| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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beta-Amyloid (1-42), human, Ala(13C3,15N) TFA targets the same biological pathways as the unlabeled Abeta1-42, but as a labeled standard it is primarily a tool for quantification rather than a modulator. Abeta1-42 binds to multiple neuronal receptors including the cellular prion protein (PrPc), metabotropic glutamate receptor 5 (mGluR5), N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptors, and the receptor for advanced glycation end products (RAGE). These interactions trigger oxidative stress, calcium dysregulation, synaptic dysfunction, and neuroinflammation, ultimately leading to neuronal death in Alzheimer‘s disease. The labeled peptide is used as a tracer to study these interactions by mass spectrometry, enabling precise measurement of Abeta concentrations in various experimental contexts. It can also be used in receptor binding assays to compete with unlabeled Abeta for receptor occupancy, with detection via MS rather than radiolabels.
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| 体外研究 (In Vitro) |
氢、碳和其他元素的稳定重同位素已被引入药物分子中，主要用作药物研发过程中定量分析的示踪剂。涉及氘标记药物人体应用的研究表明，与未氘代的同类药物相比，这些化合物可能具有一些优势。氘代作用因其可能影响药物的药代动力学和代谢特征而备受关注。氘代丁苯那嗪是首个获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准的氘代药物。这种氘代丁苯那嗪用于治疗亨廷顿舞蹈症以及迟发性运动障碍。正在进行的临床试验表明，许多其他氘代化合物正在被评估用于治疗人类疾病，而不仅仅是作为研究工具。
体外实验表明，人β-淀粉样蛋白(1-42) Ala(13C3,15N)TFA 的聚集特性与未标记的肽段相同。当新鲜制备成单体（溶于HFIP或NaOH，然后用PBS稀释至10-50 microM）时，该肽段最初保持单体状态。在37degC下放置一段时间后，它会形成可溶性寡聚体（4-24小时内），最终形成不溶性原纤维（72小时以上）。同位素标记不会改变肽段的聚集动力学或二级结构（聚集体主要为β折叠）。标记的肽段可用作内标，通过LC-MS/MS法准确定量细胞培养上清液或裂解液中的未标记Aβ1-42。在神经毒性试验中，未标记的Aβ1-42（5-20 microM）可在48小时后诱导原代皮层神经元或SH-SY5Y细胞死亡，IC50值为5-10 microM，该结果通过MTT或LDH释放法测定。标记后的Aβ1-42在生物学上与未标记的Aβ1-42相同。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在某些情况下，氘代化合物可能比非氘代化合物更具优势，这通常是由于其清除率的改变。氘代作用也可能改变代谢途径，从而降低毒性。预计不久之后将有更多氘代化合物获得批准。临床医生需要熟悉这些新药的剂量、疗效、潜在副作用以及独特的代谢特征。
在体内，人源β-淀粉样蛋白(1-42) Ala(13C3,15N)TFA被用作代谢研究的示踪剂，而非治疗药物。在阿尔茨海默病啮齿动物模型（例如野生型小鼠或APP/PS1转基因小鼠）中，注射标记的Aβ肽（通常为1-10微克，脑室内或海马内注射）可以定量分析其从脑组织到血液和脑脊液的清除率。利用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术，可以将标记肽与内源性Aβ区分开来，从而精确测定其半衰期和分布。研究表明，注射的Aβ1-42在小鼠脑内的清除半衰期约为1-2小时。标记肽还可用于评估抗Aβ抗体或β-分泌酶抑制剂降低Aβ水平的疗效。由于缺乏慢性积累，急性注射不会引起阿尔茨海默病的全部病理表型。 |
| 酶活实验 |
体外酶/受体结合（非细胞）通用方案：对于受体结合研究，使用放射性标记的Aβ或标记示踪剂进行竞争性结合实验。将重组PrPc或mGluR5蛋白（1 ug/孔）包被于96孔板，4℃过夜。用5% BSA/PBS封闭1小时。向每个孔中加入浓度递增的未标记Aβ1-42（0.1-10 uM），并与固定浓度的β-淀粉样蛋白(1-42)人源Ala(13C3,15N)TFA（0.1 uM，用作质谱可检测示踪剂）混合。室温孵育2小时。用含0.05% Tween-20的PBS洗涤三次。用含0.1%甲酸的50%乙腈洗脱结合的肽段。采用液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 分析洗脱液，监测标记肽（13C3,15N-Ala 的 m/z）与未标记肽的质量跃迁。计算每个孔中回收的示踪剂占总添加示踪剂的百分比作为特异性结合。利用置换曲线的非线性回归确定 IC50 和 Ki 值。该方法在保持灵敏度的同时避免了放射性污染。
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| 细胞实验 |
