TL033 TFA

目录号: V119115
TL033 TFA 是抗体-连接子偶联物 (ADC) 的一部分。
TL033 TFA CAS号: 2746343-70-2
产品类别: Drug-Linker Conjugates for ADC
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
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产品描述
TL033 TFA 是抗体-连接子偶联物 (ADC) 的一部分。TL033 TFA 包含一个连接子和一个具有生物活性的小分子毒素。TL033 TFA 可与 Sacituzumab 抗体(抗 Trop-2)偶联,用于合成 BT001021。BT001021 对多种癌症具有抗癌活性,例如乳腺癌、非小细胞肺癌 (NSCLC) 和胃癌。
TL033 TFA(CAS号:2746343-70-2)是抗体药物偶联物(ADC)的组成部分,也称为药物-连接子偶联物。它由连接子和具有生物活性的小分子毒素组成。该化合物可与Sacituzumab抗体(抗Trop-2抗体)偶联,合成BT001021。BT001021已证实对多种癌症具有抗癌活性,包括乳腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)和胃癌。TL033 TFA仅供研究使用,不得用于人体。
生物活性&实验参考方法
靶点
TL033 TFA itself does not have an independent biological target, as it is an ADC component. Its role is to facilitate the delivery of a bioactive small molecule toxin to cancer cells after being conjugated to an antibody. The antibody, Sacituzumab, recognizes and binds to the Trop-2 receptor, a surface antigen overexpressed in many epithelial cancers. Once bound, the ADC is internalized, and the cytotoxic payload is released. TL033 TFA is the linker-warhead complex that enables this targeted delivery mechanism. The specific molecular target of its toxin is a microtubule or DNA-damaging agent, depending on the payload structure.
体外研究 (In Vitro)
BT001021(3 天)对 HCC1806 细胞(乳腺癌细胞系)表现出细胞毒活性(EC50:13.15 nM)[1]。
本研究评估了偶联抗体药物偶联物(ADC,BT001021)对HCC1806乳腺癌细胞系的体外细胞毒性。经过3天的处理,BT001021表现出强效的杀伤作用,EC50值为13.15 nM。这表明,通过TL033 TFA递送的有效载荷能够有效抑制体外癌细胞的生长。该检测采用CellTiter-Glo或MTT等标准方法测定细胞活力,证实了剂量依赖性的细胞毒性。由于TL033 TFA本身不具有活性,因此无法获得其单独使用时的EC50数据。
体内研究 (In Vivo)
BT001021(静脉注射,3 mg/kg,每周两次,共6次)可抑制NCI-N87支架异种移植小鼠模型中的肿瘤生长,且肿瘤在治疗结束时出现消退[1]。BT001021(静脉注射,10 mg/kg,单次给药)显示出显著的肿瘤组织抑制作用和良好的药代动力学特性[1]。
在NCI-N87胃癌异种移植模型中评估了BT001021抗体偶联药物(ADC)的体内活性。小鼠每周两次静脉注射3 mg/kg的ADC,共注射六次。该治疗方案有效抑制了肿瘤生长,并在给药结束时观察到肿瘤消退。这表明该偶联物具有体内治疗潜力。此外,单次静脉注射10 mg/kg的剂量也显示出显著的肿瘤组织靶向性和良好的药代动力学特性。结果证实该ADC在动物模型中具有活性和良好的耐受性。
酶活实验
TL033 TFA 本身并非设计用于非细胞酶活性测定,其功能是与抗体偶联用于细胞递送。然而,为了验证偶联效率,可以执行标准方案。将 TL033 TFA 溶解于 DMSO 中至 10 mM,然后用 PBS(pH 7.4)稀释至 50 uM。加入 1 当量的 Sacituzumab 抗体(2 mg/mL,溶于 PBS)。在 25℃ 下温和混匀孵育 2 小时。用 20 mM 半胱氨酸淬灭过量的 TL033 TFA。使用 Zeba 脱盐柱纯化抗体药物偶联物 (ADC)。通过疏水相互作用色谱 (HIC) 或紫外-可见分光光度计 (A280/A252) 测定药物抗体比 (DAR)。典型的 DAR 目标值为 4-8。
细胞实验
对于体外细胞实验,将癌细胞(例如HCC1806乳腺癌细胞)以5000个细胞/孔的密度接种于96孔板中,培养基为含10% FBS的RPMI-1640培养基。过夜培养后,用浓度范围为0.1至100 nM的TL033 TFA偶联抗体药物偶联物(ADC,BT001021)处理细胞72小时。采用CellTiter-Glo发光法或MTT法检测细胞活力。使用GraphPad Prism软件拟合剂量反应曲线计算EC50值。每个浓度均设置三个复孔。阳性对照为已知靶向Trop-2的ADC,阴性对照为溶剂(PBS)。DMSO浓度不应超过0.1%。
动物实验
在体内动物研究中,将溶于PBS的ADC(BT001021)通过尾静脉注射给药。采用皮下移植NCI-N87胃癌异种移植瘤(肿瘤体积约150 mm³)的雌性BALB/c裸鼠(6-8周龄,每组n=8)。给药方案为每周两次,每次3 mg/kg,共6次。每3天用游标卡尺测量肿瘤大小,肿瘤体积计算公式为(长×宽²)/2。监测体重作为毒性指标。在研究终点(第28天),切除肿瘤并称重。另行进行单次静脉注射10 mg/kg的药代动力学研究,分别在给药后0、1、4、8、24、48和96小时采集血样。
药代性质 (ADME/PK)
使用 TL033 TFA 制备的抗体药物偶联物 (ADC) BT001021 表现出良好的药代动力学 (PK) 特性。小鼠单次静脉注射 10 mg/kg 后,显示出显著的肿瘤组织靶向性和良好的药代动力学特性。尽管文献中未详细列出具体的 PK 参数(半衰期、清除率、分布容积、AUC),但“良好的药代动力学特性”表明该 ADC 具有良好的药代动力学特征,包括循环时间长、全身清除率低和肿瘤暴露量高。抗体成分通常赋予 ADC 较长的体内半衰期(数天)。TL033 TFA 中的连接子设计为在循环中稳定,但在进入癌细胞后不稳定。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
TL033 TFA 的安全数据表 (SDS) 指出,吞食有害,且对水生生物具有剧毒并具有长期持续影响 (H410)。注意事项包括 P264(处理后彻底清洗皮肤)和 P270(使用时请勿进食、饮水或吸烟)。偶联抗体药物偶联物 (ADC) (BT001021) 在异种移植小鼠模型中耐受性良好,未报告明显的毒性。在每周两次、每次 3 mg/kg 的有效剂量下,未观察到体重减轻或与治疗相关的死亡。该化合物在运输过程中于室温下可稳定保存数日。处理时应遵循标准实验室安全操作规程(佩戴手套、护目镜和实验服)。由于该化合物仅供研究使用,因此没有慢性毒性数据。
参考文献

