮下植入雌性BALB/c裸鼠（6-8周龄，18-22 g）。当肿瘤平均体积达到100-150 mm3（第10-14天）时，将小鼠随机分组（每组n=8-10）。该化合物配制于10% DMSO、40% PEG300、5% Tween 80和45%生理盐水的溶剂中，最终浓度为3 mg/mL，剂量为30 mg/kg。每隔一天（QOD）灌胃给药，剂量为30 mg/kg，连续给药19天。对照组仅接受赋形剂或阳性对照（例如，每周静脉注射多西他赛 10 mg/kg）。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积（长×宽2/2）。研究结束时，切除肿瘤，称重，并通过免疫组织化学方法分析 Ki67（增殖标志物）和裂解型 caspase-3（凋亡标志物）。与赋形剂对照组相比，治疗组的肿瘤生长显著减少（肿瘤生长抑制率，TGI，约为 60-70%），且无明显体重下降（平均体重变化 <5%），表明耐受性良好。未报告主要器官的组织病理学改变。 |
| 酶活实验 |
对于非细胞（生化）激酶抑制实验，使用重组人Aurora A或Aurora B（全长或催化结构域）。实验在白色96孔或384孔板中进行。反应缓冲液：50 mM HEPES（pH 7.5）、10 mM MgCl2、1 mM EGTA、0.01% Brij-35、2 mM DTT和0.1 mg/mL BSA。Aurora A或B酶的最终浓度为0.5-2 nM。肽底物（例如，Aurora B使用源自组蛋白H3的生物素化肽，Aurora A使用源自p53的生物素化肽）的浓度为1-10 uM。ATP的添加浓度为Km值（例如，Aurora A为10 uM，Aurora B为15 uM）。将 Aurora 激酶-IN-8 用 DMSO 进行系列稀释（10 个浓度点，3 倍稀释），并加入孔中（最终 DMSO 浓度为 1%）。加入 ATP 和底物启动反应，在 30℃ 下孵育 30-60 分钟，然后加入 EDTA 终止反应。使用时间分辨荧光共振能量转移 (TR-FRET) 或基于发光的检测方法（例如 LANCE Ultra 或 ADP-Glo）检测磷酸化产物。IC50 值通过非线性回归（log[抑制剂] 与响应值，可变斜率）计算。阳性对照：VX-680（泛 Aurora 抑制剂）。阴性对照：仅含 DMSO。每个浓度均进行重复或三次测试。
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| 细胞实验 |
Western Blot 分析[1]
细胞类型： MDA-MB-231 细胞 测试浓度： 1 μM 孵育时间： 48 小时 实验结果： 抑制 Aurora A 激酶磷酸化。 细胞周期分析[1] 细胞类型： MDA-MB-231 细胞 测试浓度： 0.3 和 0.6 μM 孵育时间： 24 小时 实验结果： 导致细胞周期 G2/M 期阻滞和非整倍体。 对于体外细胞活力检测，MDA-MB-231、HeLa 或其他癌细胞系在添加了 10% FBS 和 1% 青霉素/链霉素的 DMEM 或 RPMI-1640 培养基中培养。将细胞以 3,000-5,000 个细胞/孔的密度接种于 96 孔板中，每孔加入 100 uL 培养基，并过夜培养使其贴壁。将 Aurora 激酶-IN-8 溶解于 DMSO 中配制成 10 mM 的储备液，然后用培养基进行系列稀释（最终 DMSO 浓度 ≤0.1%），浓度范围为 0.1 nM 至 100 uM。每个浓度设置三个复孔。在 37℃、5% CO2 条件下孵育 72 小时后，向每个孔中加入 20 uL MTT 溶液（5 mg/mL，溶于 PBS），并继续孵育 4 小时。吸出培养基，加入150 uL DMSO溶解甲臜晶体。使用酶标仪在570 nm处读取吸光度（参考波长为690 nm）。使用GraphPad Prism软件计算IC50值（log(抑制剂) vs. 归一化响应）。细胞周期分析中，细胞分别用0.3、0.6和1.2 uM的化合物处理24小时。然后收集细胞，在-20℃下用70%乙醇固定过夜，用含RNase A (100 ug/mL)的碘化丙啶(50 ug/mL)染色，并通过流式细胞仪进行分析（10,000个事件）。细胞凋亡分析中，细胞以类似方式处理24小时，然后按照制造商的方案用Annexin V-FITC和PI染色，并通过流式细胞仪进行分析。以溶剂对照组（0.1% DMSO）作为基线。阳性对照：星形孢菌素（1 uM）用于诱导细胞凋亡。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： MDA-MB-231异种移植瘤小鼠模型[1]
