L-Leucine-13C6,15N (L-leucine 13C6,15N)

目录号: V70233 纯度: ≥98%
L-Leucine-13C6,15N 是带有 13C 标签和 15N 标签的 L-亮氨酸。
L-Leucine-13C6,15N (L-leucine 13C6,15N) CAS号: 202406-52-8
产品类别: Endogenous Metabolite
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
Other Sizes

Other Forms of L-Leucine-13C6,15N (L-leucine 13C6,15N):

  • L-亮氨酸
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产品描述
L-亮氨酸-13C6,15N 是带有 13C 和 15N 标记的 L-亮氨酸。L-亮氨酸是一种必需的支链氨基酸 (BCAA),可激活 mTOR 信号通路。
L-亮氨酸-13C6,15N 是一种合成的、稳定同位素标记的必需支链氨基酸 L-亮氨酸类似物。该化合物中,六个碳原子 (¹3C6) 和一个氮原子 (¹⁵N) 的同位素标记已被富集。这种稳定同位素标记使其成为质谱 (LC-MS/MS) 分析的有效内标或示踪剂,可用于蛋白质代谢研究和定量氨基酸分析等应用。
生物活性&实验参考方法
靶点
Not applicable. L-Leucine-13C6,15N is not used to measure pharmacological activity. It is employed as an analytical internal standard and metabolic tracer. Its purpose is to facilitate the precise quantification of unlabeled L-Leucine in biological samples using mass spectrometry. The pharmacological profile is identical to that of unlabeled L-Leucine.
体外研究 (In Vitro)
药物化合物中通常包含碳、氢和其他元素的稳定重同位素,主要用作药物研发过程中的定量示踪剂。由于氘代可能影响药物的药代动力学和代谢特性,因此值得关注[1]。
不适用。L-亮氨酸-13C6,15N 本身不用于测定生物活性,它是一种分析标准品。然而,其母体化合物 L-亮氨酸是一种必需氨基酸,已知可激活 mTOR 信号通路。标记形式用作示踪剂,用于研究亮氨酸自身的代谢。
体内研究 (In Vivo)
不适用。L-亮氨酸-13C6,15N 是一种分析标准品,不用于体内活性测定。然而,它可以作为代谢示踪剂,用于研究体内蛋白质合成、氨基酸周转和亮氨酸代谢。为此,需给予示踪剂剂量(例如 1-10 mg/kg),并通过质谱法追踪其掺入蛋白质或转化为代谢物的情况。
酶活实验
L-亮氨酸-13C6,15N 用作内标,用于定量生物样品中的 L-亮氨酸。配制浓度为 1 mg/mL 的储备液,溶剂为 0.1 M HCl、甲醇或水。为了生成校准曲线,将已知浓度的未标记 L-亮氨酸(0.1-1000 ng/mL)和固定浓度的 L-亮氨酸-13C6,15N(例如 50 ng/mL)加入到空白生物基质(例如血浆、尿液、细胞裂解液)中。加入 3-5 倍体积的冰冷乙腈(含内标)沉淀蛋白质。离心后,取上清液,用 0.1% 甲酸水溶液稀释,然后采用 LC-MS/MS 的 MRM 模式进行分析。质谱跃迁为:L-亮氨酸 (m/z 132 → 86) 和 L-亮氨酸-13C6,15N (m/z 139 → 92)。以峰面积比(分析物/内标)对标称浓度作图,生成校准曲线。该方法可用于测定各种基质中的亮氨酸。
细胞实验
在细胞代谢研究中,将细胞(例如肝细胞、癌细胞或原代神经元)培养在不含亮氨酸的培养基中,并添加示踪量的L-亮氨酸-13C6,15N(例如50 uM),培养2-48小时。标记的亮氨酸会被细胞吸收,并可掺入新合成的蛋白质中。标记结束后,从细胞中提取蛋白质,进行水解,并将生成的游离氨基酸进行衍生化,以便通过GC-MS或LC-MS进行分析。通过测量蛋白质池中标记亮氨酸的富集度,可以计算蛋白质合成速率。或者,也可以分析细胞培养基,通过测量标记代谢物的同位素富集度来追踪亮氨酸向其代谢物(例如α-酮异己酸)的转化。
动物实验
L-亮氨酸-13C6,15N 用于代谢示踪研究。动物(例如,雄性 Sprague-Dawley 大鼠,200-250 g)禁食过夜后,通过静脉推注或灌胃给予示踪剂量的 L-亮氨酸-13C6,15N(例如,10 mg/kg)。在预定时间点(例如,给药后 0、0.25、0.5、1、2、4、6、8、12 和 24 小时)采集血样。分离血浆,并按照无细胞方案所述方法处理样品。通过液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 测定血浆中标记亮氨酸与未标记亮氨酸的比值(同位素富集度)随时间的变化。利用富集衰减曲线的区室模型可以计算亮氨酸在全身的出现率 (Ra) 和消失率 (Rd),从而衡量蛋白质周转率和氨基酸分解代谢。对于特定组织中蛋白质合成的研究,需给予受试者大剂量标记亮氨酸,并在 30-60 分钟后采集组织(例如肌肉、肝脏、脑组织),以测量同位素掺入组织蛋白的情况。
药代性质 (ADME/PK)
L-亮氨酸-13C6,15N(分子量 138.15)是一种高同位素富集度的稳定同位素标记化合物(通常 13C 和 15N 的原子百分比均为 98%)。其 13C 和 15N 的富集度通常为 98%。其理化性质与未标记的 L-亮氨酸完全相同。它易溶于水且性质稳定。当用作示踪剂时,其在代谢过程中的行为被认为与天然亮氨酸完全相同。它主要用于研究应用,不适用于治疗用途。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
L-亮氨酸-13C6,15N 是一种无毒的稳定同位素标记化合物,用作分析标准品和示踪剂。在用作内标的浓度(ng/mL 级别)下,它不构成毒理学风险。未标记的母体化合物 L-亮氨酸是一种必需氨基酸,在营养摄入水平下可安全食用。标记的类似物在示踪剂量下未发现急性或慢性毒性。
参考文献