[1]. Bioactive conjugate, preparation method therefor and use thereof. Patent CA3080236.

其他信息
TL033 TFA 是一种用于抗体偶联药物 (ADC) 合成的研究级化合物。别名:TL033、TL033 三氟乙酸盐。CAS 编号:2746343-70-2。分子式:C76H103N13O23S2.xC2F3O2(TFA 盐);游离碱分子量:1630.83。纯度:通常通过 HPLC 测定 >95%。储存:粉末,密封,-20℃ 保存,避光防潮。运输:常温或蓝冰运输。毒性:吞咽有害,对水生生物有毒性。仅供研究使用,不得用于人体诊断或治疗。该化合物是抗癌 ADC BT001021 的关键中间体。专利号:CA3080236。研究重点是表达 Trop-2 的实体瘤。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C76H103N13O23S2.XC2HF3O2
分子量
1630.83 (free base)
精确质量
1759.697
CAS号
2746343-70-2
相关CAS号
TL033
PubChem CID
178201530
外观&性状
Light yellow to yellow solid powder
tPSA
503
氢键供体(HBD)数目
6
可旋转键数目(RBC)
56
重原子数目
122
分子复杂度/Complexity
3480
定义原子立体中心数目
2
SMILES
C.CC[C@@]1(C2=C(COC1=O)C(=O)N3CC4=C(C5=CC=CC=C5N=C4C3=C2)CCN(C(C)C)S(=O)(=O)C)OC(=O)OCC6=CC=C(C=C6)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)COCC(=O)NCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCN7C=C(N=N7)CNC(=O)CCCC#CC8=CN=C(N=C8)S(=O)(=O)C.C(=O)(C(F)(F)F)O
InChi Key
KVTPBZJDYIBKNE-SNVOKXEBSA-N
InChi Code
InChI=1S/C76H103N13O23S2.C2HF3O2.CH4/c1-6-76(63-44-66-70-61(49-88(66)72(94)62(63)51-110-73(76)95)59(60-15-10-11-16-64(60)84-70)23-26-89(54(2)3)114(5,99)100)112-75(96)111-50-55-19-21-57(22-20-55)82-71(93)65(17-12-13-24-77)83-69(92)53-109-52-68(91)78-25-28-101-30-32-103-34-36-105-38-40-107-42-43-108-41-39-106-37-35-104-33-31-102-29-27-87-48-58(85-86-87)47-79-67(90)18-9-7-8-14-56-45-80-74(81-46-56)113(4,97)98;3-2(4,5)1(6)7;/h10-11,15-16,19-22,44-46,48,54,65H,6-7,9,12-13,17-18,23-43,47,49-53,77H2,1-5H3,(H,78,91)(H,79,90)(H,82,93)(H,83,92);(H,6,7);1H4/t65-,76-;;/m0../s1
化学名
[4-[[(2S)-6-amino-2-[[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[4-[[6-(2-methylsulfonylpyrimidin-5-yl)hex-5-ynoylamino]methyl]triazol-1-yl]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethylamino]-2-oxoethoxy]acetyl]amino]hexanoyl]amino]phenyl]methyl [(19S)-19-ethyl-10-[2-[methylsulfonyl(propan-2-yl)amino]ethyl]-14,18-dioxo-17-oxa-3,13-diazapentacyclo[11.8.0.02,11.04,9.015,20]henicosa-1(21),2,4,6,8,10,15(20)-heptaen-19-yl] carbonate;methane;2,2,2-trifluoroacetic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Note: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气下),避免暴露在潮湿和光照下。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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