| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PKI (14-24) amide TFA targets the catalytic subunit of protein kinase A (PKA), also known as PKA Calpha, Cbeta, and Cgamma. It binds to the active site of the catalytic subunit with high affinity (Ki in the low nanomolar range, typically 1-10 nM), acting as a competitive inhibitor with respect to protein/peptide substrates. The peptide contains the pseudosubstrate sequence (RRRNAI) that mimics the PKA consensus phosphorylation motif (RRXS/T), with an alanine residue replacing the serine/threonine that would normally be phosphorylated. This alanine substitution renders the peptide a substrate competitor that blocks access of physiological substrates to the active site. It does not bind to the regulatory subunits of PKA nor to other AGC family kinases with high affinity.
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| 体外研究 (In Vitro) |
环磷酸腺苷诱导的皂苷可渗透细胞淀粉酶释放不受 PKI (14–24)酰胺 TFA 抑制 [2]。
体外实验表明，PKI (14-24) 酰胺 TFA 能有效抑制细胞裂解液中的 PKA 活性。在使用纯化的 PKA 催化亚基和肽底物（例如，kemptide、LRRASLG）进行的 PKA 激酶活性测定中，该肽的 IC50 值通常在 1-50 nM 之间。在无细胞测定中，该肽能强烈抑制细胞匀浆中 cAMP 依赖性蛋白激酶的活性，这可以通过检测各种合成底物（例如，组蛋白 H1 或特定的 PKA 肽底物）的磷酸化水平来评估。该抑制作用与底物竞争，但与 ATP 非竞争。该肽还能抑制神经组织提取物中的 PKA 活性。在浓度高达 10 uM 时，未观察到对其他蛋白激酶（例如，PKC、PKB/Akt、CaMKII）的活性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
PKI (14-24) 酰胺 TFA 在动物模型中被用作 PKA 的药理学抑制剂，以研究 PKA 在各种生理和病理过程中的作用。它可通过脑室内 (ICV) 注射、鞘内 (IT) 注射和组织微注射等方式给药。例如，在神经性疼痛大鼠模型中，鞘内注射 PKI (14-24) 酰胺 (0.1-10 ug) 可逆转 PKA 介导的痛觉过敏，减轻机械性痛觉过敏和热痛觉过敏。在小鼠记忆模型中，海马内注射 10-50 uM PKI (14-24) 酰胺可损害长时程增强 (LTP) 和记忆巩固。该肽不易穿过血脑屏障，必须通过注射直接给药于中枢神经系统或组织。由于其降解迅速，通常不进行全身给药。
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| 酶活实验 |
无细胞激酶活性测定中PKA抑制的标准方案：配制反应混合物，其中包含20 mM Tris-HCl（pH 7.5）、10 mM MgCl2、0.2 mM ATP、0.1 mg/mL BSA、50 uM kemptide底物和0.5 nM纯化的PKA催化亚基。加入系列稀释的PKI（14-24）酰胺TFA（0.1-1000 nM），并在30℃预孵育5分钟。加入ATP启动反应。15分钟后，加入磷酸至终浓度为0.5%终止反应。取20 uL反应液点样于P81磷酸纤维素滤纸上，用0.75%磷酸洗涤3次，干燥后，通过闪烁计数法定量放射性掺入量。非放射性替代方法：ADP-Glo™ 或 Transcreener® ADP 荧光检测。IC50 通过非线性回归确定。
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| 细胞实验 |
对于抑制PKA活性的细胞实验：将神经元细胞系（例如PC12、SH-SY5Y、原代皮层神经元）或HEK293细胞接种于6孔板（1×10⁶个细胞/孔），培养至80%汇合度。为了将肽递送至细胞内，可使用细胞膜通透剂（例如链球菌溶血素O或洋地黄皂苷），或通过显微注射将肽物理加载到大细胞中。或者，可将合成的PKI酰胺肽与细胞穿透肽（例如TAT、穿透肽）偶联，以提高细胞摄取效率。对于细胞裂解液实验：在PKA激活前，将细胞用肽（0.1-10 uM）处理1-4小时，或先在低渗裂解缓冲液中用肽预孵育。为了测定细胞裂解液中的PKA活性，用福斯克林（10 uM）或IBMX（100 uM）刺激细胞以提高cAMP水平，或者直接用PKA激活剂Sp-cAMPS（100 uM）刺激细胞。10-15分钟后，裂解细胞，并使用商业化的PKA激酶活性检测试剂盒（例如Promega PepTag、SignalChem PKA assay）测定PKA活性。如果肽段成功导入细胞，则可使用p-CREB Ser133的Western blotting检测完整细胞中的PKA活性。PKI（14-24）的酰胺形式对羧肽酶降解具有抵抗力，但可能仍然对氨肽酶和其他蛋白酶敏感；可在细胞裂解缓冲液中加入蛋白酶抑制剂以保持肽段活性。
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| 动物实验 |
体内研究：对雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）进行鞘内注射时，用异氟烷麻醉后固定于立体定位仪上。将连接25 μL Hamilton注射器的30号针头插入L5和L6椎体之间的蛛网膜下腔。将PKI (14-24)酰胺TFA溶解于pH 7.4的无菌人工脑脊液(aCSF)或PBS缓冲液中，浓度范围为0.1-100 μM（通常为10 μM，体积5-10 μL）。肽段在1-2分钟内注射完毕。对于小鼠（C57BL/6，8-12周龄）的海马内注射，将双侧引导套管植入背侧海马（坐标：距前囟AP -2.0 mm，ML +/-1.5 mm，DV -1.5 mm）。恢复5-7天后，对动物进行短暂麻醉，然后插入注射针（超出引导套管1 mm）。以0.25 μL/min的速率注入PKI(14-24)酰胺，总注射量为0.5-1.0 μL（每侧0.5-5 μg）。在记忆研究中，在恐惧条件反射或莫里斯水迷宫训练结束后立即注射肽。行为学测试后，通过组织学验证注射位置是否正确。在疼痛研究中，使用冯·弗雷丝测量机械性痛觉过敏，并在肽注射前后使用哈格里夫斯试验评估热痛觉过敏。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚无PKI (14-24)酰胺TFA的正式药代动力学数据。该肽在血清和组织匀浆中会被蛋白酶迅速降解（血清半衰期通常<30分钟）。由于其分子量（~1200-1400 Da）和极性，它无法大量穿过血脑屏障（BBB）。因此，中枢神经系统研究需要直接通过中枢神经系统给药（脑室内、鞘内或脑内输注）。全身给药后，该肽会迅速经肾脏（通过肾小球滤过）清除，并在血液和组织中被蛋白水解酶降解。TFA盐形式可提高肽在水性缓冲液（PBS、水）中的溶解度。肽储备液（1-10 mM）通常分装后储存在-20℃或-80℃，以避免反复冻融。该肽在-20℃下冻干保存可稳定数月。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