[1]. Impact of Deuterium Substitution on the Pharmacokinetics of Pharmaceuticals. Ann Pharmacother. 2019;53(2):211-216.

其他信息
L-亮氨酸-13C6,15N(CAS号:202406-52-8)是一种高纯度、稳定同位素标记的质谱内标。它用于在研究应用中精确定量L-亮氨酸,包括蛋白质代谢和氨基酸分析。母体化合物L-亮氨酸是一种必需氨基酸,可激活mTOR信号通路。该标记类似物无治疗用途。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
13C6H1315NO2
分子量
138.12
精确质量
138.111
CAS号
202406-52-8
相关CAS号
L-Leucine;61-90-5
PubChem CID
16217567
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.0±0.1 g/cm3
折射率
1.463
LogP
-1.5
tPSA
63.3
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
3
重原子数目
9
分子复杂度/Complexity
101
定义原子立体中心数目
1
SMILES
[13CH3][13CH]([13CH3])[13CH2][13C@@H]([13C](=O)O)[15NH2]
InChi Key
ROHFNLRQFUQHCH-HUEJSTCGSA-N
InChi Code
InChI=1S/C6H13NO2/c1-4(2)3-5(7)6(8)9/h4-5H,3,7H2,1-2H3,(H,8,9)/t5-/m0/s1/i1+1,2+1,3+1,4+1,5+1,6+1,7+1
化学名
(2S)-2-(15N)azanyl-4-(113C)methyl(1,2,3,4,5-13C5)pentanoic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 7.2401 mL 36.2004 mL 72.4008 mL
5 mM 1.4480 mL 7.2401 mL 14.4802 mL
10 mM 0.7240 mL 3.6200 mL 7.2401 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们