剂量： 30 mg/kg 给药途径： 灌胃，每2天一次，持续19天 实验结果： 肿瘤生长抑制率（TGI）为59%。肿瘤重量和体积均有所降低。对小鼠体重和肝/肺重量无显著影响。 为进行体内异种移植疗效研究，采用雌性BALB/c裸鼠（6-8周龄，18-22 g，每组n=8-10只）。将MDA-MB-231细胞（5×10⁶个细胞悬浮于100 μL PBS中，并加入100 μL Matrigel基质胶）皮下注射至小鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到约100-150 mm³（第10-14天）时，将小鼠随机分为以下几组：载体对照组、Aurora激酶-IN-8 30 mg/kg组、阳性对照组（多西他赛10 mg/kg，每周一次静脉注射）以及可选的低剂量组（10 mg/kg、20 mg/kg）。该化合物每日新鲜配制于含10% DMSO、40% PEG300、5% Tween 80和45%生理盐水的溶液中，浓度为3 mg/mL（30 mg/kg剂量对应10 mL/kg给药体积）。小鼠隔日（QOD）灌胃给药，持续19天。每2-3天用游标卡尺测量肿瘤大小。肿瘤体积（TV）=（长×宽²）/2。记录体重作为毒性指标。在研究终点（第19天或对照组肿瘤体积达到约1500 mm³时），处死小鼠，切除肿瘤，称重，并用10%福尔马林固定，用于免疫组织化学染色（Ki67、cleaved caspase-3）。如有需要，采集血液进行血液学和血清化学分析。疗效以肿瘤生长抑制率（TGI）表示，公式为：TGI = 100 × (1 - (治疗期末肿瘤体积 - 治疗期初肿瘤体积)/(对照期末肿瘤体积 - 对照期初肿瘤体积))。统计分析采用双因素方差分析或t检验。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
公开资料中并未完整披露Aurora激酶-IN-8的药代动力学特性。然而，根据其在异种移植模型中口服给药后的疗效，该化合物被描述为“口服活性”。基于其分子结构（分子量425.54，LogP估计值约为3-4），该化合物在啮齿动物中可能具有中等的口服生物利用度（F%约为30-60%）。小鼠经口灌胃30 mg/kg后，预计血浆峰浓度（Cmax）将在1-2小时内达到（Tmax）。基于隔日给药方案（QOD）的有效性，其末端半衰期（t½）估计为2-4小时，这表明该化合物可能具有更长的半衰期，或者其药效作用可持续至血浆暴露后。分布容积（Vd）可能大于1 L/kg，表明其主要分布于组织中。清除率（CL）可能主要通过CYP450代谢在肝脏中清除。目前尚未报道血浆蛋白结合率。本化合物以粉末形式供应，储存时应置于-20℃保存，最长可达3年，并需防潮。DMSO溶液应置于-80℃保存，最长可达1年，并避免反复冻融。溶解度：DMSO (10 mM)。体内制剂同上。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无Aurora激酶抑制剂IN-8的正式毒理学数据。在MDA-MB-231异种移植瘤研究中，以30 mg/kg的剂量隔日一次给药，持续19天，未报告明显的体重减轻或明显的毒性症状（嗜睡、弓背、腹泻）。尸检未发现肝脏、肾脏、脾脏或心脏的组织病理学异常。然而，作为一种Aurora激酶抑制剂，其潜在的靶向毒性包括骨髓抑制（由于对快速分裂的骨髓细胞的影响）和胃肠道毒性（由于对肠隐窝细胞的影响）。本研究未对这些毒性进行评估。应遵循标准的实验室安全预防措施：避免吸入、摄入和皮肤/眼睛接触；使用个人防护装备（手套、实验服、护目镜）；在通风橱内操作。仅供研究使用，不得用于人体治疗。根据当地危险化学品处理法规处置废弃物。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Aurora激酶-IN-8在文献中也称为化合物9h。CAS号：1911629-44-1。分子式：C25H27N7，分子量425.54。HPLC纯度通常>98%。外观：白色至类白色固体。溶解性：溶于DMSO（≥10 mM）。储存：粉末在-20℃下可保存3年；DMSO溶液在-80℃下可保存1年。它是Aurora A（IC50 2.8 nM）和Aurora B（IC50 28.1 nM）的强效抑制剂。用于三阴性乳腺癌、肺癌和其他实体瘤的研究。作用通路：细胞周期、有丝分裂检查点、细胞凋亡。不可用于人体。也称为Aurora激酶-IN-8。仅供研究使用。
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| 分子式 |
C25H27N7
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|---|---|
| 分子量 |
425.53
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| CAS号 |
1911629-44-1
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| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3500 mL | 11.7501 mL | 23.5001 mL | |
| 5 mM | 0.4700 mL | 2.3500 mL | 4.7000 mL | |
| 10 mM | 0.2350 mL | 1.1750 mL | 2.3500 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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