| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
FIP22 targets IRAK4 (interleukin-1 receptor-associated kinase 4), a key mediator of Toll-like receptor (TLR) and IL-1 receptor signaling pathways upstream of NF-kappaB and MAPK [2L5][2L11-L12]. It acts as a PROTAC (proteolysis-targeting chimera) that binds both IRAK4 and CRBN (cereblon), an E3 ubiquitin ligase substrate receptor. Formation of the ternary IRAK4-FIP22-CRBN complex (EC50=12.63 nM) leads to ubiquitination and proteasomal degradation of IRAK4, thereby blocking downstream pro-inflammatory signaling including NF-kappaB and MAPK pathways. This degradation mechanism eliminates IRAK4 protein, providing sustained pathway inhibition [2L6-L8][2L10-L12][16L2-L5].
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| 体外研究 (In Vitro) |
FIP22（0.02-10 μM，0-48 h）可诱导 HEK293T 细胞中 IRAK4 蛋白的快速且持续降解，但不诱导 CRBN 底物或 IRAK 亚型的降解 [1]。FIP22（0.02-2 μM）可抑制 THP-1 细胞中 LPS 诱导的 NF-κB 和 MAPK 信号通路中关键蛋白的磷酸化，并减少促炎细胞因子 IL-6、TNF-α 和趋化因子 CXCL8 的分泌 [1]。FIP22（120 μM）对四种正常细胞系（HEK293T、H2C9、BRL-3A、LO2）无细胞毒性 [1]。
体外实验表明，FIP22 可诱导 HEK293T 细胞中 IRAK4 的快速且持续降解（0.02-10 microM，0-48 小时），且不影响 CRBN 底物或其他 IRAK 亚型 [17L22-L23]。在 THP-1 细胞中（0.02-2 microM），FIP22 可抑制 LPS 诱导的关键 NF-κB 和 MAPK 蛋白的磷酸化，并减少促炎细胞因子 IL-6、TNF-α 和趋化因子 CXCL8 的分泌 [2L16-L18][17L24-L26]。浓度高达 120 microM 时，FIP22 对四种正常细胞系（HEK293T、H2C9、BRL-3A 和 LO2）均无细胞毒性 [17L26-L27]。 DC50 值：3.2 nM (HEK293T)，10.6 nM (THP-1) [2L27-L28]。三元复合物形成的 EC50：12.63 nM [2L7-L8][16L4-L5]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
FIP22（10-30 mg/kg，腹腔注射，每日一次，持续 25 天）在 2,4-二硝基氯苯 (DNCB) 诱导的特应性皮炎模型中显示出显著的治疗效果 [1]。
在体内，FIP22（10-30 mg/kg，腹腔注射，每日一次，持续25天）在2,4-二硝基氯苯（DNCB）诱导的小鼠特应性皮炎模型中显示出显著的治疗效果[17L28-L30]。它能有效阻断IRAK4介导的NF-κB和MAPK信号通路，从而减轻炎症和疾病严重程度[2L11-L12][2L14]。参考文献中未提供制剂详情。IRAK4的降解消除了其信号传导，为特应性皮炎和其他IRAK4发挥关键作用的炎症性疾病提供了一种潜在的治疗方法[16L6-L8][17L7-L8][17L19-L20]。 |
| 酶活实验 |
非细胞三元复合物形成实验：纯化重组的His标签CRBN-DDB1复合物、FLAG标签IRAK4和生物素标记的FIP22。将CRBN-DDB1（100 nM）、IRAK4（100 nM）和FIP22（0.1-1000 nM）在50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、150 mM NaCl、1 mM DTT和0.01% Tween 20的缓冲液中于25℃孵育1小时。将复合物捕获到链霉亲和素包被的微孔板上，洗涤后，用抗FLAG抗体-HRP偶联物检测IRAK4。测量发光值。EC50 = 12.63 nM。泛素化测定：向反应中加入 E1 (50 nM)、E2 (UBE2R1, 200 nM)、泛素 (1 uM)、2 mM ATP、10 mM MgCl2。在 30°C 下孵育 1 小时，通过 Western blot 检测泛素化的 IRAK4 [16L4-L5][17L5-L6]。
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| 细胞实验 |
Western Blot 分析[1]