PKI (14-24) 酰胺 TFA 在研究剂量范围内（通常为微克至低毫克/千克范围）毒性较低。在小鼠中，鞘内注射剂量高达 50 微克（约 2.5 毫克/千克）不会引起明显的行为改变或运动障碍。海马内注射 10 微摩尔浓度（每侧 5 微克）不会导致神经元细胞死亡（NeuN 染色评估）。目前尚无全身急性毒性数据。在极高浓度（100 微摩尔，每侧 50 微克）下，可能会出现轻度神经炎症（小胶质细胞活化），但相关报道并不一致。该肽不具有致突变性或致癌性。处理肽粉末时应采取标准实验室防护措施（戴手套、穿实验服、佩戴护目镜）。避免气溶胶化。该肽仅供研究使用，不得用于人体。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
PKI (14-24) 酰胺 TFA 并非药物，也未进行临床试验或获得监管部门批准。它是一种研究用肽，仅供科学研究用作 PKA 抑制剂。它是全长 PKI (5-24) 肽的较短、更稳定的衍生物，后者最初是从兔骨骼肌中分离出来的。该肽被广泛用作验证 PKA 参与信号转导通路的标准工具。通过替换关键的丙氨酸残基，还可以利用其假底物抑制机制来设计其他蛋白激酶的特异性抑制剂。虽然 PKI 酰胺本身并非治疗候选药物，但对其作用机制的理解有助于针对 PKA 的药物研发，以治疗心力衰竭、癌症、炎症性疾病和神经系统疾病等。该肽可从多家供应商处购买，用于研究用途。
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| 分子式 |
C51H87F3N24O17
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|---|---|
| 分子量 |
1365.38
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| 精确质量 |
1364.663
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| CAS号 |
1293946-39-0
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| 相关CAS号 |
PKI (14-24)amide;100853-61-0
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| PubChem CID |
71311694
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
720
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| 氢键供体(HBD)数目 |
23
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| 氢键受体(HBA)数目 |
25
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| 可旋转键数目(RBC) |
42
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| 重原子数目 |
95
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| 分子复杂度/Complexity |
2590
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| 定义原子立体中心数目 |
11
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| SMILES |
[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N)CC(=O)O)(NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)CNC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCNC(N)=N)CC1NC=NC=1.C(F)(F)(F)C(=O)O
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| InChi Key |
WHXDJOUKXDRBLV-IQFKIXDSSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C49H86N24O15.C2HF3O2/c1-5-22(2)36(46(88)71-30(15-25-19-59-21-64-25)44(86)69-29(38(52)80)17-35(78)79)72-39(81)23(3)65-43(85)31(16-32(51)75)70-41(83)28(11-8-14-62-49(57)58)68-40(82)26(9-6-12-60-47(53)54)67-34(77)20-63-45(87)37(24(4)74)73-42(84)27(66-33(76)18-50)10-7-13-61-48(55)56;3-2(4,5)1(6)7/h19,21-24,26-31,36-37,74H,5-18,20,50H2,1-4H3,(H2,51,75)(H2,52,80)(H,59,64)(H,63,87)(H,65,85)(H,66,76)(H,67,77)(H,68,82)(H,69,86)(H,70,83)(H,71,88)(H,72,81)(H,73,84)(H,78,79)(H4,53,54,60)(H4,55,56,61)(H4,57,58,62);(H,6,7)/t22-,23-,24+,26-,27-,28-,29-,30-,31-,36-,37-;/m0./s1
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| 化学名 |
(3S)-4-amino-3-[[(2S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[(2-aminoacetyl)amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]acetyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-4-oxobutanoic acid;2,2,2-trifluoroacetic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O: 100 mg/mL (73.24 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.7324 mL | 3.6620 mL | 7.3240 mL | |
| 5 mM | 0.1465 mL | 0.7324 mL | 1.4648 mL | |
| 10 mM | 0.0732 mL | 0.3662 mL | 0.7324 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Kiss2 peptide acetate
Rp-8-Br-cAMPS sodium
8-Bromo-cAMP
Sp-8-Br-cAMPS
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