体外细胞实验通用方案：对于Aβ的产生和清除研究，将稳定表达人APP（淀粉样前体蛋白）的SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞或原代小鼠皮层神经元培养于添加了B27补充剂的Neurobasal培养基中。如果测定清除率，则用γ-分泌酶抑制剂（例如DAPT，1 uM）处理细胞以阻断内源性Aβ的产生。向培养基中加入β-淀粉样蛋白(1-42)，人源，Ala(13C3,15N) TFA（100 nM至1 uM）。孵育2-48小时。在不同时间点收集培养上清液。对于细胞内Aβ的测定，用PBS洗涤细胞，用含有蛋白酶抑制剂的RIPA裂解缓冲液裂解细胞。向每个样品中加入已知量的内标（例如，13C标记的Aβ1-40）。用冷乙腈（1:3 v/v）沉淀蛋白质，离心，真空干燥上清液。用含0.1%甲酸的水溶液复溶。使用C18色谱柱和含0.1%甲酸的水/乙腈梯度进行LC-MS/MS分析。通过多反应监测（MRM）特定肽段（例如N端片段）定量标记和未标记的Aβ。清除率计算为标记Aβ随时间的消失量。
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| 动物实验 |
体内动物实验通用方案：使用8-10周龄雄性C57BL/6小鼠。将β-淀粉样蛋白(1-42)人源Ala(13C3,15N)TFA溶于0.1% NH4OH溶液中（浓度为1 mg/mL），然后用PBS缓冲液稀释至0.2 mg/mL（最终pH值为7.4）。用异氟烷麻醉小鼠，并将其固定于立体定位仪上。将2 μL（400 ng）标记的Aβ肽注射到右侧脑室（坐标：前囟后方AP -0.3 mm，ML +1.0 mm，DV -2.5 mm）或直接注射到海马（AP -2.0 mm，ML +/-1.5 mm，DV -1.8 mm）。静置5分钟使其扩散。注射后0.5、1、2、4、8、12和24小时，处死小鼠（每个时间点n=3-4只）。从枕大池收集脑脊液（CSF），通过心脏穿刺采集血液至EDTA抗凝管中（离心分离血浆），并用PBS灌注脑组织。将脑组织在1 mL含蛋白酶抑制剂的PBS中匀浆。按照细胞实验方案所述，处理脑脊液、血浆和脑匀浆，用于LC-MS/MS分析。通过将单相衰减模型拟合到浓度-时间数据来计算消除半衰期。比较野生型小鼠和阿尔茨海默病模型小鼠的清除率。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
一般药代动力学特性：对于脑室内（ICV）注射的β-淀粉样蛋白(1-42)，人源，Ala(13C3,15N)TFA，在小鼠体内的脑组织消除半衰期约为1-2小时。脑组织浓度峰值在ICV注射后5分钟内出现，达到约20-50 ng/g组织（取决于注射剂量）。该肽通过血管周围引流和LRP1（低密度脂蛋白受体相关蛋白1）介导的血脑屏障（BBB）转运，迅速从脑组织流出至血液。1小时内，约30-50%的注射剂量存在于血浆中，血浆峰浓度（Cmax）在1-2小时达到。由于快速的蛋白水解降解以及肝肾的清除，血浆半衰期较短（<30分钟）。不到1%的注射剂量以原形经尿液排出。该肽可被多种蛋白酶代谢，包括脑啡肽酶、胰岛素降解酶（IDE）和基质金属蛋白酶。标记肽在-80℃的冷冻脑匀浆中可稳定保存数月。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
总体毒性概况：β-淀粉样蛋白(1-42)，人源，Ala(13C3,15N) TFA 不适用于治疗用途；毒性数据来源于动物急性给药研究。在小鼠脑室内注射剂量高达 2 μg（常用示踪剂量）时，24-72 小时内未观察到急性行为改变或死亡。较高剂量（10-50 μg）可引起癫痫发作、神经元凋亡和神经炎症，因为已知未标记的 Aβ1-42 具有神经毒性。标记版本也具有这种神经毒性。体外实验表明，该肽（10-50 μM）在 48 小时后可诱导培养神经元 50-80% 的细胞死亡（MTT 法），与未标记的 Aβ 相似。在示踪研究中使用的低剂量下，TFA 盐不具有全身毒性。处理神经毒性肽时应遵循标准安全预防措施：佩戴手套和实验服，避免产生气溶胶，并作为危险生物废物处置。根据有限的数据，该肽尚未被归类为致癌物或致突变物。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
β-淀粉样蛋白 (1-42)，人，Ala(13C3,15N) TFA 是一种高纯度的稳定同位素标记肽，用作质谱分析的内标。该肽序列为：Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val-Ile-Ala。位于第 2、21 和/或 30 位（取决于产品）的标记丙氨酸 (Ala) 残基含有 13C3 和 15N。标记肽的分子量约为 4518.01 Da，与未标记肽相比，每个标记的丙氨酸残基的分子量增加约 4 Da。该肽以冻干粉形式提供，请于 -20℃ 避光保存。使用前，先用 1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇 (HFIP) 溶解至 1 mM 使其单体化，室温孵育 1 小时，分装后用氮气吹干；然后用 DMSO 溶解至 5 mM，最后用 PBS 稀释后用于实验。本产品仅供研究使用，不得用于人体诊断或治疗用途。
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| 分子式 |
C20013C3H311N5415NO60S
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| 分子量 |
4518.01
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| 相关CAS号 |
β-Amyloid (1-42), human TFA; β-Amyloid (1-42), human; β-Amyloid-15N (1-42), human TFA
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| 序列 |
Asp-{Ala(13C3,15N)}-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val-Ile-AlaD-{Ala(13C3,15N)}-EFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA
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| 外观&性状 |
white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month Note: 请将本产品存放在密封保护的环境中，避免受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.2213 mL | 1.1067 mL | 2.2134 mL | |
| 5 mM | 0.0443 mL | 0.2213 mL | 0.4427 mL | |
| 10 mM | 0.0221 mL | 0.1107 mL | 0.2213 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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