IMC-EB10

别名: LY3012218
目录号: V119816
IMC-EB10 (LY3012218) 是一种抗 FLT3 单克隆抗体。
IMC-EB10 产品类别: FLT3
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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500mg
1g
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产品描述
IMC-EB10 (LY3012218) 是一种抗 FLT3 单克隆抗体。IMC-EB10 与 FLT3 具有高亲和力 (Kd = 158 pM),并能阻断 FLT3 配体与 FLT3 的结合 (IC50 ≈ 10 nM),从而抑制白血病细胞中的 MAPK、STAT5 和 PI3K/Akt 信号通路。IMC-EB10 可增强美沙酮的抗白血病作用,抑制表达野生型或 ITD 突变型 FLT3 受体的白血病细胞。IMC-EB10 可延长急性淋巴细胞白血病 (ALL) 细胞系和原代白血病样本的存活时间,并降低非肥胖型糖尿病/重症联合免疫缺陷患者的移植率。IMC-EB10 可用于白血病研究。
生物活性&实验参考方法
体外研究 (In Vitro)
IMC-EB10(10 μg/mL,1 小时)可降低 Hb1119 和 SEM-K2 细胞中 FLT3 及其下游信号蛋白 STAT5、Akt 和 MAPK 的磷酸化水平,但可激活 REH 和 RS411 细胞中的这些蛋白 [1]。IMC-EB10(10 μg/mL,1 小时)可激活 ALL 细胞中的 FLT3 及其下游 Akt [1]。IMC-EB10(0.4-200 nM,1 小时)可抑制 EOL-1、EM3、BaF3-ITD 和 MV4;11 细胞中 FLT3-Fc 诱导的野生型 FLT3 磷酸化以及 ITD 突变型 FLT3 的配体非依赖性组成型磷酸化 [4]。 IMC-EB10(0.4-200 nM,1 小时)抑制了 EOL-1、EM3、BaF3-ITD 和 MV4;11 细胞中 FLT3-Fc 诱导的 MAPK、AKT 和 Stat5 的磷酸化[4]。IMC-EB10(1.5-100 nM,1 小时)抑制了 EOL-1 和 BaF3-ITD 细胞中 FLT3-Fc 诱导的增殖[4]。
体内研究 (In Vivo)
IMC-EB10 (400 μg/10 mg/kg,腹腔注射,细胞注射后 24 小时开始每周三次/细胞小时注射后 24 开始一次/细胞注射后 24 小时每天共三次或细胞注射后 7 天开始每周三次,共 30 天/每周 2 次,共 3 周) 在 SEM-K2 NOD/SCID 模型中可简化 SEM-K2细胞的存在,通过自然杀伤细胞介导细胞毒性,不选择细胞,与单独使用甲氨蝶呤相比可延长生存期[1][3]。 IMC-EB10 (400 μg,腹腔注射,每周三次,共14周)可减少ALLs NOD/SCID模型中的细胞入口[1]。 IMC-EB10 (100-500 μg,腹腔注射,每周3次,共14周)。 IMC-EB10 (100-500 μg,腹腔注射,每周3次,共14周)。 20 天) EOL-1 和 BaF3-ITD 异种移植白细胞模型中可减少骨髓中的细胞数量,并延长肿瘤生存期[4]。
细胞实验
Western Blot 分析[1]
细胞类型: Hb1119、SEM-K2 细胞
测试浓度: 10 μg/mL
孵育时间: 1 小时
实验结果: FLT3 表达降低,下游信号蛋白 STAT5、Akt 和 MAPK 的磷酸化水平降低。
Western Blot 分析[1]
细胞类型: REH、RS411 细胞
测试浓度: 10 μg/mL
孵育时间: 1 小时
实验结果: FLT3 表达激活,下游信号蛋白 STAT5、Akt 和 MAPK 的磷酸化水平升高。
Western Blot 分析[1]
细胞类型: ALL
测试浓度: 10 μg/mL
孵育时间: 1 小时
实验结果: 激活 FLT3 及其下游 Akt。
ELISA 检测[4]
细胞类型: EOL-1、EM3、BaF3-ITD、MV4;11 细胞
测试浓度: 0.1、0.4、1、4、10、40、100、200 nM
孵育时间: 1 小时
实验结果: 以剂量依赖的方式阻断 FL 诱导的 FLT3 受体磷酸化,IC50 为 0.4 至 4 nM。阻断了 MAPK 的磷酸化和组成性磷酸化,抑制了 EOL-1 和 BaF3-ITD 细胞中 FL 诱导的 AKT 磷酸化和 Stat5 磷酸化。
动物实验
动物/疾病模型: SEM-K2 (0.5×106) NOD/SCID 小鼠模型[1]
剂量: 400 μg
给药途径: 腹腔注射,细胞注射后 24 小时开始,每周三次;细胞注射后 24 小时开始,一次;细胞注射后 24 小时开始,隔天一次,共三次;或细胞注射后 7 天开始,每周三次,持续 30 天
实验结果: 外周血、脾脏和骨髓中人源细胞减少,SEM-K2 细胞含量降低至 <1%,延长生存期。未筛选出耐药细胞,通过自然杀伤细胞介导细胞毒性。
动物/疾病模型: ALLs (1×10⁶) NOD/SCID 小鼠模型[1]
剂量: 400 μg
给药途径: 腹腔注射,每周三次,持续 14 周
实验结果: 细胞植入减少。
动物/疾病模型: SEM-K2 (5×10⁵) NOD/SCID 小鼠模型[3]
剂量: 10 mg/kg + 100 mg/kg 甲氨蝶呤
给药途径: 腹腔注射,每周两次,持续 3 周,然后每周一次,持续 3 周
实验结果:与单独使用甲氨蝶呤相比,生存期显著延长。
动物/疾病模型: EOL-1 (5×10⁶) 异种移植白血病 NOD/SCID 小鼠(雄性,6-8 周龄)模型[4]
剂量: 100、250、500 μg
给药途径: 腹腔注射,每周 3 次,持续 20 天
实验结果: 骨髓中肿瘤细胞数量减少。
动物/疾病模型: BaF3-ITD (5×10⁴) 异种移植白血病 NOD/SCID 小鼠(雄性,6-8 周龄)模型[4]
剂量: 100、500 μg
给药途径:腹腔注射,每周3次
实验结果:延长了生存期。
参考文献

[1]. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16651440/

[2]. https://aacrjournals.org/cancerres/article/69/9_Supplement/2923/555053

[3]. https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0006497119512526

[4]. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15105287/

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
外观&性状
Typically exists as solids at room temperature
别名
LY3012218
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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