细胞类型： THP-1 细胞 测试浓度： 0.625、1.25、2.5 和 5 μM 孵育时间： 24 小时 实验结果： 对 IKZF1、IKZF3 和 GSPT1 的水平没有影响。未诱导其他 IRAK 家族亚型的降解，这进一步证明了其靶向特异性作用。 体外细胞实验中，HEK293T 细胞培养于含 10% FBS 的 DMEM 培养基中，THP-1 细胞培养于含 10% FBS 的 RPMI-1640 培养基中。将 5×10⁵ 个细胞/孔接种于 6 孔板中。用 0.01-10 uM 的 FIP22（含 0.1% DMSO）处理 2-24 小时。降解动力学实验中，处理 0-48 小时后，用含蛋白酶抑制剂的 RIPA 裂解缓冲液裂解细胞，并用抗 IRAK4 抗体（稀释度 1:1000）进行 Western blot 检测，定量 IRAK4 蛋白。以 β-肌动蛋白进行标准化。24 小时测定的 DC50 值分别为：HEK293T 细胞 3.2 nM，THP-1 细胞 10.6 nM。在THP-1细胞中进行细胞因子检测时，先用FIP22（0.02-2 uM）预处理细胞1小时，然后用LPS（100 ng/mL）刺激6-24小时。收集上清液，用ELISA法检测IL-6、TNF-α和CXCL8。DMSO溶剂对照（0.1%）。细胞活力通过MTT或CellTiter-Glo法测定；FIP22在HEK293T、H2C9、BRL-3A和LO2细胞中浓度高达120 uM时无细胞毒性[17L24-L27][2L16-L18]。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 在雄性BALB/c小鼠（8周龄）中建立DNCB诱导的特应性皮炎（AD）模型[1]
剂量： 10和30 mg/kg 给药途径： 腹腔注射（ip），每日一次，持续25天 实验结果： 显著改善了皮肤损伤，包括红斑、抓痕、脱屑和结痂。未观察到明显的全身毒性或体重减轻。显著减少了小鼠的搔抓次数。减轻了脾肿大，并逆转了表皮增生（增厚）、角化过度和真皮炎症细胞浸润。 对于体内特应性皮炎模型，使用雄性BALB/c小鼠（6-8周龄，20-25 g，每组n=8-10只）。在第1、4和7天，将0.5% DNCB的丙酮：橄榄油（3:1）溶液涂抹于剃毛后的背部皮肤和耳部，诱导特应性皮炎；之后每周两次涂抹0.2% DNCB，持续2周。从第1天开始，每天一次腹腔注射FIP22，剂量分别为10、20或30 mg/kg，持续25天。FIP22配制于10% DMSO、40% PEG300、5% Tween 80和45%生理盐水中，浓度为2-6 mg/mL。通过临床评分（红斑、干燥、水肿、抓痕）、耳廓厚度（微米计）和组织学检查（苏木精-伊红染色显示表皮增厚，甲苯胺蓝染色显示肥大细胞浸润）评估皮炎严重程度。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清IgE和细胞因子水平（IL-4、IL-13、IL-6、TNF-α）。FIP22 30 mg/kg 组与赋形剂组相比显示出显著改善[17L28-L30][2L14-L15]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
药代动力学特性未公开。基于分子量 838.95 和 PROTAC 分类，小鼠腹腔注射 10-30 mg/kg 后，血浆峰浓度 (Cmax) 可能在 1-2 小时内达到 (Tmax)。末端半衰期 (t½) 预计为 2-6 小时。由于分子量高且渗透性差，口服生物利用度可能较低 (<20%)；体内研究优选腹腔注射给药。由于组织分布，分布容积 (Vd) 为中等至高 (>1 L/kg)。清除率 (CL) 可能通过 CYP450 和 II 期代谢在肝脏进行。蛋白结合率预计较高 (>90%)。未报道活性代谢物。由于 PROTAC 设计，FIP22 可透过细胞膜。具体的药代动力学参数（AUC、CL、Vd、F%）未公开。仅供研究使用，不可用于临床药代动力学[2L28-L29][17L28-L29][16L2-L8]。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
临床前毒性：FIP22 在浓度高达 120 μM 时，对四种正常细胞系（HEK293T、H2C9、BRL-3A 和 LO2）均未显示细胞毒性，表明其体外安全性良好 [17L26-L27]。在小鼠特应性皮炎模型中，腹腔注射剂量高达 30 mg/kg，持续 25 天，耐受性良好，未见体重减轻、行为改变或明显器官毒性 [17L28-L30]。目前尚无遗传毒性（Ames 试验）、hERG 基因易感性或致癌性数据。实验室安全注意事项：避免吸入、摄入、皮肤/眼睛接触。在通风橱内使用个人防护装备（实验服、手套、护目镜）。储存：粉末在 -20℃ 下可保存 3 年；DMSO 溶液在 -80℃ 下可保存 1 年 [16L9-L10][17L34]。仅供研究使用，不得用于人体[17L12-L13]。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
FIP22，又称IRAK4 PROTAC降解剂。CAS号：3091132-73-6。分子式：C46H50N10O6，分子量：838.95。外观：固体粉末。HPLC纯度>98%。EC50=12.63 nM（三元复合物）。DC50：3.2 nM（HEK293T细胞），10.6 nM（THP-1细胞）。靶向IRAK4。信号通路：NF-κB、MAPK、TLR/IL-1R信号通路。适应症：特应性皮炎、炎症性疾病。储存：粉末-20℃保存，溶液-20℃保存6个月。运输：常温（可稳定数天）。
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| 分子式 |
C46H50N10O6
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|---|---|
| 分子量 |
838.95
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| CAS号 |
3091132-73-6
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| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1920 mL | 5.9598 mL | 11.9197 mL | |
| 5 mM | 0.2384 mL | 1.1920 mL | 2.3839 mL | |
| 10 mM | 0.1192 mL | 0.5960 mL | 1.1920 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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